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一氧化氮对肥城桃可溶性鸟苷酸环化酶基因表达及酶活性的影响 |
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论文目录 |
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中文摘要 | 第1-9页 | ABSTRACT | 第9-10页 | 1 引言 | 第10-24页 | ·SGC 的结构 | 第10页 | ·鸟苷酸环化酶的分类 | 第10-12页 | ·胞浆可溶性鸟苷酸环化酶 | 第11页 | ·结合型鸟苷酸环化酶 | 第11-12页 | ·SGC 的功能 | 第12-14页 | ·一氧化氮(NO) | 第14-17页 | ·一氧化氮的结构及作用 | 第14-15页 | ·NO 的生物合成 | 第15-17页 | ·一氧化氮合酶(NOS) | 第16页 | ·硝酸还原酶(NR) | 第16页 | ·不涉及酶反应的 NO 其他酶源 | 第16-17页 | ·SGC 的活性调节机理 | 第17-22页 | ·胞浆可溶性鸟苷酸环化酶 | 第19-21页 | ·膜结合型鸟苷酸环化酶 | 第21-22页 | ·鸟苷酸环化酶基因家族 | 第22页 | ·论文研究内容及意义 | 第22-24页 | 2. 材料与方法 | 第24-40页 | ·试材与试材处理 | 第24页 | ·仪器与试剂 | 第24-27页 | ·试验方法 | 第27-38页 | ·SGC 全长 CDNA 的克隆 | 第27-33页 | ·引物设计 | 第27-28页 | ·RNA 提取 | 第28页 | ·总浓度测定 | 第28页 | ·cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 | ·梯度 PCR | 第29页 | ·回收目的 DNA 片段 | 第29-30页 | ·克隆载体的构建及鉴定 | 第30-31页 | ·5′及 3′RACE | 第31-33页 | ·SGC 序列分析 | 第33-34页 | ·SGC 重组蛋白的表达 | 第34-36页 | ·表达载体的构建及鉴定 | 第34页 | ·含重组质粒的大肠杆菌的繁殖培养 | 第34页 | ·大肠杆菌的破碎和目的蛋白的获得 | 第34页 | ·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第34-35页 | ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 | ·制备饱和一氧化氮 | 第36页 | ·电化学分析 | 第36-37页 | ·实时荧光定量 PCR | 第37-38页 | ·桃果实的处理 | 第37页 | ·提取 RNA | 第37页 | ·反转录 | 第37页 | ·定量 PCR 检测 | 第37-38页 | ·鸟苷酸环化酶活性的测定 | 第38-40页 | ·酶的分离与纯化 | 第38页 | ·酶活性测定 | 第38-39页 | ·动力学实验 | 第39-40页 | ·实验条件的优化 | 第39页 | ·一氧化氮对 sGC 蛋白活性的影响 | 第39-40页 | 3 结果与分析 | 第40-48页 | ·桃果实 RNA 的完整性 | 第40页 | ·SGC 全长 CDNA 的克隆 | 第40-41页 | ·SGC 全长基因的序列分析与功能预测 | 第41-43页 | ·序列开放阅读框分析 | 第41页 | ·肥城桃 SGC 蛋白的二级结构分析 | 第41-42页 | ·肥城桃 SGC 蛋白与其他物种的 SGC 蛋白相似比对 | 第42页 | ·SGC 蛋白的系统进化分析 | 第42-43页 | ·三级结构预测 | 第43页 | ·NO 对 SGC 及 SGC 蛋白的影响 | 第43-48页 | ·总 RNA 的提取及分析 | 第43-44页 | ·实时荧光定量分析 | 第44页 | ·电化学分析 | 第44-45页 | ·动力学研究 | 第45-47页 | ·标准曲线的绘制 | 第45-46页 | ·底物浓度的影响 | 第46页 | ·温度的影响 | 第46-47页 | ·pH 的影响 | 第47页 | ·HPLC 测定 NO 对 SGC 蛋白活性的影响 | 第47-48页 | 4. 讨论 | 第48-50页 | ·可溶性鸟苷酸环化酶基因的克隆 | 第48页 | ·肥城桃鸟苷酸环化酶基因及蛋白的序列分析 | 第48-49页 | ·NO 对 SGC 及 SGC 蛋白的影响 | 第49-50页 | 5 结论 | 第50-51页 | 6 创新之处 | 第51-52页 | 7 参考文献 | 第52-65页 | 致谢 | 第65-66页 | 攻读硕士期间发表的论文 | 第66页 |
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