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栉孔扇贝关键模式识别受体介导的免疫应答机制研究
 
     论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 文献综述第15-44页
 第一节 无脊椎动物的固有免疫系统第15-24页
  一、非己的识别第16-19页
   1. 模式识别理论第17页
   2. 病原相关分子模式第17-18页
   3. 模式识别受体第18-19页
  二、免疫信号的调整和放大第19-21页
   1. Toll/dif 途径第19-20页
   2. Imd/Rrelish 途径第20-21页
  三、病原体的清除第21-24页
   1. 细胞免疫第21-23页
   2. 体液免疫第23-24页
 第二节 模式识别受体概述第24-39页
  一、C 型凝集素第24-33页
   1.C 型凝集素的结构第25-27页
   2.C 型凝集素的分类第27-28页
   3.C 型凝集素的功能第28-33页
  二、肽聚糖识别蛋白第33-36页
   1. 肽聚糖识别蛋白的结构与分类第33-34页
   2. 肽聚糖识别蛋白的功能第34-36页
  三、脂多糖和β-1,3-葡聚糖结合蛋白第36-37页
  四、其他模式识别受体第37-39页
   1.T oll 样受体第37-38页
   2. 硫依赖型凝集素第38页
   3. 清道夫受体第38-39页
   4. 含硫酯蛋白第39页
 第三节 海洋无脊椎动物模式识别受体研究进展第39-43页
  一、C 型凝集素第40-41页
  二、肽聚糖识别蛋白第41页
  三、脂多糖和β-1,3-葡聚糖结合蛋白第41页
  四、其他模式识别受体第41-43页
 第四节 本研究的目的和意义第43-44页
第二章 实验材料与方法第44-59页
 第一节 实验材料第44-45页
  一、实验动物与菌株第44页
  二、主要试剂第44-45页
  三、主要仪器第45页
 第二节 实验方法第45-59页
  一、序列与结构特征分析第45页
  二、栉孔扇贝cDNA 模板的制备第45-46页
   1. 扇贝的PAMPs 免疫刺激第45页
   2. 扇贝总RNA 的提取第45-46页
   3. 扇贝cDNA 模板第一链的合成第46页
  三、荧光实时定量PCR第46-47页
  四、蛋白的原核重组表达和纯化第47-50页
   1. 质粒的提取第47-48页
   2. 重组质粒的构建第48页
   3. 重组蛋白的表达与检测第48-49页
   4. 重组蛋白的纯化第49页
   5. 重组蛋白的复性与浓度测定第49-50页
  五、定点突变分析第50-51页
   1. 定点突变第50-51页
   2. 突变体蛋白的重组表达第51页
  六、多克隆抗体的制备与Cy3 标记第51-53页
   1. 多克隆抗体的制备第51页
   2. 多克隆抗体特异性的检测第51-52页
   3. 多克隆抗体的纯化与Cy3 标记第52-53页
  七、免疫荧光分析第53页
   1. 组织材料处理第53页
   2. 免疫荧光染色第53页
  八、免疫组织化学分析第53-55页
   1. 组织材料处理第53-54页
   2. 免疫组织化学染色第54-55页
  九、重组蛋白的PAMPs 结合活性分析第55-56页
   1. PAMPs 生物芯片法第55-56页
   2. 酶联免疫吸附(ELISA)法第56页
  十、重组蛋白对扇贝血细胞体外吞噬与包囊化作用的促进第56-57页
   1. 吞噬作用第56-57页
   2. 包囊化作用第57页
  十一、重组蛋白的凝菌活性分析第57-58页
  十二、重组蛋白的抑菌活性分析第58页
  十三、重组蛋白的酰胺酶活性分析第58-59页
第三章 实验结果与讨论第59-99页
 第一节 栉孔扇贝单结构域C 型凝集素的免疫应答机制第59-69页
  一、实验结果第59-65页
   1. CfLec-1 和CfLec-2 对PAMPs 刺激的响应第59-60页
   2. CfLec-1 和CfLec-2 重组蛋白的制备第60-61页
   3. CfLec-1 和CfLec-2 多克隆抗体的制备第61-62页
   4. CfLec-1 和CfLec-2 蛋白在组织中的分布第62-63页
   5. CfLec-1 和CfLec-2 的PAMPs 结合活性第63页
   6. CfLec-1 和CfLec-2 对栉孔扇贝血细胞包囊化作用的促进第63-65页
  二、讨论第65-69页
 第二节 栉孔扇贝多结构域C 型凝集素的免疫应答机制第69-84页
  一、实验结果第69-78页
   1. CfLec-3 对PAMPs 刺激的响应第69-70页
   2. CfLec-3 及其3 个CRD 重组蛋白的制备第70-71页
   3. CfLec-3 多克隆抗体的制备与Cy3 标记第71页
   4. CfLec-3 及其3 个CRD 的PAMPs 结合活性第71-73页
   5. CfLec-3 的免疫组织化学分析第73页
   6. CfLec-3 及其3 个CRD 对栉孔扇贝血细胞包囊化作用的促进第73-75页
   7. CfLec-3 及其3 个CRD 对栉孔扇贝血细胞吞噬作用的促进第75页
   8. CfLec-3 中3 个CRD 的序列与结构特征第75-77页
   9. CfLec-3 的定点突变分析第77-78页
   10. 突变体CRD 的PAMPs 结合活性第78页
  二、讨论第78-84页
 第三节 栉孔扇贝肽聚糖识别蛋白的免疫应答机制第84-92页
  一、实验结果第84-90页
   1. CfPGRP-51 对PAMPs 刺激的响应第84-85页
   2. CfPGRP-51 重组蛋白的制备第85页
   3. CfPGRP-51 多克隆抗体的制备第85-86页
   4. CfPGRP-51 蛋白在组织中的分布第86-87页
   5. CfPGRP-51 的PAMPs 结合活性第87页
   6. CfPGRP-51 的凝菌活性第87-88页
   7. CfPGRP-51 的抑菌活性第88-89页
   8. CfPGRP-51 的酰胺酶活性第89-90页
  二、讨论第90-92页
 第四节 栉孔扇贝脂多糖和β-1,3-葡聚糖结合蛋白的免疫应答机制第92-99页
  一、实验结果第92-97页
   1. CfLGBP 对PAMPs 刺激的响应第92-93页
   2. CfLGBP 重组蛋白的制备第93-94页
   3. CfLGBP 多克隆抗体的制备第94-95页
   4. CfLGBP 蛋白在组织中的分布第95页
   5. CfLGBP 的PAMPs 结合活性第95-96页
   6. CfLGBP 的凝菌活性第96-97页
  二、讨论第97-99页
第四章 结论第99-102页
参考文献第102-123页
附录第123-124页
博士期间发表和完成的论文第124-127页
致谢第127页

 
 
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