| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 一 引言 | 第12-19页 |
| 1 稻瘟病和稻瘟病菌 | 第12页 |
| 1.1 稻瘟病的危害 | 第12页 |
| 1.2 稻瘟病菌简介 | 第12页 |
| 2 MAPK级联途径 | 第12-15页 |
| 2.1 MAPK级联途径概述 | 第12-13页 |
| 2.2 MAPK级联途径在酵母中的研究进展 | 第13-14页 |
| 2.3 MAPK级联途径在稻瘟中的研究进展 | 第14-15页 |
| 3 PTPs | 第15-18页 |
| 3.1 PTPs家族简介 | 第15-16页 |
| 3.2 PTPs研究进展 | 第16-18页 |
| 3.2.1 真菌PTPs研究进展 | 第16-18页 |
| 3.2.2 哺乳动物PTPs研究进展 | 第18页 |
| 4 本研究主要意义 | 第18-19页 |
| 二 材料与方法 | 第19-35页 |
| 1 材料 | 第19-21页 |
| 1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 1.2 质粒载体 | 第19页 |
| 1.3 供试植物材料 | 第19页 |
| 1.4 常用试剂 | 第19-20页 |
| 1.5 培养基配方 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-35页 |
| 2.1 生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.2 稻瘟病菌基因组DNA的粗提 | 第21-22页 |
| 2.3 稻瘟病菌基因组DNA的精提—CTAB法 | 第22-23页 |
| 2.4 常规PCR反应 | 第23页 |
| 2.5 SOE-PCR反应 | 第23-24页 |
| 2.6 DNA琼脂糖电泳 | 第24-25页 |
| 2.7 质粒DNA的提取 | 第25页 |
| 2.8 DNA片段的纯化回收 | 第25页 |
| 2.9 稻瘟病菌总RNA的提取 | 第25页 |
| 2.10 RT-PCR反转录 | 第25-26页 |
| 2.11 荧光实时定量PCR | 第26页 |
| 2.12 稻瘟病菌目的基因的敲除和互补 | 第26-28页 |
| 2.12.1 SOE-PCR技术敲除目的基因 | 第26-28页 |
| 2.12.2 稻瘟病菌目的基因的互补 | 第28页 |
| 2.13 稻瘟病菌原生质体的制备 | 第28-29页 |
| 2.14 稻瘟病菌原生质体的转化 | 第29-30页 |
| 2.15 转化子的筛选及验证 | 第30-31页 |
| 2.15.1 PCR初筛验证 | 第30-31页 |
| 2.15.2 Southern blotting验证 | 第31页 |
| 2.16 稻瘟病菌表型性状分析 | 第31-33页 |
| 2.16.1 稻瘟病菌生长速度检测及菌落形态观察 | 第31页 |
| 2.16.2 稻瘟病菌产孢培养和产孢量测定 | 第31-32页 |
| 2.16.3 稻瘟病菌分生孢子梗观察 | 第32页 |
| 2.16.4 稻瘟病菌致病性分析实验 | 第32-33页 |
| 2.16.4.1 大麦离题接种 | 第32页 |
| 2.16.4.2 水稻喷雾接种 | 第32-33页 |
| 2.17 稻瘟病菌细胞壁敏感性测定 | 第33页 |
| 2.18 稻瘟病菌对渗透胁迫的敏感性分析 | 第33-35页 |
| 三结果与分析 | 第35-62页 |
| 1 稻瘟病菌中酵母PTPs同源基因的生物信息学分析 | 第35-42页 |
| 1.1 稻瘟病菌中酵母PTPs同源基因的注释信息及氨基酸序列的获得 | 第35-36页 |
| 1.2 稻瘟病菌中酵母PTPs同源基因及其同源蛋白的系统进化关系 | 第36-42页 |
| 1.2.1 MoPtp1氨基酸序列保守性分析和同源蛋白的系统进化关系 | 第36-39页 |
| 1.2.2 MoPmp1氨基酸序列保守性分析和同源蛋白的系统进化关系 | 第39-41页 |
| 1.2.3 MoPps1氨基酸序列保守性分析和同源蛋白的系统进化关系 | 第41-42页 |
| 2 稻瘟病菌中MoPtp1、MoPmp1、MoPps1的功能 | 第42-62页 |
| 2.1 稻瘟病菌中MoPTP1、MoPMP1、MoPPS1基因敲除突变体的获得及其互补 | 第42-46页 |
| 2.1.1 PCR初筛验证 | 第42-43页 |
| 2.1.2 RT-PCR验证 | 第43-44页 |
| 2.1.3 Southern blotting验证 | 第44-46页 |
| 2.2 稻瘟病菌MoPTP1基因的功能 | 第46-52页 |
| 2.2.1 稻瘟病菌MoPTP1基因敲除突变体的生长速度及菌落形态 | 第46-47页 |
| 2.2.2 稻瘟病菌MoPTP1基因敲除突变体的产孢量 | 第47-48页 |
| 2.2.3 稻瘟病菌MoPTP1基因敲除突变体的分生孢子形成过程 | 第48-49页 |
| 2.2.4 稻瘟病菌MoPTP1基因敲除突变体的致病性 | 第49-50页 |
| 2.2.5 稻瘟病菌MoPTP1基因敲除突变体对细胞壁破坏剂的敏感性 | 第50-51页 |
| 2.2.6 稻瘟病菌MoPTP1基因敲除突变体对渗透胁迫的敏感性 | 第51-52页 |
| 2.3 稻瘟病菌MoPMP1基因的功能 | 第52-59页 |
| 2.3.1 稻瘟病菌MoPMP1基因敲除突变体的生长速度及菌落形态 | 第52-53页 |
| 2.3.2 稻瘟病菌MoPMP1基因敲除突变体的产孢量 | 第53-54页 |
| 2.3.3 稻瘟病菌MoPMP1基因敲除突变体的分生孢子成过程 | 第54-55页 |
| 2.3.4 稻瘟病菌MoPMP1基因敲除突变体的致病性 | 第55-56页 |
| 2.3.5 稻瘟病菌MoPMP1基因敲除突变体对细胞壁破坏剂的敏感性 | 第56-57页 |
| 2.3.6 稻瘟病菌MoPMP1基因敲除突变体对渗透胁迫的敏感性 | 第57-59页 |
| 2.4 稻瘟病菌MoPPS1基因的功能 | 第59-62页 |
| 2.4.1 稻瘟病菌MoPPS1基因敲除突变体的生长速率及菌落形态 | 第59页 |
| 2.4.2 稻瘟病菌MoPPS1基因敲除突变体的产孢量 | 第59-60页 |
| 2.4.3 稻瘟病菌MoPPS1基因敲除突变体的致病性 | 第60-62页 |
| 四 全文总结与后续工作展望 | 第62-65页 |
| 1 全文总结与讨论 | 第62-63页 |
| 1.1 稻瘟病菌MoPtp1、MoPmp1、MoPps1与稻瘟病菌的菌体生长发育 | 第62页 |
| 1.2 稻瘟病菌MoPtp1、MoPmp1、MoPps1与稻瘟病菌的致病性 | 第62-63页 |
| 1.3 稻瘟病菌MoPTP1、MoPMP1缺失突变体对渗透胁迫和细胞壁破坏剂的敏感性 | 第63页 |
| 2 后续工作展望 | 第63-65页 |
| 2.1 稻瘟病菌MoPTP1、MoPMP1、MoPPS1的过表达 | 第63-64页 |
| 2.2 稻瘟病菌MoPTP1和MoPTP2的双敲除 | 第64页 |
| 2.3 稻瘟病菌MoPtp1、MoPmp1、MoPps1的亚细胞定位 | 第64页 |
| 2.4 稻瘟病菌MoOsm1磷酸化水平的测定 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 本研究所用引物序列及用途 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
广告服务 
