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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--马铃薯Y病毒和马铃薯卷叶病毒的实时荧光同步检测技术的研究
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马铃薯Y病毒和马铃薯卷叶病毒的实时荧光同步检测技术的研究
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 绪论第10-23页
   ·马铃薯病毒的概况第10-13页
     ·马铃薯Y 病毒和马铃薯A 病毒第10-11页
     ·马铃薯X 病毒第11-12页
     ·马铃薯卷叶病毒第12页
     ·马铃薯S 病毒和马铃薯M 病毒第12-13页
   ·马铃薯病毒的检测方法第13-15页
     ·指示植物法第13页
     ·电镜技术方法第13-14页
     ·以抗体为基础的免疫学检测方法第14页
     ·马铃薯病毒分子检测技术第14-15页
   ·荧光定量PCR 技术研究进展及其应用.第15-22页
     ·实时荧光定量PCR 原理第15-16页
     ·实时荧光定量PCR 的种类第16-20页
     ·定量方法第20页
     ·实时荧光定量PCR 方法的应用第20-21页
     ·多重荧光定量PCR第21-22页
   ·研究目的和意义第22页
   ·研究内容第22-23页
2 材料与方法第23-34页
   ·材料第23-24页
     ·实验材料第23页
     ·主要试剂和实验仪器第23-24页
   ·样品总RNA 的提取第24-25页
     ·浸泡法第24页
     ·异硫氰酸胍法第24-25页
     ·改进CTAB 法第25页
     ·微滤柱离心法第25页
     ·试剂盒提取法第25页
   ·PVY、PLRV 阳性标准品CRNA 的制备第25-27页
     ·阳性质粒的提取第25-26页
     ·体外转录得到cRNA第26页
     ·标准品浓度的测定第26-27页
   ·单重荧光RT-PCR 检测PVY、PLRV 体系的建立第27-28页
     ·引物和TaqMan 探针的设计第27页
     ·实时荧光定量RT-PCR 反应第27-28页
     ·荧光定量RT-PCR 体系的优化第28页
     ·荧光定量RT-PCR 特异性检测第28页
     ·荧光定量RT-PCR 灵敏度检测及标准曲线的绘制第28页
   ·单重荧光RT-PCR 对组培样品的检测及扩增靶片段的克隆与测序第28-31页
     ·RT-PCR 产物的扩增与回收第29页
     ·大肠杆菌感受态的制备第29页
     ·靶片段与载体的体外连接第29-30页
     ·质粒的转化第30页
     ·阳性转化子的筛选与鉴定第30页
     ·PCR 扩增产物的测序第30-31页
   ·两重荧光定量RT-PCR 对PVY 和PLRV 的检测体系的建立第31-34页
     ·两重实时荧光定量RT-PCR 反应第31-32页
     ·实时荧光RT-PCR 检测体系优化第32页
     ·探针浓度组合选择第32页
     ·检测特异性验证第32页
     ·重复性验证及抗干扰性验证第32-33页
     ·两重荧光定量RT-PCR 对样品的检测第33-34页
3 结果与分析第34-44页
   ·马铃薯叶片总RNA 的提取方法优化第34页
   ·阳性标准品制备第34-35页
   ·单重荧光RT-PCR 检测体系的建立第35-40页
     ·单重荧光定量 RT-PCR 体系的优化第35-37页
     ·单重荧光定量特异性检测第37-38页
     ·单重荧光定量灵敏性检测和标准曲线的绘制第38-40页
   ·RT-PCR 产物的克隆与测序第40-41页
   ·两重荧光定量RT-PCR 检测体系的建立第41-44页
     ·探针浓度组合选择第41-42页
     ·分别检测单重RT-PCR 和两重RT-PCR 重复性验证第42页
     ·与常规RT-PCR 检测方法的对比及对送检样品的检测第42-44页
4 讨论第44-49页
   ·不同制样方法对检测结果的影响第44页
   ·引物探针检测性能的比较第44-45页
   ·RT-PCR 检测假阳性与假阴性的排除与降低第45-46页
   ·常规RT-PCR 与荧光定量RT-PCR 检测方法的比较第46-47页
   ·单重荧光定量RT-PCR 方法与多重荧光定量方法的比较.第47-49页
5 结论与后续工作建议第49-50页
   ·结论第49页
   ·后续工作建议第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-59页
附录第59-60页

 
 
论文编号BS650695,这篇论文共60
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