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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--马克斯克鲁维酵母的木糖代谢和工程改造以及绿脓杆菌Rh1I蛋白的定向进化
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马克斯克鲁维酵母的木糖代谢和工程改造以及绿脓杆菌Rh1I蛋白的定向进化
 
     论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第1章 马克思克鲁维酵母的木糖代谢和工程改造研究第13-83页
 1. 绪论第13-16页
   ·以马克思克鲁维酵母作为发酵的平台第13-14页
   ·酵母的木糖代谢途径第14-15页
   ·马克思克鲁维酵母木糖代谢通路的改造第15-16页
 2. 实验原材料与实验流程第16-83页
   ·实验原材料第16-21页
     ·实验中用到和构建的菌株与质粒第16-17页
     ·本研究所用到的引物第17-19页
     ·培养基第19页
     ·试剂第19页
     ·试剂配制第19-20页
     ·实验仪器与实验设备第20-21页
   ·实验方法第21-26页
     ·DNA产物纯化第21页
     ·小量质粒抽提第21-22页
     ·大肠杆菌超级感受态细胞的制备第22-23页
     ·大肠杆菌感受态细胞的热激转化第23页
     ·马克思克鲁维酵母的化学转化第23-24页
     ·SDS-PAGE蛋白质电泳第24页
     ·酵母总RNA提取第24-25页
     ·Bradford法测定蛋白质浓度第25-26页
     ·马克思克鲁维酵母基因组的抽提第26页
   ·实验流程第26-52页
     ·马克思克鲁维酵母的木糖还原酶的基因克隆第27-30页
     ·马克思克鲁维酵母的木糖还原酶的重组表达第30-35页
     ·YHJ010中木糖还原酶基因的敲除第35-39页
     ·KmXR的S280D和S280N突变体的构建和表达第39-43页
     ·构建重组马克思克鲁维酵母菌株表达树干毕赤酵母木糖还原酶(Psxyl1)及其突变体第43-50页
     ·用重组马克思克鲁维酵母菌株发酵木糖和玉米芯水解液第50-51页
     ·木糖还原酶酶活的测定第51页
     ·RT-PCR分析Psxyl1在不同菌株中的表达水平第51-52页
   ·实验结果和讨论第52-81页
     ·马克思克鲁维酵母木糖还原酶的基因克隆,蛋白表达纯化以及性质分析第52-61页
     ·马克思克鲁维酵母木糖还原酶的基因敲除及验证第61-66页
     ·马克思克鲁维酵母木糖代谢的工程化改造第66-81页
   ·小结与展望第81-83页
第2章 绿脓杆菌群体响应系统RhlI蛋白的定向进化第83-137页
 1. 绪论第83-86页
   ·细菌的群体响应(quorum sensing)系统第83-84页
   ·群体响应系统是调控绿脓杆菌感染的一个重要机理第84-85页
   ·抑制群体响应系统的化合物是新型抗生素第85-86页
 2. 实验原材料与流程第86-137页
   ·实验原材料第86-92页
     ·实验中用到和构建的菌株与质粒第86页
     ·本研究所用到的引物第86-89页
     ·培养基第89-90页
     ·试剂第90页
     ·试剂配制第90-91页
     ·实验仪器与实验设备第91-92页
   ·实验方法第92-96页
     ·DNA产物纯化第92页
     ·小量质粒抽提第92-93页
     ·大肠杆菌超级感受态细胞的制备第93-94页
     ·大肠杆菌化学感受态细胞的热激转化第94页
     ·大肠杆菌电激转化感受态细胞的制备第94-95页
     ·电激转化大肠杆菌感受态细胞的方法第95页
     ·SDS-PAGE蛋白质电泳第95页
     ·Bradford法测定蛋白质浓度第95-96页
   ·实验流程第96-124页
     ·开发可以用来定向演化RhlI的高通量筛选方法第96-101页
     ·第一轮定向演化RhlI第101-105页
     ·第二轮筛选体系的构建第105-112页
     ·第二轮定向演化第112-115页
     ·第三轮筛选体系的构建第115-119页
     ·突变位点功能分析第119-124页
   ·实验结果和讨论第124-135页
     ·开发可以用来定向演化RhlI的高通量筛选方法第124-126页
     ·第一轮定向演化RhlI蛋白第126-130页
     ·第二轮定向演化RhlI蛋白第130-132页
     ·第三轮定向演化RhlI蛋白第132-133页
     ·突变位点功能验证第133-135页
   ·小结与展望第135-137页
参考文献第137-145页
附录1 基因序列第145-146页
致谢第146-147页
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第147页

 
 
论文编号BS2363798,这篇论文共147
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