摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10页 |
1 引言 | 第11-18页 |
1.1 CK2的结构特点 | 第11-12页 |
1.2 CK2的生物学功能 | 第12-14页 |
1.3 小G蛋白 | 第14-16页 |
1.4 稻瘟病和稻瘟病菌 | 第16-17页 |
1.5 稻瘟病菌蛋白激酶CK2与小G蛋白互作研究意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-26页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.1.1 实验菌株及植物材料 | 第18页 |
2.1.2 实验培养基 | 第18页 |
2.1.3 生化试剂 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-26页 |
2.2.1 生物信息学分析 | 第18-19页 |
2.2.1.1 稻瘟病菌MoCK2蛋白的序列获得及系统进化分析 | 第18-19页 |
2.2.1.2 稻瘟病菌MoCK2假定互作蛋白的预测 | 第19页 |
2.2.1.3 稻瘟病菌MoRho3相关蛋白的功能预测分析 | 第19页 |
2.2.2 稻瘟病菌cDNA的制备 | 第19页 |
2.2.2.1 稻瘟病菌RNA的提取 | 第19页 |
2.2.2.2 逆转录RT-PCR | 第19页 |
2.2.2.3 荧光定量PCR | 第19页 |
2.2.3 AD载体的构建 | 第19-22页 |
2.2.3.1 PCR扩增目的片段 | 第20-21页 |
2.2.3.2 PCR产物的回收 | 第21页 |
2.2.3.3 TA克隆 | 第21页 |
2.2.3.4 大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第21-22页 |
2.2.3.5 质粒的提取 | 第22页 |
2.2.3.6 质粒的酶切和连接 | 第22页 |
2.2.4 稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第22页 |
2.2.5 稻瘟病菌基因的敲除和互补 | 第22-24页 |
2.2.5.1 稻瘟病菌基因敲除原理 | 第22-23页 |
2.2.5.2 稻瘟病菌基因功能互补原理 | 第23-24页 |
2.2.5.3 稻瘟病菌原生质体的制备 | 第24页 |
2.2.5.4 稻瘟病菌原生质体转化 | 第24页 |
2.2.5.5 转化子的鉴定 | 第24页 |
2.2.6 稻瘟病菌的表型分析 | 第24-26页 |
2.2.6.1 稻瘟病菌的生长速度测定 | 第24-25页 |
2.2.6.2 产孢量测定 | 第25页 |
2.2.6.3 萌发实验 | 第25页 |
2.2.6.4 致病性鉴定 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-44页 |
3.1 稻瘟病菌MoCK2蛋白序列的获得及系统进化分析 | 第26-27页 |
3.2 稻瘟病菌MoCK2的基因敲除与互补 | 第27-29页 |
3.3 稻瘟病菌MOCK2的功能分析 | 第29-35页 |
3.3.1 MoCK2调节亚基突变体菌落形态和生长速率 | 第29页 |
3.3.2 MoCK2调节亚基突变体的分生孢子梗 | 第29-30页 |
3.3.3 MoCK2调节亚基突变体的致病性分析 | 第30页 |
3.3.4 稻瘟病菌中MoCK2假定互作蛋白的预测分析 | 第30-33页 |
3.3.5 稻瘟病菌中MoCK2与小G蛋白的互作关系 | 第33-35页 |
3.4 稻瘟病菌中MoRho3相关蛋白的功能分析 | 第35-44页 |
3.4.1 稻瘟病菌中MoRho3的功能简析 | 第35页 |
3.4.2 稻瘟病菌中MoRho3假定互作蛋白的预测 | 第35-36页 |
3.4.3 稻瘟病菌中MGG_11744的功能简析 | 第36-38页 |
3.4.4 稻瘟病菌中MGG_01279的功能简析 | 第38-41页 |
3.4.5 稻瘟病菌中MGG_11243的功能简析 | 第41-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
5 展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
附录 | 第53-60页 |
致谢 | 第60页 |