摘要-1 | 第5-6页 |
Abstract-1 | 第6-7页 |
摘要-2 | 第7-8页 |
Abstract-2 | 第8-11页 |
缩略语 | 第11-13页 |
第一章 引言 | 第13-31页 |
1.1 糖尿病概述 | 第13-14页 |
1.2 抗2型糖尿病药物研究进展 | 第14-18页 |
1.3 胰高血糖素样肽-1的生理作用 | 第18-20页 |
1.4 国内外GLP-1类似物的研发现况 | 第20-22页 |
1.5 GLP-1类似物存在的问题 | 第22-24页 |
1.6 多能性干细胞特征及应用 | 第24-26页 |
1.6.1 多能性干细胞基本特征 | 第24页 |
1.6.2 PSCs具有强大的应用潜能 | 第24-26页 |
1.7 多能性干细胞可以分化成特定细胞供医疗应用 | 第26-30页 |
1.8 目前多能性干细胞分化大部分研究都集中在体外分化,采用体内分化的研究相对较少,相关机制也不甚清楚 | 第30-31页 |
第二章 实验材料与方法 | 第31-51页 |
2.1 实验材料与设备 | 第31-34页 |
2.1.1 实验动物 | 第31页 |
2.1.2 仪器设备 | 第31-33页 |
2.1.3 质粒、细胞、菌株 | 第33-34页 |
2.2 试剂配制 | 第34-38页 |
2.2.1 试剂 | 第34-35页 |
2.2.2 溶液配方 | 第35-38页 |
2.3 GLP-1类似物设计相关实验方法 | 第38-44页 |
2.3.0 胰高血糖素样肽-1类似物pGAPZaA载体制备 | 第38页 |
2.3.1 质粒转化 | 第38页 |
2.3.2 质粒DNA的大量提取 | 第38-39页 |
2.3.3 质粒DNA线性化及纯化 | 第39-40页 |
2.3.4 Pichia GS115感受态的制备 | 第40页 |
2.3.5 Pichia GS115感受态电转化 | 第40-41页 |
2.3.6 Pichia GS115表达GLP-1类似物 | 第41-42页 |
2.3.8 GLP-1类似物降糖效果验证 | 第42-44页 |
2.4 畸胎瘤相关实验方法 | 第44-50页 |
2.4.1 MEFs制备与培养 | 第44页 |
2.4.2 饲养层细胞制备 | 第44-45页 |
2.4.3 畸胎瘤细胞培养 | 第45页 |
2.4.4 畸胎瘤细胞中GFP阳性细胞的建系培养 | 第45-46页 |
2.4.5 OCT4-MES,MES-FT, MES-ST, TG PS 1-7,PS-FT,iPS-ST干细胞标记检测 | 第46-47页 |
2.4.6 PSCs体内分化能力鉴定 | 第47页 |
2.4.7 多能性基因及精原细胞标记基因表达分析 | 第47-49页 |
2.4.8 免疫组化染色 | 第49-50页 |
2.5 数据分析 | 第50-51页 |
第三章 实验结果 | 第51-74页 |
第一部分 胰高血糖素样肽-1类似物的设计 | 第51-60页 |
3.1 胰高血糖素样肽-1类似物的设计方案 | 第52-53页 |
3.2 GLP-1类似物酵母转化、表达筛选及纯化 | 第53-55页 |
3.3 GLP-1类似物功能验证 | 第55-58页 |
3.3.1 筛选有降糖效果的GLP-1类似物 | 第55-56页 |
3.3.2 SGP-13将糖功能验证 | 第56-57页 |
3.3.3 SGP-13在体内有效作用时间验证 | 第57-58页 |
3.4 讨论 | 第58-60页 |
第二部分 畸胎瘤内逃脱分化的细胞维持着多能性 | 第60-74页 |
3.5 OCT4-MES及TG iPS 1-7均具多能性 | 第61-65页 |
3.6 从OCT4-MES和TG iPS 1-7形成的畸胎瘤组织中分离出来的OCT4阳性细胞具有自我更新及多能性特点 | 第65-68页 |
3.7 从MES-FT和PS-FT形成的畸胎瘤中分离出来的OCT4阳性细胞仍具有多能性 | 第68-70页 |
3.8 从畸胎瘤分离的OCT4阳性细胞较OCT4-MES,TG iPS 1-7高表达精原细胞标记基因 | 第70-72页 |
3.9 讨论 | 第72-74页 |
第四章 结论 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-85页 |
附录 | 第85-91页 |
作者简介 | 第91页 |