摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第10-20页 |
1.1 抗体 | 第10页 |
1.2 用于抗体分离的亲和配基 | 第10-17页 |
1.2.1 生物大分子 | 第11-12页 |
1.2.2 疏水作用亲和配基 | 第12-13页 |
1.2.3 嗜硫作用亲和配基 | 第13页 |
1.2.4 疏水电荷诱导作用亲和配基 | 第13-14页 |
1.2.5 仿生亲和配基 | 第14-15页 |
1.2.6 羟基磷灰石和螯合金属离子 | 第15-17页 |
1.3 用于抗体分离的基质 | 第17-18页 |
1.4 本文的思路及研究内容 | 第18-20页 |
2 基于生物传感技术的抗体分离配基的研究 | 第20-36页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验仪器与试剂 | 第20-22页 |
2.3 实验操作 | 第22-28页 |
2.3.1 用于抗体分离的候选配基 | 第22页 |
2.3.2 候选配基在SPR传感金片表面的固定 | 第22-24页 |
2.3.3 候选配基在Blitz传感探头截面上的固定 | 第24-25页 |
2.3.4 基于SPR生物传感技术的抗体配基筛选 | 第25-27页 |
2.3.5 基于Blitz生物传感技术的优选配基抗体吸附能力研究 | 第27-28页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第28-35页 |
2.4.1 候选配基的蛋白吸附能力和选择性 | 第28-30页 |
2.4.2 优选配基与蛋白A配基的抗体特异性吸附能力对比 | 第30-33页 |
2.4.3 优选配基的抗体特异性吸附位点研究 | 第33-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
3 聚乙二醇修饰的磁性纳米材料的制备与表征 | 第36-47页 |
3.1 引言 | 第36页 |
3.2 实验仪器与试剂 | 第36-37页 |
3.3 实验操作 | 第37-40页 |
3.3.1 氨基聚乙二醇的合成 | 第37-38页 |
3.3.2 聚乙二醇修饰的磁性纳米材料的制备 | 第38-39页 |
3.3.3 茚三酮法定量配基密度(Kaiser Test) | 第39-40页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第40-45页 |
3.4.1 核磁表征 | 第40-41页 |
3.4.2 表面膜电位表征 | 第41-42页 |
3.4.3 配基密度表征(Kaiser Test) | 第42-44页 |
3.4.4 粒径表征—DLS | 第44-45页 |
3.4.5 微观形貌表征—TEM | 第45页 |
3.5 小结 | 第45-47页 |
4 聚乙二醇修饰的磁性纳米材料在抗体分离中的应用 | 第47-66页 |
4.1 引言 | 第47页 |
4.2 实验仪器与试剂 | 第47-48页 |
4.3 实验操作 | 第48-54页 |
4.3.1 bIgG和BSA溶液标准曲线的绘制 | 第48-49页 |
4.3.2 蛋白静态吸附实验 | 第49-50页 |
4.3.3 配基中的聚乙二醇链长筛选 | 第50页 |
4.3.4 配基中的杂原子筛选 | 第50-51页 |
4.3.5 蛋白吸附的pH条件 | 第51-52页 |
4.3.6 蛋白吸附的NaCl浓度影响 | 第52页 |
4.3.7 VS_NH_2-PEG2000化磁性纳米材料从模拟血清中分离抗体 | 第52页 |
4.3.8 VS_NH_2-PEG2000化磁性纳米材料从牛血清中分离抗体 | 第52-53页 |
4.3.9 VS_NH_2-PEG2000修饰的磁性纳米材料与氨基酸修饰的磁性纳米材料的抗体特异性吸附能力对比 | 第53-54页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第54-64页 |
4.4.1 配基中聚乙二醇链长筛选 | 第54-55页 |
4.4.2 配基中杂原子筛选 | 第55-57页 |
4.4.3 蛋白吸附的pH条件 | 第57-58页 |
4.4.4 蛋白吸附的NaCl浓度影响 | 第58-59页 |
4.4.5 VS_NH_2-PEG2000化磁性纳米材料的循环使用能力和bIg G等温吸附 | 第59-60页 |
4.4.6 VS_NH_2-PEG2000化磁性纳米材料从模拟血清中选择性吸附bIgG | 第60-61页 |
4.4.7 VS_NH_2-PEG2000修饰的磁性纳米材料从牛血清中分离bIgG | 第61-62页 |
4.4.8 VS_NH_2-PEG2000修饰的磁性纳米材料从细胞培养上清中分离单克隆抗体 | 第62-63页 |
4.4.9 VS_NH_2-PEG2000修饰的磁性纳米材料与氨基酸修饰的磁性纳米材料的抗体特异性吸附能力比较 | 第63-64页 |
4.5 小结 | 第64-66页 |
结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
附录 1 | 第70-75页 |
附录 2 | 第75-77页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |