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茶树体内茶氨酸合成酶的克隆与异源表达及一氧化氮信号对其调控的研究 |
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| 摘要 | 第1-5页 | | Abstract | 第5-12页 | | 第一章 绪论 | 第12-37页 | | 1 茶氨酸及其代谢相关酶的研究 | 第12-20页 | | ·茶氨酸的研究现状 | 第12-15页 | | ·茶氨酸的生理功能 | 第12-13页 | | ·茶氨酸的理化性质 | 第13-14页 | | ·茶氨酸在茶树体内的分布及作用 | 第14页 | | ·茶树体内茶氨酸的代谢 | 第14-15页 | | ·茶氨酸代谢与调控的研究 | 第15-20页 | | ·茶氨酸合成酶 | 第15-16页 | | ·茶氨酸水解酶 | 第16页 | | ·茶树体内茶氨酸合成与转运的位点 | 第16-17页 | | ·其它合成茶氨酸的酶 | 第17-18页 | | ·茶氨酸的调控因素 | 第18-20页 | | 2 谷氨酰胺合成酶的研究现状 | 第20-26页 | | ·植物谷氨酰胺合成酶的种类与分布 | 第20-22页 | | ·植物谷氨酰胺合成酶的分子生物学研究 | 第22-23页 | | ·植物谷氨酰胺合成酶基因的表达与调控 | 第23-24页 | | ·启动子特异性 | 第23页 | | ·转录水平调控 | 第23-24页 | | ·翻译水平的调控 | 第24页 | | ·谷氨酰胺合成酶转基因植物功能性研究 | 第24-26页 | | ·转谷氨酰胺合成酶基因对提高植物N素利用与促进生长的影响 | 第24-26页 | | ·转谷氨酰胺合成酶基因改变作物耐胁迫能力 | 第26页 | | 3 高等植物氮营养代谢的研究 | 第26-35页 | | ·氮素在植物中的功能 | 第27-28页 | | ·植物对氮素的吸收与同化 | 第28-32页 | | ·氮素的吸收 | 第28-32页 | | ·植物体内一氧化氮的信号传导作用 | 第32-35页 | | ·NO的产生 | 第32-33页 | | ·NO在植物代谢中的信号调节 | 第33-35页 | | ·NO对基因表达的调控 | 第35页 | | 4 研究目的意义及内容 | 第35-37页 | | 第二章 茶树TS基因的CDNA克隆及原核表达 | 第37-56页 | | 1.引言 | 第37页 | | 2.材料与试剂 | 第37-40页 | | ·试验材料 | 第37页 | | ·主要实验仪器 | 第37-38页 | | ·主要实验试剂 | 第38页 | | ·本章主要实验试剂配方 | 第38-40页 | | 3.实验方法 | 第40-49页 | | ·茶树叶片总RNA的提取与鉴定 | 第40-41页 | | ·cDNA第一链的合成 | 第41-42页 | | ·cDNA特异片段的RT-PCR扩增 | 第42页 | | ·PCR产物的纯化回收 | 第42-43页 | | ·E. coli DH5α感受态的制备 | 第43页 | | ·PCR产物的连接转化 | 第43-44页 | | ·阳性克隆的鉴定和测序 | 第44-45页 | | ·pEASY-TS/GS原核表达载体的构建 | 第45-47页 | | ·pEASY-TS/GS的诱导表达 | 第47-48页 | | ·pMAL-TS/GS原核表达载体的构建 | 第48-49页 | | 4.结果与分析 | 第49-53页 | | ·茶树叶片总RNA提取质量及cDNA一链反转结果的电泳检测 | 第49-50页 | | ·pEASY-TS/GS表达载体的构建 | 第50-52页 | | ·TS/GS ORF的扩增 | 第50页 | | ·pEASY-TS/GS 连接产物的PCR检测 | 第50-51页 | | ·pEASY-TS/GS质粒DNA的双酶切鉴定 | 第51-52页 | | ·pEASY-TS/GS的原核表达 | 第52-53页 | | ·pMAL-TS/GS的原核表达 | 第53页 | | 5.讨论 | 第53-56页 | | 第三章 茶树TS的酶活力鉴定 | 第56-63页 | | 1.引言 | 第56页 | | 2.材料与方法 | 第56-59页 | | ·主要仪器设备 | 第56页 | | ·样品与试剂 | 第56页 | | ·实验方法 | 第56-59页 | | ·pMAL-TS直接进行酶促反应 | 第56-57页 | | ·pMAL-TS诱导蛋白上清液进行酶促反应 | 第57页 | | ·pMAL-TS诱导蛋白纯化后进行酶促反应 | 第57-58页 | | ·pMALGS酶活性验证 | 第58页 | | ·酶促反应测定的HPLC 分析条件 | 第58-59页 | | ·酶促反应结果的质谱验证 | 第59页 | | 3.结果与分析 | 第59-62页 | | ·pMAL-TS诱导蛋白酶促反应结果检测 | 第59-61页 | | ·pMALGS诱导蛋白酶促反应结果检测 | 第61-62页 | | 4. 讨论与小结 | 第62-63页 | | 第四章 茶树TS基因在拟南芥中的表达 | 第63-72页 | | 1.引言 | 第63页 | | 2.材料与试剂 | 第63-64页 | | ·试验材料 | 第63-64页 | | ·植物材料 | 第63-64页 | | ·菌种和载体 | 第64页 | | ·实验试剂 | 第64页 | | 3.实验方法 | 第64-67页 | | ·pGREEN35S-TS真核表达载体的构建 | 第64-65页 | | ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第65页 | | ·冻融法转化农杆菌 | 第65页 | | ·农杆菌介导的花序转染法转化拟南芥 | 第65-66页 | | ·植物的生长 | 第65页 | | ·渗透操作 | 第65-66页 | | ·转化子的筛选 | 第66页 | | ·转基因植株的检测 | 第66-67页 | | ·转化子的遗传分析 | 第66页 | | ·转基因植株的PCR检测 | 第66-67页 | | ·转基因植株的激光共聚焦显微镜观察 | 第67页 | | 4.结果与分析 | 第67-70页 | | ·pGREEN-35S-TS载体构建 | 第67页 | | ·农杆菌转化检测 | 第67-68页 | | ·转基因植株的筛选 | 第68-69页 | | ·转基因植株的PCR检测 | 第69页 | | ·报告基因GFP的表达 | 第69-70页 | | 5 讨论 | 第70-72页 | | 第五章 茶氨酸合成酶生物信息学分析 | 第72-79页 | | 1.引言 | 第72页 | | 2.材料与方法 | 第72-73页 | | ·研究材料 | 第72页 | | ·TS与GS蛋白基本理化性质分析 | 第72页 | | ·TS与GS蛋白亚细胞定位与功能分析 | 第72页 | | ·TS与GS蛋白结构域分析 | 第72-73页 | | ·TS与GS蛋白序列系统进化树构建 | 第73页 | | 3.结果与分析 | 第73-78页 | | ·TS与GS蛋白基本理化性质分析 | 第73页 | | ·TS与GS蛋白蛋白亚细胞定位与功能分析预测 | 第73-74页 | | ·TS与GS蛋白结构分析 | 第74-76页 | | ·TS与GS蛋白二级结构分析预测 | 第74-75页 | | ·TS与GS蛋白三级结构分析预测 | 第75-76页 | | ·GS蛋白系统进化树构建 | 第76-78页 | | 4. 小结 | 第78-79页 | | 第六章 茶树TS多克隆抗体制备 | 第79-87页 | | 1.材料与方法 | 第79-83页 | | ·材料与试剂 | 第79页 | | ·实验方法 | 第79-83页 | | ·E.coli表达pEASY-TS重组蛋白包涵体的纯化 | 第79-81页 | | ·兔抗TS抗血清的制备及纯化 | 第81页 | | ·茶树组织总蛋白粗提液的制备 | 第81页 | | ·Western blot检测TS抗体特异性 | 第81-83页 | | 2.结果与分析 | 第83-85页 | | ·pEASY-TS的纯化 | 第83-84页 | | ·TS兔多克隆抗体的特异性鉴定 | 第84-85页 | | 3.讨论与小结 | 第85-87页 | | 第七章 NO对茶氨酸代谢的信号调控 | 第87-94页 | | 1.引言 | 第87页 | | 2.材料与方法 | 第87-89页 | | ·植物材料 | 第87页 | | ·实验试剂与仪器 | 第87-88页 | | ·样品预处理 | 第88页 | | ·氨基酸含量测定的HPLC 分析条件 | 第88页 | | ·儿茶素类和嘌呤碱含量测定的HPLC 分析条件 | 第88页 | | ·茶籽苗各部位蛋白提取及Western Blotting检测 | 第88-89页 | | 3.结果与分析 | 第89-92页 | | ·不同浓度一氧化氮处理对茶苗茶氨酸代谢的影响 | 第89-90页 | | ·不同浓度一氧化氮处理对茶苗茶氨酸和儿茶素代谢的影响 | 第90-91页 | | ·不同抑制剂处理对茶苗茶氨酸代谢的影响 | 第91-92页 | | 4. 讨论与小结 | 第92-94页 | | 参考文献 | 第94-109页 | | 附录A 多序列比对图 | 第109-117页 | | 附录B NO处理茶幼苗中氨基酸含量测定结果 | 第117-120页 | | 附录C 缩略词表 | 第120-123页 | | 致谢 | 第123-124页 | | 作者简介 | 第124-125页 | | 在学期间发表的论著及科研成果 | 第125页 |
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论文编号BS1889892，这篇论文共125页
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