摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-25页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 | 第9-19页 |
·PRRSV 的分类 | 第9-10页 |
·PRRSV 理化特性 | 第10页 |
·PRRSV 抗原性 | 第10-11页 |
·PRRSV 分子生物学研究进展 | 第11-19页 |
·猪繁殖与呼吸综合征诊断方法研究进展 | 第19-25页 |
·临床诊断 | 第19页 |
·病毒学检查 | 第19-22页 |
·分子生物学诊断技术 | 第22-23页 |
·其它检测技术 | 第23-24页 |
·结语 | 第24-25页 |
第二章 PRRSV 核衣壳蛋白的克隆与表达 | 第25-36页 |
·材料与方法 | 第25-32页 |
·材料 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-32页 |
·结果 | 第32-34页 |
·PRRSV N 蛋白的RT-PCR 扩增及鉴定 | 第32页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第32-33页 |
·重组载体的诱导表达 | 第33-34页 |
·重组蛋白的Western blotting 分析 | 第34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第三章 检测PRRSV 抗体的间接阻断ELISA 方法的建立 | 第36-42页 |
·材料与方法 | 第36-38页 |
·主要免疫学试剂与器材 | 第36页 |
·抗PRRSV N 蛋白单抗 | 第36页 |
·血清样本 | 第36页 |
·包被抗原的制备 | 第36页 |
·间接阻断ELISA 方法的操作 | 第36-38页 |
·结果 | 第38-40页 |
·重组N 蛋白的制备 | 第38页 |
·包被浓度的确定 | 第38页 |
·最适封闭液浓度的确定 | 第38页 |
·最适单抗浓度的确定 | 第38页 |
·最适酶标羊抗鼠二抗浓度的确定 | 第38-39页 |
·最适酶标羊抗猪二抗浓度的确定 | 第39页 |
·判定标准的确定 | 第39页 |
·检测临床猪血清 | 第39页 |
·与Western blotting 检测结果比较 | 第39-40页 |
·与IDEXX 公司试剂盒比较试验 | 第40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第四章 重组GP5 检测PRRSV 抗体间接ELISA 方法的建立 | 第42-49页 |
·材料与方法 | 第42-44页 |
·材料 | 第42页 |
·方法 | 第42-44页 |
·结果 | 第44-46页 |
·重组抗原的诱导表达 | 第44页 |
·Western blotting 分析 | 第44-45页 |
·间接ELISA 方法的建立 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
·PRRSV 中国株ORF5 基因重组表达质粒的构建与诱导表达 | 第46页 |
·包涵体的纯化 | 第46-47页 |
·本试验的突出特点 | 第47页 |
·检测结果分析 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录 | 第58-67页 |
附录 1 主要试剂的配制 | 第58-64页 |
附录 2 间接阻断 ELISA 检测猪血清的抑制率 | 第64-67页 |
个人简历 | 第67页 |