致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1. 文献综述 | 第9-12页 |
·烟碱的生物合成途径 | 第9-10页 |
·NAC 转录因子概况 | 第10页 |
·植物 miRNA 的功能 | 第10-11页 |
·茉莉酸对烟碱生物合成的影响 | 第11页 |
·生长素对烟碱生物合成的调控 | 第11-12页 |
2. 引言 | 第12-13页 |
3. 材料与方法 | 第13-22页 |
·材料、试剂、仪器与材料的处理取材方法 | 第13页 |
·材料 | 第13页 |
·试剂 | 第13页 |
·实验仪器 | 第13页 |
·处理与取材方法 | 第13页 |
·大田材料取材 | 第13页 |
·实验室材料取材 | 第13页 |
·实验方法 | 第13-22页 |
·总 RNA 的提取 | 第13页 |
·mRNA 的反转录 | 第13页 |
·小片段 RNAs 的沉降、检测和反转录 | 第13-15页 |
·小片段 RNAs 的沉降 | 第14页 |
·小片段 RNAs 检测 | 第14页 |
·miRNA 的反转录 | 第14-15页 |
·实时荧光定量 PCR 验证 microRNA 测序结果 | 第15-16页 |
·RT-PCR 检测 NtNAC-R1 和 PMT 基因表达 | 第16页 |
·Northern blot 检测 NtNAC-R1 和 PMT 基因表达 | 第16-20页 |
·变形琼脂糖凝胶电泳分析 RNA | 第16-17页 |
·转膜和 RNA 固定 | 第17-18页 |
·探针制备 | 第18页 |
·模板 DNA 扩增和纯化 | 第18页 |
·探针标记 | 第18页 |
·检测探针效率 | 第18-19页 |
·预杂交、杂交和显色 | 第19-20页 |
·ELISA 检测吲哚乙酸(IAA)含量 | 第20页 |
·吲哚乙酸的提取 | 第20页 |
·洗板 | 第20页 |
·吲哚乙酸检测 | 第20页 |
·吲哚乙酸含量计算 | 第20页 |
·气象色谱法检测烟碱含量 | 第20-21页 |
·抽样和前处理 | 第21页 |
·检测分析方法 | 第21页 |
·根系表型指标检测分析 | 第21-22页 |
4. 结果与分析 | 第22-36页 |
·RNA 电泳检测 | 第22-23页 |
·总 RNA 质量检测 | 第22页 |
·小片段 RNAs 质量检测 | 第22-23页 |
·烟株打顶前后根尖组织中 MIRNA 的差异表达变化 | 第23-28页 |
·差异表达 miRNA 的 qRT-PCR 曲线分析 | 第23-25页 |
·差异表达 miRNA 的 qRT-PCR 验证 | 第25-27页 |
·qRT-PCR 产物电泳检测 | 第27-28页 |
·RT-PCR 检测不同处理根尖组织 NtNAC-R1 和 PMT 基因表达变化 | 第28页 |
·Northern blot 检测不同处理根尖组织 NtNAC-R1 和 PMT 基因表达变化 | 第28-31页 |
·探针制备和效价检测结果 | 第28-30页 |
·模板 DNA 扩增 | 第28-29页 |
·探针效价检测结果 | 第29-30页 |
·Northern 杂交结果 | 第30-31页 |
·ELISA 检测不同处理根尖组织中 IAA 含量变化 | 第31-32页 |
·不同处理烟株根尖组织中烟碱含量变化 | 第32页 |
·不同处理烟株根系表型分析 | 第32-36页 |
5. 结论与讨论 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
Abstract | 第42-43页 |