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纤维素降解真菌的筛选及其纤维素酶基因的克隆与表达 |
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论文目录 |
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中文摘要 | 第1-11页 | 英文摘要 | 第11-13页 | 1 引言 | 第13-25页 | ·纤维素 | 第13-14页 | ·纤维素资源及其分子结构 | 第13-14页 | ·纤维素的降解及其影响因素 | 第14页 | ·纤维素酶 | 第14-20页 | ·纤维素酶的组成及结构 | 第15-16页 | ·纤维素酶的作用机理 | 第16-17页 | ·纤维素酶的合成与调控 | 第17页 | ·产纤维素酶的主要微生物 | 第17-18页 | ·产纤维素酶菌株的筛选 | 第18-19页 | ·纤维素酶在各个领域的应用 | 第19-20页 | ·纤维素酶基因的克隆与表达 | 第20-23页 | ·纤维素酶基因的克隆 | 第20-21页 | ·青霉纤维素酶基因的克隆 | 第21页 | ·草酸青霉纤维素酶基因的克隆 | 第21-22页 | ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第22-23页 | ·研究的目的和意义 | 第23-24页 | ·研究路线 | 第24-25页 | 2 实验材料与方法 | 第25-43页 | ·实验材料 | 第25-29页 | ·菌株与载体 | 第25页 | ·培养基及配制 | 第25-26页 | ·主要试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第26-28页 | ·主要仪器 | 第28页 | ·主要溶液及配制方法 | 第28-29页 | ·引物合成 | 第29页 | ·纤维素降解菌的筛选 | 第29-34页 | ·纤维素降解菌的富集培养 | 第29-30页 | ·纤维素降解菌的初筛 | 第30页 | ·纤维素降解菌的复筛 | 第30-31页 | ·蛋白质浓度测定方法 | 第31页 | ·滤纸酶活测定方法 | 第31页 | ·内切葡聚糖酶活测定方法 | 第31-32页 | ·木聚糖酶活测定方法 | 第32-33页 | ·外切葡聚糖酶活测定方法 | 第33页 | ·β-葡萄糖苷酶活测定方法 | 第33-34页 | ·纤维素降解菌的鉴定 | 第34-36页 | ·菌株形态观察 | 第34页 | ·基因组DNA 的提取 | 第34页 | ·核糖体-DNA 的ITS 序列扩增 | 第34页 | ·DNA 片段的回收和连接 | 第34-35页 | ·克隆载体的转化和测序 | 第35-36页 | ·内切葡聚糖酶基因的克隆与表达及酶学性质分析 | 第36-39页 | ·内切葡聚糖酶基因的克隆 | 第36页 | ·内切葡聚糖酶重组质粒的构建 | 第36-37页 | ·内切葡聚糖酶重组质粒的转化和筛选 | 第37页 | ·内切葡聚糖酶重组质粒的诱导表达及SDS-PAGE 分析 | 第37-38页 | ·重组内切葡聚糖酶酶学性质分析 | 第38-39页 | ·外切葡聚糖酶基因的克隆与表达及酶学性质分析 | 第39-43页 | ·外切葡聚糖酶基因保守片段的克隆 | 第39页 | ·TAIL-PCR 方法扩增外切葡聚糖酶基因侧翼序列 | 第39-40页 | ·外切葡聚糖酶基因全长扩增与分析 | 第40页 | ·外切葡聚糖酶重组质粒的构建 | 第40-41页 | ·外切葡聚糖酶重组质粒的转化和筛选 | 第41页 | ·外切葡聚糖酶重组质粒的诱导表达及SDS-PAGE 分析 | 第41页 | ·重组外切葡聚糖酶酶学性质分析 | 第41-43页 | 3 结果与分析 | 第43-61页 | ·纤维素降解菌的筛选 | 第43-49页 | ·纤维素降解菌初筛 | 第43页 | ·纤维素降解菌复筛 | 第43页 | ·蛋白质标准曲线测定 | 第43页 | ·滤纸酶活测定 | 第43-44页 | ·内切葡聚糖酶活测定方法 | 第44-45页 | ·木聚糖酶活测定方法 | 第45-46页 | ·外切葡聚糖酶活测定方法 | 第46-48页 | ·β-葡萄糖苷酶活测定方法 | 第48-49页 | ·纤维素降解菌的鉴定 | 第49-51页 | ·M 菌株形态观察 | 第49-50页 | ·核糖体-DNA ITS 序列的分析 | 第50-51页 | ·内切葡聚糖酶基因的克隆与表达 | 第51-53页 | ·内切葡聚糖酶基因的序列分析 | 第51-53页 | ·内切葡聚糖酶基因的蛋白结构预测 | 第53页 | ·内切葡聚糖酶重组蛋白的诱导表达和SDS-PAGE 分析 | 第53页 | ·重组内切葡聚糖酶酶学性质分析 | 第53-55页 | ·pH 对重组酶活性的影响 | 第53-54页 | ·温度对重组酶活性的影响 | 第54-55页 | ·金属离子及其他试剂对重组酶活性的影响 | 第55页 | ·外切葡聚糖酶基因的克隆与表达 | 第55-58页 | ·外切葡聚糖酶全长基因克隆 | 第55-56页 | ·外切葡聚糖酶基因序列分析 | 第56页 | ·外切葡聚糖酶蛋白结构预测 | 第56-58页 | ·外切葡聚糖酶重组蛋白的诱导表达和SDS-PAGE 分析 | 第58页 | ·重组外切葡聚糖酶酶学特性分析 | 第58-61页 | ·pH 对重组酶活性的影响 | 第58-59页 | ·温度对重组酶活性的影响 | 第59页 | ·金属离子及其他试剂对重组酶活性的影响 | 第59-61页 | 4 讨论 | 第61-64页 | ·草酸青霉M 菌株的降解能力 | 第61页 | ·重组内切葡聚糖酶分析 | 第61-62页 | ·重组外切葡聚糖酶分析 | 第62-64页 | 5 结论 | 第64-65页 | 致谢 | 第65-66页 | 参考文献 | 第66-72页 | 附录 | 第72-73页 | 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73页 |
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