| 致谢 | 第1-9页 |
| 英文缩写词 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-27页 |
| 1 FoxO1的最新研究进展 | 第14-19页 |
| ·Fox家族命名和分类 | 第14-15页 |
| ·FoxO亚家族蛋白的结构及基因表达 | 第15-16页 |
| ·FoxO转录因子活性的调节 | 第16-17页 |
| ·FoxO1的发现及基本结构 | 第17页 |
| ·FoxO1的生物学功能 | 第17-19页 |
| ·FoxO1参与细胞分化与增殖调节 | 第17-18页 |
| ·FoxO1参与生物代谢中的调节 | 第18-19页 |
| ·FoxO1的其它生物学功能 | 第19页 |
| 2 SOCS3的最新研究进展 | 第19-24页 |
| ·SOCS家族及基本结构特点 | 第19-20页 |
| ·SOCS蛋白在细胞因子信号转导中的作用 | 第20-21页 |
| ·SOCS3基因的发现及结构组成 | 第21页 |
| ·SOCS3的表达及作用机制 | 第21-22页 |
| ·SOCS3的生物学功能 | 第22-24页 |
| ·SOCS3和瘦素信号转导及肥胖的关系 | 第22-23页 |
| ·SOCS3和胰岛素抵抗的关系 | 第23-24页 |
| ·SOCS3的其它生物学作用 | 第24页 |
| 3 RES的最新研究进展 | 第24-26页 |
| ·RES的理化性质 | 第24-25页 |
| ·RES的生物学功能 | 第25-26页 |
| 4 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 猪脂肪组织FoxO1、SOCS3及内标18S rRNA基因的克隆 | 第27-40页 |
| 1 克隆策略 | 第27-28页 |
| 2 试验材料 | 第28-30页 |
| ·动物材料 | 第28页 |
| ·菌种与载体 | 第28页 |
| ·试剂与工具酶 | 第28页 |
| ·引物 | 第28页 |
| ·培养基及主要化学试剂的配制 | 第28-30页 |
| 3 试验方法 | 第30-36页 |
| ·猪脂肪组织基因组总RNA的提取 | 第30页 |
| ·反转录 | 第30-31页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第31-32页 |
| ·PCR产物电泳及割胶回收 | 第32-33页 |
| ·PCR回收产物与pGEM-T easy Vector连接 | 第33页 |
| ·感受态细胞的制备与目的DNA的转化 | 第33-34页 |
| ·重组克隆筛选和重组质粒的提取与鉴定 | 第34-36页 |
| ·重组DNA核苷酸序列测定分析 | 第36页 |
| 4 试验结果 | 第36-39页 |
| ·FoxO1、SOCS3和18S rRNA基因RT-PCR产物电泳结果 | 第36-37页 |
| ·质粒DNA PCR检验结果 | 第37页 |
| ·FoxO1、SOCS3和18S rRNA基因测序结果 | 第37-39页 |
| 5 讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 猪FoxO1和SOCS3基因在不同组织的表达差异研究 | 第40-49页 |
| 1 试验材料 | 第40页 |
| ·试验动物 | 第40页 |
| ·试验日粮 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| 2 试验方法 | 第40-42页 |
| ·屠宰试验及组织取样 | 第40页 |
| ·RNA的提取及反转录 | 第40页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第40-42页 |
| ·引物的选择和退火温度(Ta)的确定 | 第40-41页 |
| ·循环数的确定 | 第41-42页 |
| ·最佳Mg~(2+)浓度的确定 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| ·半定量RT-PCR分析及数据处理 | 第42页 |
| 3 试验结果 | 第42-47页 |
| ·循环数对FoxO1、SOCS3和18S rRNA基因表达的影响 | 第42-44页 |
| ·FoxO1和SOCS3基因最佳Mg~(2+)浓度的确定 | 第44-45页 |
| ·猪FoxO1和SOCS3基因在不同组织中的表达差异 | 第45-47页 |
| ·猪FoxO1基因在不同组织中的表达差异 | 第45-46页 |
| ·猪SOCS3基因在不同组织中的表达差异 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| ·RT-PCR方法的构建 | 第47-48页 |
| ·猪FoxO1基因在不同组织中的表达差异 | 第48页 |
| ·猪SOCS3基因在不同组织中的表达差异 | 第48-49页 |
| 第四章 猪FoxO1和SOCS3基因在不同生长阶段的表达规律及与体脂沉积关系的研究 | 第49-58页 |
| 1 试验材料 | 第49页 |
| ·试验动物 | 第49页 |
| ·试验日粮及试剂 | 第49页 |
| 2 试验方法 | 第49页 |
| ·屠宰试验 | 第49页 |
| ·反转录及RT-PCR反应 | 第49页 |
| 3 试验结果 | 第49-56页 |
| ·不同生长阶段猪脂肪率的变化规律 | 第49-50页 |
| ·猪脂肪组织中FoxO1基因在不同生长阶段的表达规律及其与体脂沉积的关系 | 第50-53页 |
| ·猪皮下脂肪组织中FoxO1基因在不同生长阶段的表达规律 | 第50-51页 |
| ·猪腹部脂肪组织中FoxO1基因在不同生长阶段的表达规律 | 第51页 |
| ·猪肠系膜脂肪组织中FoxO1基因在不同生长阶段的表达规律 | 第51-52页 |
| ·猪脂肪组织中FoxO1基因在不同生长阶段的表达水平与体脂沉积的关系 | 第52-53页 |
| ·猪脂肪组织中SOCS3基因在不同生长阶段的表达规律及其与体脂沉积的关系 | 第53-56页 |
| ·猪皮下脂肪组织中SOCS3基因在不同生长阶段的表达规律 | 第53-54页 |
| ·猪腹部脂肪组织中SOCS3基因在不同生长阶段的表达规律 | 第54页 |
| ·猪肠系膜脂肪组织中SOCS3基因在不同生长阶段的表达规律 | 第54-55页 |
| ·猪脂肪组织中SOCS3基因在不同生长阶段的表达水平与体脂沉积的关系 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| ·猪脂肪组织中FoxO1基因在不同生长阶段的表达规律及与体脂沉积关系 | 第56-57页 |
| ·猪脂肪组织中SOCS3基因在不同生长阶段的表达规律及与体脂沉积关系 | 第57-58页 |
| 第五章 RES对猪前体脂肪细胞FoxO1和SOCS3基因表达调控的影响 | 第58-71页 |
| 1 试验材料 | 第58-59页 |
| ·试验动物 | 第58页 |
| ·试验仪器及器械 | 第58页 |
| ·试剂及主要溶液配制 | 第58-59页 |
| 2 试验方法 | 第59-61页 |
| ·猪前体脂肪细胞的获取 | 第59页 |
| ·细胞计数 | 第59页 |
| ·细胞接种 | 第59页 |
| ·试验设计 | 第59页 |
| ·检测指标 | 第59-61页 |
| ·脂肪细胞增殖情况的检测 | 第59-60页 |
| ·脂肪细胞分化形态学观察及细胞内的脂肪含量检测 | 第60页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞FoxO1和SOCS3基因表达调控的影响 | 第60-61页 |
| ·数据统计分析 | 第61页 |
| 3 试验结果 | 第61-67页 |
| ·原代分离培养猪前体脂肪细胞的形态学观察 | 第61-62页 |
| ·原代培养猪前体脂肪细胞的增殖情况 | 第62页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞增殖的影响 | 第62-63页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第63-64页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞FoxO1基因表达调控的影响 | 第64-65页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞SOCS3基因表达调控的影响 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-71页 |
| ·适合本试验脂肪细胞的培养条件 | 第67页 |
| ·试验方法的选择 | 第67页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞增殖分化的影响 | 第67-68页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞FoxO1基因表达调控的影响 | 第68-69页 |
| ·RES对猪前体脂肪细胞SOCS3基因表达调控的影响 | 第69-71页 |
| 小结 | 第71-72页 |
| 创新点 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
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