| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-16页 |
| CHAPTER Ⅰ INTRODUCTION | 第16-27页 |
| 1.1 THEILERIA ANNULATA BIOLOGY | 第16-21页 |
| 1.1.1 Taxonomy and life cycle | 第16-18页 |
| 1.1.2 Epidemiological features of Theileria annulata | 第18页 |
| 1.1.3 Tropical theileriosis | 第18-21页 |
| 1.2 CHANGES IN THEILERIA ANNULATA-TRANSFORMED CELLS | 第21-23页 |
| 1.2.1 Parasite survival in transformed lymphocyte | 第21-22页 |
| 1.2.2 Host cell deformation | 第22页 |
| 1.2.3 Cell surface markers | 第22-23页 |
| 1.2.4 Impaired endocytosis rate | 第23页 |
| 1.3 HOST IMMUNE RESPONSE FOR THEILERIA ANNULATA | 第23-25页 |
| 1.3.1 Host first line of defense against Theileria annulata | 第23-24页 |
| 1.3.2 Pathological changes and cytokine production in T.annulata infection | 第24-25页 |
| 1.4 APPROACHES OF VACCINE DEVELOPMENT | 第25-26页 |
| 1.4.1 Live vaccine | 第25页 |
| 1.4.2 Subunit vaccine | 第25-26页 |
| 1.5 RATIONALE AND OBJECTIVES OF THE STUDY | 第26-27页 |
| CHAPTER Ⅱ ESTABLISHMENT AND EXPRESSION OF CYTOKINES FROM THEILERIA ANNULATA-INFECTED BOVINE B CELL LINE | 第27-50页 |
| 2.1 INTRODUCTION | 第27-29页 |
| 2.2 MATERIALS AND METHODS | 第29-34页 |
| 2.2.1 Reagents and antibodies | 第29-30页 |
| 2.2.2 Experimental animals | 第30页 |
| 2.2.3 Magnetic cell separation | 第30-31页 |
| 2.2.4 Cell line establishment and maintenance | 第31页 |
| 2.2.5 Cytotoxicity assay | 第31-32页 |
| 2.2.6 Antigenic stimulation | 第32页 |
| 2.2.7 Theileriacidal treatment | 第32页 |
| 2.2.8 Flow cytometry analysis | 第32-33页 |
| 2.2.9 PCR and sequencing analysis | 第33页 |
| 2.2.10 RNA extraction and cDNA synthesis | 第33-34页 |
| 2.2.11 Quantitative PCR analysis | 第34页 |
| 2.2.12 Statistical analysis | 第34页 |
| 2.3 RESULTS | 第34-47页 |
| 2.3.1 Confirmation of experimental animals for piroplasmosis | 第34-36页 |
| 2.3.2 Establishment of B cell line | 第36-37页 |
| 2.3.3 B cell line specificity and purity analysis | 第37-38页 |
| 2.3.4 Identity analysis of T.annulata strain | 第38-39页 |
| 2.3.5 Optimized concentration of antigen and Theileriacidal drug | 第39页 |
| 2.3.6 Optimization of cytokines primers | 第39-42页 |
| 2.3.7 Cytokines | 第42-47页 |
| 2.4 DISCUSSION | 第47-50页 |
| CHAPTER Ⅲ ENDOCYTOSIS MECHANISM AND EFFICACY IN NORMAL AND THEILERIA ANNULATA TRANSFORMED BOVINE DENDRITIC CELLS | 第50-64页 |
| 3.1 INTRODUCTION | 第50-51页 |
| 3.2 MATERIALS AND METHODS | 第51-55页 |
| 3.2.1 Reagents and antibodies | 第51-52页 |
| 3.2.2 Sampling | 第52页 |
| 3.2.3 Cell isolation and culture | 第52页 |
| 3.2.4 MoDC generation and TaDC cell line maintenance | 第52页 |
| 3.2.5 Antigen uptake | 第52-53页 |
| 3.2.6 Pathways of endocytosis | 第53页 |
| 3.2.7 Flow cytometric analysis | 第53-54页 |
| 3.2.8 Primers optimization | 第54页 |
| 3.2.9 RNA extraction and Real-Time qPCR | 第54页 |
| 3.2.10 Data analyses | 第54-55页 |
| 3.3 RESULTS | 第55-61页 |
| 3.3.1 TaDC cell line | 第55页 |
| 3.3.2 Endocytosis efficacy | 第55-56页 |
| 3.3.3 Clathrin-dependent endocytosis | 第56-57页 |
| 3.3.4 Clathrin-independent endocytosis | 第57-60页 |
| 3.3.5 Upgraded endocytosis | 第60页 |
| 3.3.6 Expression level of chemokine’s and mannose receptors | 第60-61页 |
| 3.4 DISCUSSION | 第61-64页 |
| CHAPTER Ⅳ INFLUENCE OF THEILERIA ANNULATA ON THE FUNCTIONS OF BOVINE ANTIGEN PRESENTING DENDRITIC CELLS FOR STIMULATION OF T LYMPHOCYTES PROLIFERATION | 第64-81页 |
| 4.1 INTRODUCTION | 第64-65页 |
| 4.2 MATERIALS AND METHODS | 第65-69页 |
| 4.2.1 Materials and reagents | 第65-66页 |
| 4.2.2 Sample collection and cell isolation | 第66页 |
| 4.2.3 Preparation of antigen presenting cells | 第66页 |
| 4.2.4 T lymphocytes proliferation assay | 第66页 |
| 4.2.5 Antigen mobilization assay | 第66-67页 |
| 4.2.6 Flow cytometry analysis | 第67页 |
| 4.2.7 Primers optimization | 第67-69页 |
| 4.2.8 RNA isolation and Real-Time qPCR | 第69页 |
| 4.2.9 Data analysis | 第69页 |
| 4.3 RESULTS | 第69-78页 |
| 4.3.1 Cells purity and MHC class molecules | 第69-71页 |
| 4.3.2 Rate of T lymphocytes proliferation | 第71-73页 |
| 4.3.3 Antigen transfer to lymphocytes | 第73-74页 |
| 4.3.4 Rab family genes primer optimization | 第74-76页 |
| 4.3.5 Rho small GTPase expression in TaDC cell line | 第76-78页 |
| 4.4 DISCUSSION | 第78-81页 |
| CHAPTER Ⅴ CONCLUSION | 第81-82页 |
| REFERENCES | 第82-93页 |
| APPENDICES | 第93-96页 |
| APPENDICES 1.1 PROTOCOLS | 第93-94页 |
| Appendices 1.1.1: Cells isolation | 第93页 |
| Appendices 1.1.2: Antigen presentation for T lymphocytes proliferation | 第93-94页 |
| APPENDICES 1.2 BUFFERS AND SOLUTIONS | 第94-96页 |
| Appendices 1.2.1: Complete cell culture medium | 第94页 |
| Appendices 1.2.2: 1×PBS buffer composition | 第94页 |
| Appendices 1.2.3: MACS buffer composition | 第94-95页 |
| Appendices 1.2.4: Cell culture preservation medium | 第95-96页 |
| 致谢(ACKNOWLEDGEMENT) | 第96-97页 |
| 作者简历(RESUME) | 第97-100页 |
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