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L-赖氨酸脱羧酶的酶学性质及其应用研究
 
     论文目录
 
摘要第5-6页
abstract第6-7页
第1章 前言第12-21页
    1.1 L-赖氨酸脱羧酶(LDC)第12-15页
        1.1.1 LDC生物学功能第12-13页
        1.1.2 LDC在生物催化领域的应用第13-14页
        1.1.3 LDC的来源及理化性质第14-15页
        1.1.4 LDC酶活测定方法第15页
    1.2 LDC的多聚体结构及酶分子改造第15-18页
        1.2.1 LDC的结构与功能的关系第16-17页
        1.2.2 LDC的酶分子改造第17-18页
    1.3 戊二胺概述第18-19页
        1.3.1 戊二胺的理化性质第18页
        1.3.2 戊二胺的制备方法第18-19页
        1.3.3 戊二胺的应用第19页
    1.4 本课题的研究目的及意义第19-20页
    1.5 本课题的研究内容第20-21页
第2章 L-赖氨酸脱羧酶的克隆与表达第21-38页
    2.1 引言第21页
    2.2 实验材料第21-25页
        2.2.1 菌株及质粒LDC生物学功能第21-23页
        2.2.2 仪器及设备第23页
        2.2.3 试剂及工具酶第23-24页
        2.2.4 培养基第24-25页
        2.2.5 溶液第25页
    2.3 实验方法第25-33页
        2.3.1 菌种活化培养第25-26页
        2.3.2 大肠杆菌基因组DNA提取第26页
        2.3.3 目的基因的克隆第26-27页
        2.3.4 质粒构建第27-28页
        2.3.5 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第28-29页
        2.3.6 转化子的验证第29页
        2.3.7 基因挖掘第29-30页
        2.3.8 全基因合成第30页
        2.3.9 蛋白诱导表达第30-31页
        2.3.10 BCA蛋白质定量第31页
        2.3.11 SDS-PAGE电泳检测第31页
        2.3.12 LDC酶活力测定方法第31-33页
    2.4 结果与讨论第33-37页
        2.4.1 CadA与LdcC过表达质粒的构建第33页
        2.4.2 不同来源的赖氨酸脱羧酶的克隆及筛选第33-34页
        2.4.3 LDC在大肠杆菌中的诱导表达第34-35页
        2.4.4 LDC粗酶活性比较第35-37页
    2.5 本章小结第37-38页
第3章 L-赖氨酸脱羧酶酶学性质研究第38-49页
    3.1 引言第38页
    3.2 实验材料第38-39页
        3.2.1 菌株及质粒第38页
        3.2.2 仪器及试剂第38页
        3.2.3 培养基第38页
        3.2.4 溶液第38-39页
    3.3 实验方法第39-40页
        3.3.1 蛋白诱导表达及纯化第39页
        3.3.2 LDC最适pH、最适温度测定方法第39-40页
        3.3.3 LDC热稳定性测定方法第40页
        3.3.4 LDC热变性测定方法第40页
        3.3.5 LDC动力学参数测定方法第40页
        3.3.6 戊二胺抑制曲线测定方法第40页
    3.4 结果与讨论第40-47页
        3.4.1 LDC在大肠杆菌中的诱导表达及纯化第40-42页
        3.4.2 LDC的最适pH和最适温度第42-43页
        3.4.3 LDC的热稳定性第43-45页
        3.4.4 LDC的动力学常数第45-46页
        3.4.5 戊二胺抑制曲线的测定第46-47页
    3.5 本章小结第47-49页
第4章 L-赖氨酸脱羧酶的多聚体状态表征第49-54页
    4.1 引言第49页
    4.2 实验材料第49-50页
        4.2.1 菌株及质粒第49页
        4.2.2 仪器及试剂第49-50页
        4.2.3 溶液第50页
    4.3 实验方法第50-51页
        4.3.1 蛋白质活性电泳第50页
        4.3.2 动态光散射第50-51页
    4.4 结果与讨论第51-53页
        4.4.1 蛋白质活性电泳测定LDC多聚体状态第51页
        4.4.2 动态光散射测定LDC的多聚体状态第51-53页
    4.5 本章小结第53-54页
第5章 L-赖氨酸脱羧酶全细胞催化评价第54-62页
    5.1 引言第54页
    5.2 实验材料第54-55页
        5.2.1 菌株及质粒第54页
        5.2.2 仪器及试剂第54页
        5.2.3 培养基第54页
        5.2.4 溶液第54-55页
    5.3 实验方法第55-56页
        5.3.1 种子培养第55页
        5.3.2 重组菌诱导表达第55页
        5.3.3 全细胞催化第55页
        5.3.4 SDS-PAGE第55-56页
        5.3.5 戊二胺浓度测定第56页
        5.3.6 赖氨酸含量测定第56页
    5.4 结果与讨论第56-60页
        5.4.1 摇瓶水平全细胞催化第56-58页
        5.4.2 发酵罐水平全细胞催化第58-60页
    5.5 本章小结第60-62页
第6章 结论与展望第62-64页
    6.1 主要结论第62-63页
    6.2 论文创新点第63页
    6.3 今后工作展望第63-64页
参考文献第64-71页
硕士在读期间撰写的论文第71-72页
致谢第72页

 
 
论文编号BS4505593,这篇论文共72
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