缩略词表 | 第5-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第12-20页 |
1 中国水仙研究进展 | 第12-20页 |
1.1 中国水仙概况 | 第12页 |
1.2 中国水仙组织培养研究进展 | 第12-14页 |
1.3 中国水仙基因工程的研究 | 第14-18页 |
1.4 本研究的内容和意义 | 第18-20页 |
第二章 中国水仙高效再生体系的建立 | 第20-30页 |
1 材料与方法 | 第20-22页 |
1.1 材料 | 第20页 |
1.2 方法 | 第20-22页 |
2 培养条件 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-28页 |
3.1 不同消毒时间对无菌体系建立的影响 | 第23页 |
3.2 不同温度预处理对无菌体系建立的影响 | 第23-24页 |
3.3 小鳞茎的诱导 | 第24-25页 |
3.4 6-BA、NAA和糖对小鳞茎诱导的影响 | 第25-27页 |
3.5 不同基本培养基对小鳞茎生根的影响 | 第27-28页 |
3.6 NAA对小鳞茎生根的影响 | 第28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
4.1 热水处理对外植体消毒和小鳞茎诱导的影响 | 第28-29页 |
4.2 中国水仙小鳞茎诱导影响因素 | 第29页 |
4.3 中国水仙壮苗生根影响因素 | 第29-30页 |
第三章 中国水仙ZDS基因反义载体的构建 | 第30-40页 |
1 材料与方法 | 第30-34页 |
1.1 材料 | 第30-31页 |
1.1.1 植物材料 | 第30页 |
1.1.2 菌株和质粒 | 第30页 |
1.1.3 酶与化学试剂 | 第30-31页 |
1.2 方法 | 第31-34页 |
2 结果与分析 | 第34-39页 |
2.1 中国水仙花瓣与副冠总RNA的检测 | 第34-35页 |
2.2 ZDS基因反向片段的PCR扩增 | 第35页 |
2.3 与T载体连接的重组质粒的菌液PCR检测与序列分析 | 第35-37页 |
2.4 重组质粒和pCAMBIA1301双GUS载体的双酶切 | 第37-38页 |
2.5 重组质粒P1301-ZDS菌液PCR检测与双酶切验证 | 第38页 |
2.6 重组质粒P1301-ZDS转化农杆菌的检测 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
第四章 根癌农杆菌介导ZDS反义基因转化中国水仙 | 第40-50页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
1.1 材料 | 第40页 |
1.2 方法 | 第40-42页 |
1.3 GUS组织化学法检测 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-48页 |
2.1 不同受体小鳞茎预培养对GUS瞬时表达的影响 | 第42-43页 |
2.2 不同根癌农杆菌重悬液浓度对GUS瞬时表达的影响 | 第43-44页 |
2.3 不同农杆菌侵染时间对GUS瞬时表达的影响 | 第44页 |
2.4 农杆茵稀释液对GUS瞬时表达的影响 | 第44-45页 |
2.5 农杆菌重悬液中白糖的不同浓度对GUS瞬时表达的影响 | 第45-46页 |
2.6 不同共培养时间对GUS瞬时表达的影响 | 第46页 |
2.7 不同共培养温度对GUS瞬时表达的影响 | 第46-47页 |
2.8 共培养培养基PH值对GUS瞬时表达的影响 | 第47页 |
2.9 诱导剂AS对GUS瞬时表达的影响 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
第五章 抗性小鳞茎的筛选和植物再生及检测 | 第50-56页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
1.1 材料 | 第50页 |
1.2 方法 | 第50-52页 |
2 培养条件 | 第52页 |
3 结果分析 | 第52-55页 |
3.1 不同筛选方法对抗性小鳞茎筛选效果的影响 | 第52-53页 |
3.2 抗性小鳞茎的继代增殖 | 第53-54页 |
3.3 抗性小鳞茎的生根与移栽 | 第54页 |
3.4 转基因植株叶片组织化学法检测 | 第54-55页 |
3.5 转基因植株叶片PCR检测 | 第55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
4.1 阳性率与筛选方法的关系 | 第55页 |
4.2 基因沉默现象 | 第55-56页 |
第六章 小结 | 第56-59页 |
1 中国水仙稳定高效的再生体系的建立 | 第56页 |
2 中国水仙ZDS反义基因载体的构建 | 第56-57页 |
3 根癌农杆菌介导中国水仙小鳞茎转化体系的确立 | 第57页 |
4 抗性小鳞茎的筛选及再生植株的检测 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
附录Ⅰ | 第63-64页 |
附录Ⅱ | 第64-73页 |
致谢 | 第73页 |