| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 縮略词表 | 第15-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 文献综述 胚胎干细胞向神经干细胞分化的研究进展 | 第17-21页 |
| 第一部分 人颞下颌关节滑膜间充质干细胞神经化的实验研究 | 第21-44页 |
| 实验一 人颞下颌关节滑膜间充质干细胞分离、纯化培养 | 第22-29页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第23-24页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-25页 |
| ·人颞下颌关节滑膜组织的获取 | 第24页 |
| ·滑膜细胞原代培养 | 第24页 |
| ·滑膜细胞的传代培养 | 第24-25页 |
| ·SMSCs增殖、传代、冻存与复苏 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-27页 |
| ·原代培养的滑膜细胞生长状态 | 第26页 |
| ·传代后滑膜细胞生长状态 | 第26页 |
| ·SMSCs的增殖能力 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27-28页 |
| 5 结论 | 第28-29页 |
| 实验二 滑膜间充质干细胞神经分化潜能的实验研究 | 第29-44页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第30-32页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-37页 |
| ·人颞下颌关节SMSCs神经化 | 第32页 |
| ·倒置显微镜与扫描电镜观察神经化SMSCs超微细胞学形态 | 第32-33页 |
| ·神经化SMSCs免疫细胞化学检测 | 第33页 |
| ·神经化SMSCs流式细胞术检测 | 第33-34页 |
| ·神经化SMSCs逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测 | 第34-37页 |
| ·总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·mRNA逆转录为cDNA | 第35页 |
| ·PCR增扩及循环次数的选择 | 第35-37页 |
| ·统计学分析 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| ·人颞下颌关节SMSCs神经化细胞倒置显微镜观察细胞学形态 | 第37页 |
| ·扫描电镜观察神经化SMSCs超微细胞学形态 | 第37-38页 |
| ·神经化SMSCs免疫细胞化学检测结果 | 第38-39页 |
| ·神经化SMSCs流式细胞术检测结果 | 第39-41页 |
| ·神经化SMSCs RT-PCR检测结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 第二部分 人颞下颌关节滑膜间充质干细胞神经化与疼痛的实验研究 | 第44-79页 |
| 实验三 神经肽P物质与降钙激素相关肽在神经化的人颞下颌关节滑膜间充质干细胞中表达的实验研究 | 第45-53页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-48页 |
| ·在bFGF与条件培养基作用下诱导SMSCs神经化 | 第47页 |
| ·神经化SMSCs与SMSCs免疫细胞化学检测SP与CGRP的表达 | 第47-48页 |
| ·统计学分析 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-51页 |
| ·倒置显微镜观察在bFGF与条件培养基作用下诱导SMSCs神经化的结果 | 第48-49页 |
| ·免疫细胞化学检测神经化的SMSCs与SMSCs两者中神经肽SP&CGRP表达的结果 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 实验四 SP&CGRP对神经化的人颞下颌关节滑膜间充质干细胞炎性因子分泌的实验研究 | 第53-65页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第54-55页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54-55页 |
| 2 方法 | 第55-56页 |
| ·观察人SMSCs与神经化SMSCs在SP&CGRP作用下炎性因子IL-1β、IL-6与TNF-α蛋白分泌量的测定 | 第55页 |
| ·标准曲线的制作 | 第55-56页 |
| ·统计学分析 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-63页 |
| ·人SMSCs与神经化SMSCs在SP&CGRP作用下炎性因子IL-1β、IL-6与TNF-α蛋白分泌量的测定结果 | 第56-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 实验五 炎性因子对神经化的人颞下颌关节滑膜间充质干细胞神经肽SP&CGRP分泌的实验研究 | 第65-79页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第66-69页 |
| ·材料 | 第66-67页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·RT-PCR检测炎性因子环境下SMSCs与神经化SMSCs神经肽SP&CGRP分泌的主要试剂 | 第66-67页 |
| ·蛋白质印迹法炎性因子环境下检测SMSCs与神经化SMSCs神经肽SP&CGRP分泌的主要试剂 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67-69页 |
| ·细胞培养主要仪器 | 第67-68页 |
| ·PCR主要仪器 | 第68页 |
| ·Western blotting主要仪器 | 第68-69页 |
| 2 方法 | 第69-74页 |
| ·RT-PCR检测炎性因子环境下SMSCs与神经化SMSCs神经肽SP&CGRP的分泌 | 第69-72页 |
| ·总RNA的提取 | 第69-70页 |
| ·mRNA逆转录为cDNA | 第70页 |
| ·PCR增扩及循环次数的选择 | 第70-72页 |
| ·蛋白质印迹法炎性因子环境下检测SMSCs与神经化SMSCs神经肽SP&CGRP分泌的方法 | 第72-73页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第72页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第72-73页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第73页 |
| ·统计学分析 | 第73-74页 |
| 3 结果 | 第74-77页 |
| ·RT-PCR检测炎性因子环境下SMSCs与神经化SMSCs神经肽SP&CGRP的分泌的结果 | 第74-75页 |
| ·蛋白质印迹法炎性因子环境下检测SMSCs与神经化SMSCs神经肽SP&CGRP分泌的结果 | 第75-77页 |
| 4 讨论 | 第77-78页 |
| 5 小结 | 第78-79页 |
| 全文总结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第87-88页 |
| 附文章 | 第88-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 个人简介 | 第110-111页 |
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