| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-27页 |
| 1.1 植物腋生分生组织的形成和分枝类型 | 第14-15页 |
| 1.1.1 植物腋生分生组织的形成 | 第14页 |
| 1.1.2 分枝类型 | 第14-15页 |
| 1.1.3 苹果腋芽特性 | 第15页 |
| 1.2 植物腋芽萌发调控的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 生长素及其极性运输调控腋芽萌发 | 第16页 |
| 1.2.2 细胞分裂素促进腋芽萌发 | 第16-17页 |
| 1.2.3 独脚金内酯抑制腋芽的萌发 | 第17页 |
| 1.2.4 脱落酸与植物分枝的关系 | 第17页 |
| 1.2.5 蔗糖信号调控腋芽萌发 | 第17-18页 |
| 1.3 植物激素调控腋芽萌发的相互作用关系 | 第18-20页 |
| 1.3.1 生长素和细胞分裂素调控腋芽萌发的关系 | 第18-19页 |
| 1.3.2 独脚金内酯与生长素调控腋芽萌发的关系 | 第19-20页 |
| 1.3.3 独脚金内酯与细胞分裂素调控腋芽萌发的关系 | 第20页 |
| 1.4 SLs途径调控腋芽萌发的研究进展 | 第20-26页 |
| 1.4.1 SLs的发现 | 第21页 |
| 1.4.2 SLs的生物合成 | 第21-23页 |
| 1.4.3 独脚金内酯的转运、信号识别与传递 | 第23-24页 |
| 1.4.4 MAX2介导SLs信号调控腋芽萌发的分子机制 | 第24-25页 |
| 1.4.5 独脚金内酯的其他生物学功能以及MAX2基因的多效性 | 第25-26页 |
| 1.5 苹果腋芽萌发调控的研究进展 | 第26页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 第二章 苹果多分枝突变体表型的生理差异分析 | 第27-46页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 试验材料和嫁接组合 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-30页 |
| 2.2.1 表型的测定 | 第28页 |
| 2.2.2 叶绿素含量、光合作用和叶绿素荧光的测定 | 第28页 |
| 2.2.3 可溶性糖的测定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 植物激素的测定 | 第29页 |
| 2.2.5 植物有机碳、氮、磷、钾含量的测定 | 第29页 |
| 2.2.6 植物H2O2、MDA和抗氧化酶的提取和测定 | 第29页 |
| 2.2.7 激素处理嫁接苗 | 第29-30页 |
| 2.2.8 数据分析和软件作图 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-43页 |
| 2.3.1 MB的分枝表型分析 | 第30-31页 |
| 2.3.2 MB影响根系生长和发育 | 第31-32页 |
| 2.3.3 MB叶片光合活力降低 | 第32-33页 |
| 2.3.4 MB植株中可溶性糖含量的分析 | 第33-35页 |
| 2.3.5 MB影响有机碳、全氮、磷、钾的分配 | 第35页 |
| 2.3.6 MB植株激素含量分析 | 第35-37页 |
| 2.3.7 MB植株的抗氧化能力弱 | 第37-38页 |
| 2.3.8 腋芽中激素和可溶性糖含量分析 | 第38-40页 |
| 2.3.9 外源细胞分裂素促使WT腋芽萌发 | 第40-41页 |
| 2.3.10 外源喷施蔗糖对苹果腋芽萌发的影响 | 第41页 |
| 2.3.11 外源独脚金内酯抑制苹果腋芽萌发 | 第41页 |
| 2.3.12 GR24和生长素极性运输抑制剂NPA对WT和MB腋芽萌发的影响 | 第41-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-46页 |
| 第三章 基于转录组测序的苹果腋芽萌发相关基因的挖掘与鉴定 | 第46-66页 |
| 3.1 材料 | 第46-47页 |
| 3.1.1 试验材料和处理 | 第46页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 3.2 方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 转录组测序(RNA-seq)与差异基因的筛选 | 第47页 |
| 3.2.2 基因表达基因的功能富集分析 | 第47页 |
| 3.2.3 RNA提取、反转录和测定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 实时荧光定量发测定基因的表达量 | 第48-49页 |
| 3.2.5 数据分析和软件作图 | 第49页 |
| 3.3 结果与分析 | 第49-63页 |
| 3.3.1 测序样品的RNA质量 | 第49页 |
| 3.3.2 测序碱基组成和reads质量分布情况 | 第49-50页 |
| 3.3.3 RNA-seq数据质量分析 | 第50-51页 |
| 3.3.4 差异表达基因的筛选 | 第51-52页 |
| 3.3.5 差异表达基因GO功能显著性富集 | 第52-53页 |
| 3.3.6 差异表达基因的KEGGpathway分析 | 第53-59页 |
| 3.3.7 腋芽萌发阶段细胞复制与生长相关基因的表达分析 | 第59-60页 |
| 3.3.8 腋芽萌发阶段腋生分生组织相关基因的表达分析 | 第60页 |
| 3.3.9 腋芽萌发阶段糖运输与代谢相关基因的表达分析 | 第60-61页 |
| 3.3.10 腋芽萌发阶段细胞分裂素和生长素相关基因的表达分析 | 第61-62页 |
| 3.3.11 腋芽萌发阶段独脚金内酯相关基因的表达分析 | 第62-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-66页 |
| 第四章 苹果MAX2基因调控腋芽萌发的功能分析 | 第66-94页 |
| 4.1 试验材料 | 第66-67页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第66页 |
| 4.1.2 试剂和仪器 | 第66-67页 |
| 4.1.3 质粒和菌株 | 第67页 |
| 4.2 方法 | 第67-71页 |
| 4.2.1 生物信息学分析 | 第67页 |
| 4.2.2 RNA的提取、反转和检测 | 第67页 |
| 4.2.3 WT和MB材料DNA的提取 | 第67-68页 |
| 4.2.4 MAX2、D14表达量的测定、编码区和启动子的克隆 | 第68-69页 |
| 4.2.5 PCR纯化产物连接pMD19-T载体、转化与检测 | 第69页 |
| 4.2.6 编码区和启动子的序列分析 | 第69页 |
| 4.2.7 启动子瞬时表达载体的构建 | 第69页 |
| 4.2.8 GUS染色和活性定量分析 | 第69-70页 |
| 4.2.9 植物表达载体的构建 | 第70页 |
| 4.2.10 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第70-71页 |
| 4.3 结果与分析 | 第71-92页 |
| 4.3.1 独脚金内酯信号基因的同源鉴定 | 第71-73页 |
| 4.3.2 腋芽RNA-seq数据中独脚金内酯信号基因的表达分析 | 第73-74页 |
| 4.3.3 苹果不同组织中MAX2和D14基因的表达 | 第74-75页 |
| 4.3.4 ‘长富2号’腋芽萌发中MdMAX2和MdD14基因的表达分析 | 第75-76页 |
| 4.3.5 不同处理对WT和MB腋芽MbD14和MbMAX2基因表达的影响 | 第76-78页 |
| 4.3.6 MbD14基因的克隆与序列分析 | 第78-80页 |
| 4.3.7 MbMAX2基因的克隆与序列分析 | 第80-83页 |
| 4.3.8 MbMAX2基因在野生型和max2突变体拟南芥中过表达分析 | 第83-85页 |
| 4.3.9 MB中差异MbMAX2基因序列在max2突变体中过表达分析 | 第85-86页 |
| 4.3.10 MbMAX2和MbD14基因启动子的克隆与序列分析 | 第86-90页 |
| 4.3.11 MbMAX2和MbD14基因启动子的活性分析 | 第90-92页 |
| 4.4 讨论 | 第92-94页 |
| 第五章 苹果MAX2分枝相关互作蛋白验证与筛选 | 第94-104页 |
| 5.1 材料 | 第94-95页 |
| 5.1.1 植物材料、克隆引物、质粒载体和菌株 | 第94页 |
| 5.1.2 试剂和培养基配制 | 第94-95页 |
| 5.2 方法 | 第95-97页 |
| 5.2.1 模式植物中已知互作蛋白与苹果MAX2互作的验证 | 第95页 |
| 5.2.2 酵母双杂交cDNA文库的构建与转化 | 第95-96页 |
| 5.2.3 酵母转化、自激活和自毒的检测 | 第96页 |
| 5.2.4 酵母双杂交互作蛋白的筛选 | 第96-97页 |
| 5.2.5 酵母双杂交载体的构建与初步验证 | 第97页 |
| 5.3 结果与分析 | 第97-102页 |
| 5.3.1 苹果MdMAX2互作蛋白的鉴定 | 第97-98页 |
| 5.3.2 苹果腋芽酵母表达cDNA文库的构建 | 第98-99页 |
| 5.3.3 苹果MAX2的自激活和自毒检测 | 第99页 |
| 5.3.4 苹果MAX2互作蛋白的筛选 | 第99-101页 |
| 5.3.5 苹果MAX2互作蛋白的初步验证 | 第101-102页 |
| 5.4 讨论 | 第102-104页 |
| 第六章 结论和创新点 | 第104-105页 |
| 6.1 结论 | 第104页 |
| 6.2 创新点 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-118页 |
| 附录 | 第118-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 作者简介 | 第125页 |
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