摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1 乙酰胆碱酯酶的结构和生理功能 | 第12-14页 |
·乙酰胆碱酯酶的结构 | 第12-13页 |
·乙酰胆碱酯酶的生理功能 | 第13-14页 |
2 昆虫乙酰胆碱酯酶基因研究进展 | 第14-19页 |
·昆虫乙酰胆碱酯酶基因类型 | 第14-17页 |
·乙酰胆碱酯酶基因与昆虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性 | 第17页 |
·小菜蛾乙酰胆碱酯酶基因突变与抗药性关系 | 第17-19页 |
3 乙酰胆碱酯酶基因突变检测技术 | 第19-21页 |
·bi-PASA 技术原理 | 第19-20页 |
·bi-PASA 技术特点及应用 | 第20-21页 |
4 菜蛾啮小蜂的生物学及其抗药性研究进展 | 第21-23页 |
·菜蛾啮小蜂的生物学 | 第21-22页 |
·寄生蜂抗药性研究进展 | 第22-23页 |
5 技术路线 | 第23-25页 |
·小菜蛾ace 基因频率检测主要技术路线 | 第23-24页 |
·两种类型菜蛾啮小蜂ace 克隆 | 第24-25页 |
6 研究背景、内容及目的意义 | 第25-26页 |
第二章 温度对抗性和敏感小菜蛾ace1 频率的影响 | 第26-37页 |
1 材料与方法 | 第26-30页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·供试昆虫 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·供试试剂 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要试剂的配制(DNA 提取液) | 第27页 |
·实验中的引物序列 | 第27页 |
·分析软件 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-30页 |
·小菜蛾(Plutella xylostella)前处理 | 第27页 |
·小菜蛾RNA 提取、逆转录及PCR 扩增 | 第27-29页 |
·小菜蛾RNA 提取 | 第27-28页 |
·cDNA 合成 | 第28-29页 |
·PCR 扩增 | 第29页 |
·基因组DNA 提取及PCR 检测 | 第29-30页 |
·基因组DNA 提取 | 第29页 |
·bi-PASA 检测 | 第29-30页 |
2 小菜蛾乙酰胆碱酯酶基因序列与频率检测结果分析 | 第30-35页 |
·田间抗性小菜蛾ace 片段序列 | 第30页 |
·田间小菜蛾ace 片段P.x-ace 序列分析 | 第30-31页 |
·小菜蛾ace 基因频率检测结果分析 | 第31-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-37页 |
第三章 抗性和敏感菜蛾啮小蜂ace1 片段克隆及序列分析 | 第37-50页 |
1 材料与方法 | 第37-42页 |
·实验材料 | 第37页 |
·供试昆虫 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37页 |
·分析软件 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·实验中的引物 | 第37页 |
·菜蛾啮小蜂RNA 提取、逆转录及PCR 扩增 | 第37-42页 |
·菜蛾啮小蜂总RNA 提取(TIANGEN 试剂盒法) | 第37-38页 |
·逆转录合成cDNA | 第38-39页 |
·抗性菜蛾啮小蜂ace 片段扩增及3’RACE 扩增 | 第39-40页 |
·利用简并引物扩增中间片段 | 第39-40页 |
·3’RACE 扩增 | 第40页 |
·敏感菜蛾啮小蜂ace 片段扩增及3’RACE 扩增 | 第40-42页 |
·敏感菜蛾啮小蜂ace 片段扩增 | 第40-41页 |
·3’RACE 扩增 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-49页 |
·抗性菜蛾啮小蜂ace 序列的结果与分析 | 第42-44页 |
·抗性菜蛾啮小蜂简并引物扩增结果分析 | 第42-43页 |
·3’RACE 结果分析 | 第43-44页 |
·敏感菜蛾啮小蜂ace 序列结果与分析 | 第44-46页 |
·敏感菜蛾啮小蜂ace 特异序列结果与分析 | 第44-45页 |
·3’RACE 结果分析 | 第45页 |
·两段序列(OS –ace51 和OS –ace52)拼接序列分析 | 第45-46页 |
·菜蛾啮小蜂乙酰胆碱酯酶与其他物种的比对分析 | 第46-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54页 |