摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第9-13页 |
1.1 哺乳动物Ⅰ型干扰素 | 第9页 |
1.2 哺乳动物Ⅰ型干扰素受体 | 第9-10页 |
1.3 哺乳动物JAK-STAT途径 | 第10-11页 |
1.4 鱼类干扰素信号通路 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-32页 |
2.1 仪器和试剂 | 第13-16页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第13-14页 |
2.1.2.1 主要试剂 | 第13-14页 |
2.1.2.2 主要试剂盒 | 第14页 |
2.1.3 载体与菌种 | 第14页 |
2.1.4 引物表 | 第14-16页 |
2.2 实验材料 | 第16页 |
2.3 相关软件及网址 | 第16页 |
2.4 实验方法 | 第16-32页 |
2.4.1 RNA提取 | 第16-17页 |
2.4.2 反转录合成cDNA第一条链 | 第17-18页 |
2.4.3 SMART cDNA的合成 | 第18页 |
2.4.4 草鱼JAK1和TYK2的克隆 | 第18-24页 |
2.4.5 JAK和CRFB部分片段的克隆与原核表达载体的构建 | 第24-27页 |
2.4.6 真核表达载体的构建 | 第27页 |
2.4.7 系统进化树的建立 | 第27-28页 |
2.4.8 细胞培养 | 第28-29页 |
2.4.9 RT-PCR检测草鱼JAK1和TYK2的细胞表达水平 | 第29-30页 |
2.4.10 草鱼CRFB1、CRFB5、JAK1和TYK2磷酸化水平的检测 | 第30-32页 |
第三章 结果与分析 | 第32-51页 |
3.1 草鱼JAK1和TYK2的克隆及分析 | 第32-43页 |
3.1.1 草鱼JAK1的克隆及分析 | 第32-37页 |
3.1.2 草鱼TYK2的克隆及分析 | 第37-43页 |
3.2 草鱼JAK1和TYK2系统进化树分析 | 第43-44页 |
3.3 Poly I:C诱导草鱼JAK1和TYK2的表达 | 第44-45页 |
3.4 草鱼CRFB1、CRFB5、JAK1和TYK2的原核蛋白表达 | 第45-47页 |
3.5 草鱼CRFB1、CRFB5、JAK1和TYK2磷酸化水平分析 | 第47-49页 |
3.6 过表达CiCRFB1和CiCRFB5上调CiJAK1和CiTYK2的磷酸化水平 | 第49-51页 |
第四章 讨论 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
攻读学位期间发表论文 | 第60页 |