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烟草赖百当类二萜合成相关基因表达特性与分子调控研究
 
     论文目录
 
致谢第4-8页
摘要第8-10页
1 文献综述第10-17页
    1.1 烟草赖百当类二萜研究进展第10-12页
        1.1.1 烟草赖百当类二萜化合物分类第10页
        1.1.2 烟草赖百当类二萜合成途径第10-11页
        1.1.3 烟草赖百当类二萜合成基因第11-12页
        1.1.4 烟草赖百当类二萜对烟叶香气质的影响第12页
        1.1.5 烟草赖百当类二萜与烟叶抗病性第12页
    1.2 烟草腺毛研究进展第12-15页
        1.2.1 烟草腺毛类型与结构第12-13页
        1.2.3 烟草腺毛物质代谢和分泌研究进展第13页
        1.2.4 烟草腺毛基因表达研究第13-14页
        1.2.5 影响烟草腺毛密度的因素第14-15页
            1.2.5.1 水分第14页
            1.2.5.2 施肥第14页
            1.2.5.3 遗传物质第14页
            1.2.5.4 生态环境第14-15页
    1.3 基因编辑技术研究进展第15-17页
        1.3.1 基因编辑技术概述第15-16页
        1.3.2 CRISPR/Cas系统作用原理第16-17页
2 引言第17-18页
3 材料与方法第18-29页
    3.1 植物材料第18页
        3.1.1 腺毛分泌特性研究第18页
        3.1.2 转基因研究第18页
    3.2 实验方法第18-29页
        3.2.1 烟草叶片DNA的提取第18页
        3.2.2 叶片总RNA的提取与反转录第18-19页
            3.2.2.1 叶片总RNA的提取第18-19页
            3.2.2.2 反转录cDNA第19页
        3.2.3 荧光定量PCR第19-20页
        3.2.4 腺毛分泌物检测第20页
        3.2.5 叶片腺毛形态显微观察与密度统计第20页
        3.2.6 生物信息学分析第20-21页
            3.2.6.1 NtCPS2、NtABS基因启动子的序列分析第20-21页
            3.2.6.2 NtCPS2基因序列比对及系统进化树构建第21页
        3.2.7 克隆载体的构建第21-22页
            3.2.7.1 NtCPS2基因CDS序列与NtCPS2、NtABS基因启动子克隆引物设计第21页
            3.2.7.2 NtCPS2基因CDS序列与NtCPS2、NtABS基因启动子扩增第21-22页
            3.2.7.3 NtCPS2基因CDS序列和NtCPS2、NtABS基因启动子片段与克隆载体连接第22页
        3.2.8 PCR产物回收纯化第22-23页
        3.2.9 大肠杆菌转化第23页
        3.2.10 质粒提取第23-24页
        3.2.11 NtCPS2基因过表达载体的构建第24-25页
            3.2.11.1 添加酶切位点第24页
            3.2.11.2 双酶切法构建重组质粒第24-25页
        3.2.12 NtCPS2基因敲除载体构建第25页
        3.2.13 农杆菌感受态的制备第25页
        3.2.14 农杆菌转化第25-26页
        3.2.15 烟草遗传转化第26-27页
            3.2.15.1 烟草无菌苗的制备第26页
            3.2.15.2 烟草遗传转化第26-27页
        3.2.16 NtCPS2基因敲除中靶标位点的测序检测第27-28页
        3.2.17 NtCPS2基因敲除中T1代无标记基因突变株的获得第28-29页
4 结果与分析第29-54页
    4.1 腺毛二萜分泌特性研究第29-34页
        4.1.1 叶面化学成分检测分析第29-31页
        4.1.2 腺毛形态观察与密度统计分析第31-34页
    4.2 腺毛赖百当类二萜基因表达规律研究第34-35页
        4.2.1 不同组织间的表达规律第34-35页
        4.2.2 不同烟草类型间的表达规律第35页
    4.3 生物信息学分析第35-43页
        4.3.1 NtCPS2和NtABS基因启动子的序列分析第35-39页
        4.3.2 NtCPS2基因的序列比对分析与系统进化分析第39-43页
            4.3.2.1 NtCPS2基因的序列比对分析第39-42页
            4.3.2.2 NtCPS2基因的系统进化分析第42-43页
    4.4 克隆载体的构建第43-45页
        4.4.1 NtCPS2、NtABS基因启动子克隆载体的构建第43-44页
            4.4.1.1 NtCPS2、NtABS基因启动子的克隆第43页
            4.4.1.2 NtCPS2、NtABS基因启动子克隆载体的构建第43-44页
        4.4.2 NtCPS2基因克隆载体的构建第44-45页
            4.4.2.1 NtCPS2基因CDS序列的克隆第44-45页
            4.4.2.2 NtCPS2基因克隆载体的构建第45页
    4.5 过表达载体的构建与遗传转化第45-47页
        4.5.1 过表达载体的构建第45-46页
        4.5.2 烟草遗传转化第46-47页
    4.6 敲除载体的构建与阳性植株的获得第47-49页
        4.6.1 敲除载体的构建第47-48页
        4.6.2 烟草遗传转化第48-49页
    4.7 突变纯合体鉴定与性状观察第49-54页
        4.7.1 T1代突变纯合体的获得第49-50页
        4.7.2 T1代植株长势表型观察第50-52页
        4.7.3 T1代植株叶面化学成分检测第52-54页
5 结论与讨论第54-56页
参考文献第56-60页
ABSTRACT第60-61页
附件第62-63页

 
 
论文编号BS4655891,这篇论文共63
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