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家蚕(Bombyx mori) triosephosphate isomerase和transformer-2基因的克隆与染色体定位研究
 
     论文目录
 
致谢第1-5页
摘要第5-11页
第一部分 文献综述第11-75页
 第一章 家蚕基因组研究及其生物信息资源的利用第12-41页
  1 家蚕分子遗传图谱第12-18页
   ·RFLP分析第13-14页
   ·RAPD分析第14-16页
   ·AFLP分析第16-17页
   ·SSR-PCR分析第17页
   ·家蚕数量性状基因位点(Quantitative Trait Locus,QTL)定位第17-18页
  2 家蚕基因组测序第18-20页
  3 家蚕功能基因研究第20-27页
   ·家蚕EST第21-23页
   ·RNA干涉第23-25页
   ·家蚕蛋白质组研究第25-27页
  4 家蚕分子生物学数据库资源的利用第27-41页
   ·公共数据库第27-30页
   ·家蚕生物信息学专业数据库第30-41页
 第二章 家蚕性别决定第41-56页
  1 果蝇的性别决定机理第42-45页
   ·果蝇的体细胞性别分化阶梯第43-44页
   ·剂量补偿第44-45页
   ·生殖细胞分化第45页
  2 家蚕的性别决定机理第45-56页
   ·家蚕的性染色体第46-47页
   ·家蚕的性别决定第47-56页
 第三章 实时定量PCR研究进展及其应用第56-75页
  1 定量PCR的定量原理第56页
  2 定量PCR的方法学进展第56-60页
   ·外对照PCR定量第57-58页
   ·有限稀释PCR定量分析第58页
   ·内对照PCR定量第58-59页
   ·竞争性定量PCR第59-60页
  3 实时荧光定量PCR第60-70页
   ·实时定量PCR的定量基础第61页
   ·常用的Real-time PCR仪第61-62页
   ·实时定量PCR荧光模式第62-67页
   ·建立实时PCR分析体系的关键第67-68页
   ·扩增效率第68-69页
   ·局限性第69-70页
  4 实时定量PCR的应用现状第70-75页
第二部分 一般材料与方法第75-96页
 第四章 利用家蚕生物信息学数据库资源第76-87页
  1 家蚕新基因电子克隆的基本思路第76-78页
  2 目标基因相关的EST序列分析第78-80页
   ·EST序列分析工具第78-79页
   ·目标基因EST序列延伸相关生物信息学资源第79页
   ·利用UniGene数据库进行目标基因电子延伸第79-80页
  3 目标基因cDNA序列电子克隆第80-81页
     ·目标基因种子EST序列的获得第80页
   ·组装序列的EST候选清单的获取第80-81页
   ·目标基因cDNA序列的拼接组装第81页
   ·目标基因cDNA序列开放阅读框分析第81页
  4 目标基因DNA序列的电子克隆与分析第81-82页
   ·目标基因cDNA序列与基因组序列的对齐及其内含子/外显子显示第82页
   ·目标基因因启动子及其他转录调控位点分析第82页
  5 目标基因蛋白质序列分析及同源性比较第82-87页
   ·目标基因蛋白质基本性质分析第82-83页
   ·目标基因蛋白质功能预测第83页
   ·不同物种间目标基因蛋白质序列之间的多重比对及分子进化分析第83-87页
 第五章 分子生物学研究的材料和方法第87-96页
  1 材料第87-88页
   ·昆虫第87页
   ·菌种和载体第87页
   ·试剂和仪器第87-88页
  2 方法第88-96页
   ·培养基和缓冲液第88页
   ·细菌培养第88页
   ·质粒DNA的少量提取(碱法)第88-90页
   ·核酸纯化第90-91页
   ·连接反应第91页
   ·昆虫总RNA的提取第91页
   ·RT-PCR第91-92页
   ·昆虫基因组DNA的制备第92-93页
   ·感受态细胞制备及转化第93-94页
   ·重组质粒的鉴定第94页
   ·DNA序列测定及分析第94-96页
第三部分 研究内容、结果和分析第96-166页
 第六章 家蚕磷酸甘油醛异构酶(Bmtpi)基因的克隆第97-112页
  1 材料和方法第97-99页
   ·实验材料和仪器第97页
   ·方法第97-99页
  2 结果第99-109页
   ·家蚕EST数据库的检索第99-103页
   ·家蚕Bmtpi基因cDNA片段的克隆与分析第103页
   ·家蚕Bmtpi基因组DNA片段的克隆与结构分析第103-109页
   ·家蚕Bmtpi基因编码蛋白的功能分析及不同物种间蛋白质同源性比较第109页
  3 讨论第109-112页
 第七章 家蚕Bmtpi基因的染色体定位第112-122页
  1 材料与方法第112-114页
   ·实验材料和仪器第112页
   ·方法第112-114页
  2 结果第114-119页
   ·标准曲线的建立第114-117页
   ·家蚕基因组中Bmtpi基因拷贝数的测定及其染色体定位第117-119页
  3 讨论第119-122页
 第八章 家蚕Bombyx mori transformer-2基因的克隆第122-145页
  1 材料和方法第123-125页
   ·实验材料和仪器第123页
   ·方法第123-125页
  2 结果第125-141页
   ·家蚕EST数据库的检索第125-130页
   ·家蚕Bmtra-2基因cDNA片段的克隆与northern杂交分析第130-131页
   ·家蚕Bmtra-2基因DNA片段的克隆与结构分析第131-138页
   ·家蚕Bmtra-2基因编码蛋白的功能分析及不同物种间蛋白质同源性比较第138-141页
  3 讨论第141-145页
 第九章 家蚕Bmtra-2基因pre-mRNA选择性剪切分析第145-164页
  1 材料和方法第145-147页
   ·实验材料和仪器第145页
   ·方法第145-147页
  2 结果第147-157页
   ·检索家蚕Bmtra-2基因相关的EST序列第147-157页
   ·RT-PCR检验家蚕Bmtra-2基因pre-mRNA的选择性剪接第157页
   ·家蚕BmTRA-2同工蛋白质分析第157页
  3 讨论第157-164页
 第十章 创新与进一步研究的设想第164-166页
  1 创新点第164页
  2 进一步研究的设想第164-166页
   ·家蚕剂量补偿的研究第164-165页
   ·Bmtra-2基因功能的研究第165-166页
Abstract第166-171页
附录Ⅰ第171-175页
附录Ⅱ第175-176页
附录Ⅲ第176页

 
 
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