| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一部分 免疫调节分子BAFF/BAFF受体基因工程初步研究 | 第12-39页 |
| 第一章 BAFF及突变体的设计、构建 | 第12-23页 |
| 绪论 | 第12页 |
| 1.1 材料及来源 | 第12-14页 |
| 1.1.1 质粒和菌株 | 第12-13页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第13页 |
| 1.1.3 相关溶液配制 | 第13-14页 |
| 1.2 实验方法 | 第14-21页 |
| 1.2.1 K562细胞mRNA的提取 | 第14页 |
| 1.2.2 RNA逆转录 | 第14-15页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第15页 |
| 1.2.4 重叠延伸PCR定向诱变原理 | 第15-16页 |
| 1.2.5 BAFF及其突变体基因片段的获取 | 第16-18页 |
| 1.2.6 双酶切反应 | 第18-19页 |
| 1.2.7 连接 | 第19页 |
| 1.2.8 感受态制备 | 第19-20页 |
| 1.2.9 转化 | 第20页 |
| 1.2.10 菌落鉴定 | 第20页 |
| 1.2.11 质粒提取 | 第20-21页 |
| 1.3 实验结果 | 第21-22页 |
| 1.3.1 PCR产物鉴定 | 第21页 |
| 1.3.2 pET21a-sBAFF、pET21a-mBAFF测序结果 | 第21-22页 |
| 1.4 小结 | 第22-23页 |
| 第二章 BAFF受体突变体的设计、构建 | 第23-28页 |
| 绪论 | 第23页 |
| 2.1 材料及来源 | 第23-24页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 小鼠脾脏组织mRNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.2 RNA逆转录 | 第24页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第24-25页 |
| 2.2.4 BAFF受体突变体相关克隆构建 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-27页 |
| 2.3.1 PCR产物鉴定 | 第26页 |
| 2.3.2 pET28a-TACI-CRD2、pET28a-TACI-BR3、pET28a-BR3-TACI测序结果 | 第26-27页 |
| 2.4 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 sBAFF及mBAFF的表达及其条件优化 | 第28-35页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 相关溶液配制 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-30页 |
| 3.2.1 目标蛋白的表达及条件优化 | 第29-30页 |
| 3.3 实验结果 | 第30-33页 |
| 3.3.1 sBAFF的表达及条件优化 | 第30-33页 |
| 3.3.2 mBAFF的表达结果 | 第33页 |
| 3.4 小结 | 第33-35页 |
| 第四章 BAFF受体突变体的表达 | 第35-39页 |
| 4.1 实验材料及来源 | 第35页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第35页 |
| 4.1.2 相关溶液配制 | 第35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 4.3 实验结果 | 第36-38页 |
| 4.3.1 目标蛋白的表达 | 第36-38页 |
| 4.4 小结 | 第38-39页 |
| 第二部分 FADD突变致免疫性肠炎的初步分析 | 第39-47页 |
| 绪论 | 第39-40页 |
| 第一章 FADD~(-/-)TgD小鼠的基因型鉴定 | 第40-43页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第40页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第40页 |
| 1.1.2 相关溶液配置 | 第40页 |
| 1.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 1.2.1 FADD~(-/-)tgD小鼠的获取 | 第40-41页 |
| 1.2.2 小鼠基因组DNA的提取 | 第41页 |
| 1.2.3 PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 1.3 实验结果 | 第42页 |
| 1.4 小结 | 第42-43页 |
| 第二章 FADD~(-/-)TgD小鼠免疫性肠炎相关因子的mRNA水平检测 | 第43-47页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 2.2.1 小肠组织RNA抽提 | 第43页 |
| 2.2.2 总RNA纯度和完整性检测 | 第43页 |
| 2.2.3 逆转录 | 第43页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR检测 | 第43-44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-46页 |
| 2.3.1 FADD~(-/-)TgD小鼠肠炎的鉴定 | 第44页 |
| 2.3.2 FADD~(-/-)TgD小鼠肠炎相关因子的mRNA水平检测 | 第44-46页 |
| 2.4 小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-48页 |
| 综述 TNF家族的B细胞活化因子的研究进展 | 第48-60页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
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