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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--草鱼呼肠孤病毒基因Ⅱ型病毒样颗粒的制备及免疫效果评价
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草鱼呼肠孤病毒基因Ⅱ型病毒样颗粒的制备及免疫效果评价
 
     论文目录
 
摘要第13-15页
Abstract第15-17页
第一章 引言第18-31页
    1.1 草鱼呼肠孤病毒研究进展第18-20页
        1.1.1 我国草鱼养殖概况第18页
        1.1.2 草鱼出血病简介第18页
        1.1.3 草鱼呼肠孤病毒的形态、组成和理化特征第18-19页
        1.1.4 GCRV-Ⅱ各基因节段编码的蛋白及其功能第19-20页
    1.2 草鱼出血病疫苗的研究进展第20-23页
        1.2.1 灭活疫苗第20-21页
        1.2.2 弱毒疫苗第21-22页
        1.2.3 亚单位疫苗第22页
        1.2.4 DNA疫苗第22-23页
    1.3 病毒样颗粒的概述第23-29页
        1.3.1 病毒样颗粒的分类第24页
        1.3.2 病毒样颗粒的表达系统第24-27页
        1.3.3 鱼类VLPs疫苗的研究进展第27-29页
    1.4 本研究的目的及意义第29-31页
第二章 GCRV-Ⅱ S3、S6、S9和S10基因重组杆状病毒的构建及目的蛋白的表达第31-46页
    2.1 材料第31-33页
        2.1.1 病毒及细胞第31-32页
        2.1.2 实验试剂及耗材第32页
        2.1.3 实验仪器及设备第32-33页
    2.2 方法第33-39页
        2.2.1 引物的设计与合成第33页
        2.2.2 总RNA的提取及c DNA合成第33-34页
        2.2.3 目的片段S3、S6、S9、S10 的扩增及胶回收第34-35页
        2.2.4 克隆质粒pMD18T-S3、S6、S9、S10的构建及鉴定第35-36页
        2.2.5 重组供体质粒的构建及鉴定第36-37页
        2.2.6 重组穿梭质粒的构建及鉴定第37页
        2.2.7 重组杆状病毒的构建第37-38页
        2.2.8 重组杆状病毒目的mRNA转录检测第38页
        2.2.9 间接免疫荧光鉴定第38页
        2.2.10 Western Blot鉴定第38-39页
    2.3 结果第39-45页
        2.3.1 目的片段S3、S6、S9、S10 的扩增及胶回收第39页
        2.3.2 克隆质粒pMD18T-S3/S6/S9/S10的构建及鉴定第39-40页
        2.3.3 重组供体质粒的鉴定第40-41页
        2.3.4 重组穿梭质粒的鉴定第41-42页
        2.3.5 重组杆状病毒的构建第42-43页
        2.3.6 重组杆状病毒目的mRNA转录检测第43页
        2.3.7 间接免疫荧光(IFA)鉴定重组杆状病毒第43-44页
        2.3.8 Western Blot鉴定第44-45页
    2.4 讨论第45页
    2.5 小结第45-46页
第三章 GCRV-Ⅱ S6、S9和S10 基因的密码子优化和重组杆状病毒的构建及表达第46-58页
    3.1 材料第46-47页
        3.1.1 细胞第46页
        3.1.2 实验试剂及器材第46页
        3.1.3 实验仪器及设备第46-47页
    3.2 方法第47-48页
        3.2.1 S6、S9和S10基因节段ORF优化第47页
        3.2.2 重组供体质粒的构建及鉴定第47页
        3.2.3 重组穿梭质粒的构建及鉴定第47-48页
        3.2.4 重组杆状病毒的构建第48页
        3.2.5 间接免疫荧光鉴定第48页
        3.2.6 Western Blot鉴定第48页
    3.3 结果第48-56页
        3.3.1 S6、S9和S10 密码子优化结果第48-52页
        3.3.2 重组供体质粒的构建及鉴定第52-53页
        3.3.3 重组穿梭质粒的构建及鉴定第53页
        3.3.4 重组杆状病毒的构建第53-54页
        3.3.5 间接免疫荧光鉴定第54-55页
        3.3.6 Western Blot鉴定第55-56页
    3.4 讨论第56页
    3.5 小结第56-58页
第四章 基于六种重组杆状病毒不同组合共感染策略分别构建GCRV-Ⅱ VLPs第58-66页
    4.1 材料第58-59页
        4.1.1 细胞第58-59页
        4.1.2 实验试剂及耗材第59页
        4.1.3 实验仪器及设备第59页
    4.2 方法第59-60页
        4.2.1 重组杆状病毒共感染第59页
        4.2.2 间接免疫荧光鉴定VLPs第59页
        4.2.3 细胞超薄切片电镜观察第59-60页
        4.2.4 VLPs的纯化及电镜观察第60页
    4.3 结果第60-63页
        4.3.1 间接免疫荧光鉴定VLPs第60-61页
        4.3.2 细胞超薄切片电镜观察第61-62页
        4.3.3 VLPs电镜观察第62-63页
    4.4 讨论第63-65页
    4.5 小结第65-66页
第五章 GCRV-Ⅱ三种VLPs免疫效果评价第66-79页
    5.1 材料第66-67页
        5.1.1 毒株、及实验动物第66-67页
        5.1.2 实验试剂及耗材第67页
        5.1.3 实验仪器及设备第67页
    5.2 方法第67-69页
        5.2.1 草鱼免疫实验第67页
        5.2.2 样品采集与处理第67页
        5.2.3 ELISA法检测血清IgM特异性抗体水平第67-68页
        5.2.4 组织中免疫相关因子表达水平检测第68-69页
        5.2.5 攻毒感染第69页
        5.2.6 统计分析第69页
    5.3 结果第69-74页
        5.3.1 血清Ig M特异性抗体水平变化第69-70页
        5.3.2 组织中免疫相关因子表达水平检测第70-73页
        5.3.3 免疫保护率第73-74页
    5.4 讨论第74-77页
    5.5 小结第77-79页
第六章 结论第79-80页
参考文献第80-90页
主要符号对照表第90-92页
致谢第92-93页
攻读硕士学位期间论文发表情况第93页

 
 
论文编号BS4703895,这篇论文共93
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