中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第8-18页 |
·多药耐药 | 第8页 |
·P-gp | 第8-12页 |
·多药耐药与细胞凋亡 | 第12页 |
·耐药逆转和耐药相关蛋白的临床意义 | 第12-15页 |
·本课题的目的及意义 | 第15-18页 |
第二章 以重组P-gp为抗原建立检测MDR 1间接ELISA方法的研究 | 第18-32页 |
·引言 | 第18页 |
·材料和方法 | 第18-25页 |
·材料 | 第18页 |
·方法 | 第18-25页 |
·结果 | 第25-31页 |
·重组PCR扩增P-gp基因 | 第25-26页 |
·pETP-gp 的克隆及鉴定 | 第26-27页 |
·pETP-gp 的诱导表达 | 第27-29页 |
·兔抗人IgG 的制备 | 第29页 |
·间接ELISA 条件的确定 | 第29-30页 |
·MDR 1抗体的检测结果 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31页 |
·本章小结 | 第31-32页 |
第三章 MDR 1 真核表达载体的构建及pcDNA3/P-gp 单克隆抗体的靶向性 | 第32-49页 |
·引言 | 第32页 |
·材料与方法 | 第32-40页 |
·材料 | 第32-33页 |
·方法 | 第33-40页 |
·结果 | 第40-45页 |
·目的基因的获得 | 第40-41页 |
·pcDNA3 质粒的鉴定 | 第41页 |
·重组体的鉴定 | 第41-42页 |
·重组质粒转染真核细胞表达分析 | 第42-43页 |
·动物免疫试验 | 第43页 |
·重组质粒免疫小鼠血清抗体检测结果 | 第43-44页 |
·单克隆抗体的特异性鉴定结果 | 第44页 |
·4株McAb对3种质粒的重组蛋白的检测结果 | 第44页 |
·用McAb 检测pcDNA3/P-gp 在K562 细胞中的表达结果 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
·本章小结 | 第47-49页 |
第四章 MDR 1基因腺病毒载体的构建及鉴定 | 第49-61页 |
·引言 | 第49页 |
·材料与方法 | 第49-55页 |
·材料 | 第49-50页 |
·方法 | 第50-55页 |
·结果 | 第55-59页 |
·MDR 1的鉴定 | 第55-56页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第56页 |
·重组病毒滴度的检测 | 第56-57页 |
·重组病毒感染靶细胞的结果 | 第57-59页 |
·讨论 | 第59页 |
·本章小结 | 第59-61页 |
第五章 MDR 1基因在脐血有核细胞表达及耐药性的体外研究 | 第61-70页 |
·引言 | 第61页 |
·材料及方法 | 第61-63页 |
·材料 | 第61页 |
·方法 | 第61-63页 |
·结果 | 第63-66页 |
·重组病毒滴度测定 | 第63页 |
·MDR 1基因转染脐血单个核细胞后细胞的生长状况 | 第63-64页 |
·外源性MDR 1 基因在CBNC 的整合和表达结果 | 第64页 |
·外源性MDR 1基因转染CBNC P-gp阳性率的测定及组间比较 | 第64页 |
·免疫组化法检测脐血单个核细胞的转染率 | 第64-65页 |
·间接ELISA法测定CBNC的P-gp的表达的结果 | 第65页 |
·转染脐血细胞周期生物学特性的检测结果 | 第65页 |
·导入MDR 1 基因的CBNC 对长春新碱的耐受效应 | 第65-66页 |
·导入MDR 1的CBNC的CFU-GM培养 | 第66页 |
·讨论 | 第66-69页 |
·本章小结 | 第69-70页 |
第六章 MDR 1基因转染鼠胚胎干细胞在化疗中药物耐受量的研究 | 第70-78页 |
·引言 | 第70页 |
·材料与方法 | 第70-72页 |
·材料 | 第70-71页 |
·方法 | 第71-72页 |
·结果 | 第72-76页 |
·ES 细胞分离培养过程 | 第72-73页 |
·ES 细胞的生长状态 | 第73-74页 |
·ES 细胞AKP 组织化学染色 | 第74-75页 |
·ES 细胞Oct-4 表达 | 第75页 |
·ES 细胞的核型分析 | 第75页 |
·动物试验 | 第75-76页 |
·MDR 1基因的检测 | 第76页 |
·讨论 | 第76-77页 |
·小结 | 第77-78页 |
第七章 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-85页 |
附图 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
论文创新点 | 第87页 |