摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
第1章 前言 | 第10-39页 |
1.1 纤毛与纤毛疾病 | 第10-19页 |
1.1.1 纤毛 | 第10-11页 |
1.1.2 纤毛的组织结构和分类 | 第11-13页 |
1.1.3 纤毛的功能与分布 | 第13-16页 |
1.1.4 纤毛相关疾病 | 第16-19页 |
1.1.5 纤毛蛋白质组学研究 | 第19页 |
1.2 纤毛内运输(IFT)与纤毛的组装和解聚 | 第19-25页 |
1.2.1 纤毛内运输(IFT) | 第19-22页 |
1.2.2 纤毛的组装和解聚 | 第22-25页 |
1.3 纤毛的运动 | 第25-35页 |
1.3.1 纤毛的运动形式 | 第25-26页 |
1.3.2 纤毛运动相关结构 | 第26-28页 |
1.3.3 纤毛外动力臂(ODAs) | 第28-32页 |
1.3.4 纤毛内动力臂(IDAs) | 第32-35页 |
1.4 模式生物——衣藻 | 第35-36页 |
1.5 本论文的研究内容和意义 | 第36-38页 |
1.6 论文结构 | 第38-39页 |
第2章 实验材料与方法 | 第39-56页 |
2.1 实验材料 | 第39-41页 |
2.1.1 实验用衣藻藻株 | 第39页 |
2.1.2 实验用菌株 | 第39页 |
2.1.3 实验用质粒载体 | 第39页 |
2.1.4 实验用抗体、试剂和试剂盒 | 第39-41页 |
2.1.5 实验室常用溶液及配制方法 | 第41页 |
2.2 实验仪器 | 第41-42页 |
2.3 实验方法 | 第42-56页 |
2.3.1 衣藻细胞培养 | 第42页 |
2.3.2 衣藻细胞计数 | 第42页 |
2.3.3 衣藻细胞电击转化方法 | 第42-43页 |
2.3.4 衣藻鞭毛突变体的筛选 | 第43页 |
2.3.5 衣藻细胞基因组的提取 | 第43-44页 |
2.3.6 RESDAPCR克隆 | 第44-46页 |
2.3.7 衣藻细胞去鞭毛与鞭毛再生 | 第46页 |
2.3.8 衣藻细胞鞭毛缩短处理 | 第46页 |
2.3.9 衣藻细胞、鞭毛成像及鞭毛长度测量 | 第46-47页 |
2.3.10 衣藻细胞鞭毛蛋白的提取与分离 | 第47页 |
2.3.11 衣藻鞭毛组分的分离 | 第47-48页 |
2.3.12 衣藻细胞免疫荧光 | 第48-49页 |
2.3.13 免疫共沉淀实验 | 第49-50页 |
2.3.14 衣藻细胞透射电镜样品制备与观察 | 第50页 |
2.3.15 衣藻细胞(鞭毛)运动拍摄及速率的计算 | 第50-51页 |
2.3.16 细胞壁溶解酶(Lysin)的制备 | 第51页 |
2.3.17 蛋白质免疫印迹与考马斯亮蓝染色 | 第51-53页 |
2.3.18 质粒的提取及核酸片段的纯化 | 第53页 |
2.3.19 大肠杆菌的转化 | 第53页 |
2.3.20 菌落PCR | 第53-54页 |
2.3.21 酵母双杂交 | 第54-56页 |
第3章 FBB18参与纤毛运动的调控 | 第56-79页 |
3.1 本章背景 | 第56-57页 |
3.2 本章结果和分析 | 第57-77页 |
3.2.1 FBB18蛋白在具有运动纤毛的物种中高度保守 | 第57-59页 |
3.2.2 fbb18突变体的分离 | 第59-60页 |
3.2.3 fbb18突变体的性状分析 | 第60-64页 |
3.2.4 FBB18蛋白的定位分析 | 第64-66页 |
3.2.5 fbb18轴丝动力臂减少或丢失 | 第66-68页 |
3.2.6 fbb18纤毛中DHC?发生特异性的缺失 | 第68-69页 |
3.2.7 FBB18参与动力臂在细胞体中的组装 | 第69-72页 |
3.2.8 FBB18调控动力臂组装机制初探 | 第72-77页 |
3.3 本章总结和讨论 | 第77-79页 |
第4章 解聚纤毛的比较蛋白质组学研究 | 第79-95页 |
4.1 本章背景 | 第79-80页 |
4.2 本章结果和分析 | 第80-94页 |
4.2.1 纤毛蛋白样品收集、处理和质谱鉴定 | 第80-83页 |
4.2.2 质谱鉴定结果的比较分析 | 第83-87页 |
4.2.3 质谱鉴定结果的验证分析 | 第87-89页 |
4.2.4 解聚纤毛中纤毛内运输(IFT)的调控 | 第89-91页 |
4.2.5 纤毛解聚相关的候选因子 | 第91-94页 |
4.3 本章总结和讨论 | 第94-95页 |
第5章 总结与展望 | 第95-102页 |
5.1 论文总结与讨论 | 第95-96页 |
5.2 论文展望 | 第96-102页 |
5.2.1 FBB18蛋白与轴丝动力臂的预组装 | 第96-97页 |
5.2.2 FBB18与DHC?和dyneinb的关系 | 第97页 |
5.2.3 组装因子对动力臂预组装的调控分析 | 第97-98页 |
5.2.4 动力臂的运输的探究 | 第98-99页 |
5.2.5 内外动力臂与纤毛轴丝稳定性的思考 | 第99页 |
5.2.6 FBB18在纤毛中的功能的探讨 | 第99-100页 |
5.2.7 C21orf2与纤毛的关系的分析 | 第100页 |
5.2.8 CDC48在纤毛组装和解聚中的功能分析 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-117页 |
致谢 | 第117-119页 |
附录A 常用溶液配制方法 | 第119-124页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第124页 |