| 中文摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-20页 |
| 1.1 飞蝗简介 | 第16页 |
| 1.2 玉米螟简介 | 第16页 |
| 1.3 细胞色素P450概述 | 第16-17页 |
| 1.3.1 內源代谢 | 第17页 |
| 1.3.2 外源代谢 | 第17页 |
| 1.4 细胞色素P450还原酶及其研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 杀虫剂与植物次生代谢物 | 第18页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 玉米螟转录组分析 | 第20-31页 |
| 2.1 实验原始数据、实验材料和方法 | 第20-23页 |
| 2.1.1 实验原始数据来源 | 第20页 |
| 2.1.2 转录组测序文库评估 | 第20-21页 |
| 2.1.3 转录组测序数据组装 | 第21页 |
| 2.1.4 Unigene功能注释 | 第21页 |
| 2.1.5 基因表达量分析 | 第21页 |
| 2.1.6 供试昆虫 | 第21页 |
| 2.1.7 主要试剂盒仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.8 饲喂法处理,干扰亚洲玉米螟P450基因 | 第21-23页 |
| 2.2 实验结果 | 第23-29页 |
| 2.2.1 测序文库评估 | 第23-24页 |
| 2.2.2 原始数据质量评估 | 第24页 |
| 2.2.3 转录组测序数据组装 | 第24-26页 |
| 2.2.4 Unigene功能注释 | 第26页 |
| 2.2.5 表达定量分析 | 第26-27页 |
| 2.2.6 亚洲玉米螟的全长P450基因 | 第27-29页 |
| 2.2.7 饲喂法处理亚洲玉米螟 | 第29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 亚洲玉米螟细胞色素P450还原酶基因的克隆与表达分析 | 第31-42页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第31-35页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂盒仪器设备 | 第31-33页 |
| 3.1.3 亚洲玉米螟细胞色素P450还原酶全长的克隆 | 第33页 |
| 3.1.4 序列分析 | 第33页 |
| 3.1.5 cDNA模板制备 | 第33-34页 |
| 3.1.6 实时定量PCR检测 | 第34-35页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第35-40页 |
| 3.2.1 亚洲玉米螟OfCPR基因的克隆 | 第35-36页 |
| 3.2.2 亚洲玉米螟OfCPR氨基酸序列分析 | 第36-37页 |
| 3.2.3 OfCPR蛋白多序列对比与进化分析 | 第37-38页 |
| 3.2.4 OfCPR基因差异表达分析 | 第38-40页 |
| 3.3 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 干扰飞蝗细胞色素P450还原酶基因/细胞色素P450基因影响了飞蝗对西维因的敏感性 | 第42-60页 |
| 4.1 实验材料和方法 | 第42-46页 |
| 4.1.1 供试昆虫 | 第42页 |
| 4.1.2 相关试剂及仪器 | 第42页 |
| 4.1.3 cDNA的合成和LmCPR的克隆 | 第42-43页 |
| 4.1.4 LmCPR基因的生物信息学分析 | 第43页 |
| 4.1.5 实时定量PCR检测 | 第43页 |
| 4.1.6 RNAi技术干扰LmCPR | 第43-44页 |
| 4.1.7 CPR酶活力检测 | 第44页 |
| 4.1.8 西维因检测 | 第44-45页 |
| 4.1.9 CYP450基因的引物设计 | 第45页 |
| 4.1.10 PBO处理飞蝗三龄若虫,CYP450酶活力测定 | 第45-46页 |
| 4.2 实验结果 | 第46-57页 |
| 4.2.1 LmCPR基因的克隆与序列分析 | 第46-48页 |
| 4.2.2 昆虫CPRs间的进化分析 | 第48-49页 |
| 4.2.3 LmCPR基因的表达分析 | 第49-50页 |
| 4.2.4 RNAi技术沉默LmCPR基因 | 第50-51页 |
| 4.2.5 沉默LmCPR基因后对西维因敏感性分析 | 第51-52页 |
| 4.2.6 P450基因特征 | 第52-53页 |
| 4.2.7 P450基因差异表达分析 | 第53-54页 |
| 4.2.8 PBO处理后影响飞蝗对西维因的敏感性 | 第54-55页 |
| 4.2.9 用西维因分别处理沉默Lm6HN1,Lm6HL1,Lm6HC1和Lm6HQ1的飞蝗 | 第55-56页 |
| 4.2.10 不同浓度西维因对Lm6HN1,Lm6HL1,Lm6HC1和Lm6HQ1四个基因的诱导表达 | 第56-57页 |
| 4.3 讨论 | 第57-60页 |
| 第五章 花椒毒素对飞蝗CYP450的诱导及其解毒机制研究 | 第60-68页 |
| 5.1 实验材料和方法 | 第60-62页 |
| 5.1.1 供试昆虫 | 第60页 |
| 5.1.2 相关试剂 | 第60页 |
| 5.1.3 CYP450基因和转录因子的引物设计 | 第60-62页 |
| 5.1.4 花椒毒素处理飞蝗三龄若虫 | 第62页 |
| 5.1.5 RNAi技术干扰LmCYP | 第62页 |
| 5.2 实验结果 | 第62-67页 |
| 5.2.1 不同浓度花椒毒素对飞蝗P450的诱导表达 | 第62-63页 |
| 5.2.2 Lm6FE1,Lm6HL1和Lm6FD1的解毒功能研究 | 第63-64页 |
| 5.2.3 生理条件下,转录因子调控CYP450基因的表达 | 第64-65页 |
| 5.2.4 花椒毒素诱导下,转录因子CncC和Maf调控CYP6FE1、CYP6FD1和CYP6HL1基因的表达 | 第65-66页 |
| 5.2.5 沉默转录因子CncC和Maf,飞蝗对花椒毒素的敏感性 | 第66-67页 |
| 5.3 讨论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简况及联系方式 | 第79-82页 |
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