符号说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 引言 | 第13-32页 |
1.1 表观遗传学 | 第13-14页 |
1.1.1 表观遗传学发展现状及主要研究内容 | 第13-14页 |
1.2 DNA甲基化与去甲基化 | 第14-18页 |
1.2.1 植物DNA甲基化的特点 | 第14-16页 |
1.2.2 植物DNA甲基转移酶 | 第16-17页 |
1.2.3 植物DNA去甲基化过程 | 第17页 |
1.2.4 DNA甲基化基因表达调控的机制 | 第17-18页 |
1.3 RNA介导的DNA甲基化 | 第18-20页 |
1.3.1 siRNA的形成 | 第18-19页 |
1.3.2 RdDM的作用机理 | 第19-20页 |
1.4 表观遗传调控植物响应非生物胁迫 | 第20页 |
1.5 低温胁迫 | 第20-27页 |
1.5.1 低温胁迫对植物的伤害 | 第20-21页 |
1.5.2 冷胁迫信号 | 第21-22页 |
1.5.3 转录调节 | 第22-26页 |
1.5.4 转录后调节 | 第26-27页 |
1.6 植物抗高温研究进展 | 第27-29页 |
1.6.1 高温胁迫对植物的损伤 | 第27-28页 |
1.6.2 植物对高温胁迫的响应机制 | 第28-29页 |
1.7 光信号反应 | 第29-30页 |
1.7.1 光信号反应的介绍 | 第29-30页 |
1.7.2 光反应的光受体调节 | 第30页 |
1.8 本实验的目的意义 | 第30-32页 |
2 材料与方法 | 第32-49页 |
2.1 实验材料 | 第32-37页 |
2.1.1 植物材料 | 第32页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第32页 |
2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第32-33页 |
2.1.4 引物 | 第33-35页 |
2.1.5 网络信息资源 | 第35-37页 |
2.2 实验方法 | 第37-49页 |
2.2.1 植物全基因组的提取 | 第37页 |
2.2.2 载体构建 | 第37-39页 |
2.2.3 PCR鉴定突变体纯合植株 | 第39页 |
2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第39-41页 |
2.2.5 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第41页 |
2.2.6 拟南芥转化及转基因植株鉴定 | 第41-42页 |
2.2.7 RNA的提取纯化与反转录 | 第42-43页 |
2.2.8 实时定量PCR | 第43-44页 |
2.2.9 亚硫酸氢盐处理基因组 | 第44-45页 |
2.2.10 miRcute miRNA Isolation Kit提取sRNA | 第45-46页 |
2.2.11 siRNA的定量检测 | 第46-48页 |
2.2.12 亚硫酸盐测序PCR(Bisulfite Sequencing PCR, BSP) | 第48页 |
2.2.13 幼苗红光处理 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-68页 |
3.1 拟南芥温度胁迫相关表观遗传调控分析 | 第49-64页 |
3.1.1 生物信息学方法筛选拟南芥温度诱导的表观遗传调控相关基因 | 第49-57页 |
3.1.1.1 拟南芥温度胁迫诱导基因的筛选 | 第49-50页 |
3.1.1.2 拟南芥温度胁迫基因启动子DNA甲基化和组蛋白修饰分析 | 第50-54页 |
3.1.1.3 拟南芥温度胁迫候选基因启动子区域的24-nt siRNA靶向分析 | 第54-56页 |
3.1.1.4 候选基因的启动子DNA甲基化测序引物设计 | 第56-57页 |
3.1.2 拟南芥中温度诱导且表观遗传调控相关候选基因验证 | 第57-59页 |
3.1.3 候选基因的超表达植株、T-DNA插入突变体和RNAi植株的表型及功能鉴定 | 第59-64页 |
3.1.3.1 候选基因的超表达植、T-DNA插入突变体和RNAi植株的获得 | 第59-61页 |
3.1.3.2 温度胁迫下AT2G21150 T-DNA插入突变体植株的表型鉴定 | 第61-64页 |
3.2 XCT(XAP5 circadian timekeeper)基因表观遗传调控机理研究 | 第64-68页 |
3.2.1 XCT基因启动子区域的表观遗传学修饰分析 | 第64页 |
3.2.2 XCT基因的红光响应实验验证 | 第64-66页 |
3.2.3 XCT基因启动子区域的24-nt siRNA分析 | 第66页 |
3.2.4 XCT基因启动子区域的24-nt siRNA积累量检测 | 第66-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
5 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第84页 |