| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 英文缩略词表 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-21页 |
| 第一部分 雷公藤内酯醇体外抗结肠癌细胞 SW480 作用及相关机制的研究 | 第21-50页 |
| 一 材料与方法 | 第21-31页 |
| 1. 材料 | 第21-23页 |
| 2. 方法 | 第23-30页 |
| ·细胞培养 | 第23页 |
| ·MTT 法检测雷公藤内酯醇对 SW480 细胞增殖的影响 | 第23-24页 |
| ·集落形成试验检测TPL 对 SW480 细胞集落形成的影响 | 第24页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第24页 |
| ·SW480 细胞DNA 拓扑异构酶的制备与活性测定 | 第24-25页 |
| ·体外微管蛋白聚合实验 | 第25-26页 |
| ·AO/EB 荧光染色法观察TPL 对SW480 细胞凋亡的影响 | 第26-27页 |
| ·分光光度法检测 TPL 对细胞caspase-3 和caspase-9 活性的影响 | 第27页 |
| ·RT-PCR 半定量检测TPL 对SW480 细胞 HSP70 mRNA 的影响 | 第27-29页 |
| ·Western blot 技术观察TPL 对 SW480 细胞热休克蛋白70及与细胞增殖和凋亡有关信号分子的影响 | 第29-30页 |
| ·溶酶体结构完整性分析 | 第30页 |
| ·SB203580 预处理 SW480 细胞 | 第30页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第30页 |
| 3. 数据及图片处理 | 第30-31页 |
| 二 结果 | 第31-43页 |
| 1.TPL 对SW480 细胞增殖的影响 | 第31页 |
| 2.TPL 对SW480 细胞克隆形成的影响 | 第31-32页 |
| 3.TPL 对SW480 细胞凋亡的影响 | 第32-33页 |
| 4.TPL 对SW480 细胞DNA 拓扑异构酶活性的影响 | 第33-34页 |
| 5.TPL 对体外微管蛋白的影响 | 第34-37页 |
| 6.TPL 对SW480 细胞热休克蛋白70 及与其相关的增殖和凋亡信号分子的影响 | 第37-39页 |
| 7.TPL 对SW480 细胞溶酶体结构的影响 | 第39-41页 |
| 8.TPL 对SW480 细胞p-p38、Erk1/2、p-Erk1/2 蛋白的影响 | 第41页 |
| 9.p38 抑制剂对TPL 诱导SW480 细胞增殖抑制和凋亡的影响 | 第41-43页 |
| 三 讨论 | 第43-49页 |
| 四 小结 | 第49-50页 |
| 第二部分 雷公藤内酯醇与奥沙利铂合用对 SW480 细胞的抑制作用及相关机制的研究 | 第50-66页 |
| 一 材料与方法 | 第50-52页 |
| 1. 材料 | 第50-51页 |
| 2. 方法 | 第51-52页 |
| ·细胞株及培养条件 | 第51页 |
| ·MTT 法检测TPL 与奥沙利铂联合对SW480 细胞增殖的影响 | 第51页 |
| ·集落形成试验检测TPL 与奥沙利铂对 SW480 细胞集落形成的影响 | 第51页 |
| ·流式细胞术检测TPL 与OXA 联合对细胞凋亡的影响 | 第51页 |
| ·分光光度法检测TPL 与OXA 联合对细胞caspase-3 和caspase-9 活性的影响 | 第51-52页 |
| ·Western blot 技术观察TPL 与OXA 联合对 SW480 细胞热休克蛋白70及与细胞增殖和凋亡有关信号分子的影响 | 第52页 |
| ·SB203580 预处理SW480 细胞 | 第52页 |
| 3. 数据及图片处理 | 第52页 |
| 二 结果 | 第52-62页 |
| 1.TPL 与OXA 联合对SW480 细胞增殖的影响 | 第52-55页 |
| 2.TPL 与OXA 联合对SW480 细胞克隆形成的影响 | 第55-56页 |
| 3.TPL 与OXA 联合对SW480 细胞凋亡的影响 | 第56-57页 |
| 4.TPL 与OXA 联合对SW480 细胞热休克蛋白70及与其相关的增殖和凋亡信号分子的影响 | 第57-60页 |
| 5.TPL 与OXA 联合作用对 SW480 细胞p-p38、Erk1/2、p-Erk1/2 蛋白的影响 | 第60-61页 |
| 6.SB203580 对TPL 与OXA 诱导SW480 细胞增殖抑制和凋亡的影响 | 第61-62页 |
| 三 讨论 | 第62-65页 |
| 四 小结 | 第65-66页 |
| 第三部分 雷公藤内酯醇与奥沙利铂合用对 SW480 细胞裸鼠异种移植瘤的作用及相关机制的研究 | 第66-79页 |
| 一 材料与方法 | 第66-70页 |
| 1. 材料 | 第66-67页 |
| 2. 方法 | 第67-70页 |
| ·细胞培养 | 第67页 |
| ·SW480 细胞裸鼠异种移植瘤模型的建立 | 第67页 |
| ·实验分组及给药方案 | 第67-68页 |
| ·标本收集 | 第68页 |
| ·血常规及肝功能检测 | 第68页 |
| ·肿瘤组织常规HE 染色 | 第68页 |
| ·肿瘤组织免疫组化检测HSP70 的蛋白表达 | 第68-69页 |
| ·免疫印迹检测肿瘤组织中HSP70、p53、Bax 的蛋白表达 | 第69-70页 |
| 3. 统计学分析 | 第70页 |
| 二 结果 | 第70-76页 |
| 1. 裸鼠生长及成瘤情况 | 第70页 |
| 2. TPL 与OXA 联合对SW480 细胞裸鼠异种移植瘤生长的抑制作用 | 第70-73页 |
| 3. TPL 与OXA 联合对荷瘤裸鼠血常规及肝肾功能的影响 | 第73页 |
| 4. TPL 与 OXA 联合对肿瘤组织形态结构的影响 | 第73-74页 |
| 5. 免疫组织化学检测TPL 与OXA 联合对肿瘤组织HSP70 蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| 6. 免疫印迹检测TPL 与OXA 联合对肿瘤组织中HSP70、p53、Bax 的蛋白表达的影响 | 第75-76页 |
| 三 讨论 | 第76-78页 |
| 四 小结 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 综 述 以微管及其相关蛋白为靶点的抗肿瘤研究 | 第90-102页 |
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