中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
英文缩写 | 第9-13页 |
文献综述 | 第13-28页 |
一、 前言 | 第13页 |
二、 转录后基因沉默的研究进展 | 第13-18页 |
三、 病毒诱导基因沉默系统在研究植物基因功能方面的潜在作用 | 第18-23页 |
四、 农杆菌介导的瞬时表达体系在研究植物基因沉默中的作用 | 第23-24页 |
五、 1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基的研究进展 | 第24-25页 |
六、 本研究的背景、目的和意义 | 第25-28页 |
材料与方法 | 第28-40页 |
一、 实验材料 | 第28-31页 |
二、 实验方法 | 第31-40页 |
结果 | 第40-72页 |
一、 农杆菌介导的瞬时表达体系的建立 | 第40-46页 |
1、 农杆菌重组子的鉴定 | 第40-43页 |
2、 基因沉默的表型分析 | 第43-44页 |
2、1 rbcS基因沉默植株的表型分析 | 第43页 |
2、2 PDS基因沉默植株的表型分析 | 第43-44页 |
2、3 GFP基因沉默植株的表型分析 | 第44页 |
3、 农杆菌介导转录后基因沉默瞬时表达体系的优化 | 第44-46页 |
3、1 农杆菌浓度(OD值)与诱导基因沉默的效率 | 第44-45页 |
3、2 植株苗龄与诱导基因沉默的效率 | 第45-46页 |
二、 利用病毒载体诱导转录后基因沉默系统研究烟草(Nicotiana benthamiana)rbcS基因功能 | 第46-72页 |
1、 rbcS基因沉默的转录水平分析 | 第46-52页 |
1、1 rbcS基因沉默的半定量RT-PCR水平分析 | 第46-50页 |
1、2 rbcS基因沉默的Northern杂交分析 | 第50-52页 |
2、 rbcS基因沉默后的免疫印迹检测(Western blot analysis) | 第52-54页 |
2、1 免疫印迹法检测Rubisco大、小亚基多克隆抗体 | 第52-53页 |
2、2 Rubisco大、小亚基免疫印迹检测 | 第53-54页 |
3、 运用HPLC方法,定量分析rbcS基因沉默后的光合色素变化 | 第54-57页 |
4、 rbcS基因沉默植株和非基因沉默植株叶片光合速率对有效光辐射增强和CO_2浓度升高的响应 | 第57-64页 |
5、 CO_2浓度倍增条件下的光呼吸速率,CO_2补偿点和羧化效率((?)Pn/(?)Ci) | 第64-67页 |
6、 方差分析模型中的两因素方差分析和F检验分析 | 第67-72页 |
讨论 | 第72-86页 |
一、 转基因植物的基因沉默(转GFP基因)和非转基因植物的内源基因沉默在启动、传导和维持阶段存在差异 | 第72-73页 |
二、 植株的苗龄与农杆菌的浓度是诱导基因沉默瞬时表达体系的二个关键的影响因素 | 第73-75页 |
三、 农杆菌介导的病毒诱导转录后基因沉默系统中的二个病毒载体——马铃薯X病毒载体和烟草脆裂病毒载体 | 第75-77页 |
四、 用病毒诱导转录后基因沉默系统研究烟草1,5—二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因功能的策略 | 第77-79页 |
五、 烟草1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因的部分功能 | 第79-81页 |
六、 方差分析模型中的两因素方差分析和F检验分析病毒载体作为研究1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因功能媒介的可行性 | 第81-86页 |
结论 | 第86-89页 |
参考文献 | 第89-105页 |
附图 | 第105-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
攻读博士学位期间的主要科研经历 | 第110-111页 |