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从甘油途径生物法合成P3HP和1,3-PDO
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 绪论第10-19页
   ·聚羟基脂肪酸酯(PHA)的单体组成、分类及特点第11页
   ·聚羟基脂肪酸酯的合成第11-15页
     ·野生型菌株中的聚羟基脂肪酸酯的合成第11-13页
       ·乙酰辅酶A合成聚羟基脂肪酸酯第12页
       ·脂肪酸的β-氧化途径合成聚羟基脂肪酸酯第12页
       ·脂肪酸从头合成途径合成聚羟基脂肪酸酯第12-13页
     ·重组大肠杆菌中聚羟基脂肪酸酯的合成第13-15页
       ·聚羟基丁酸酯(PHB)的合成第13页
       ·含有3-羟基戊酸(3HV)聚合物的合成第13-14页
       ·含有4-羟基丁酸(4HB)聚合物的合成第14页
       ·含有3-羟基丙酸(3HP)聚合物的合成第14页
       ·含有中长链脂肪酸(HA)聚合物的合成第14-15页
     ·转基因植物中聚羟基脂肪酸酯的合成第15页
   ·聚羟基脂肪酸酯的应用第15-16页
   ·结论与展望第16-17页
   ·立题意义和本论文的研究内容第17-19页
第二章 以甘油为底物发酵生产聚3-羟基丙酸第19-39页
   ·实验材料和方法第19-30页
     ·菌株和质粒第19-20页
     ·试剂和仪器第20-22页
       ·试剂第20-21页
       ·仪器第21页
       ·培养基第21-22页
     ·实验方法第22-30页
       ·聚3-羟基丙酸合成相关基因的克隆第22-23页
         ·基因稀有密码子优化第22页
         ·基因PCR扩增第22-23页
         ·PCR产物切胶回收第23页
       ·pYP01和pYP02载体构建第23-27页
         ·酶切第23页
         ·酶切片段纯化第23-24页
         ·连接反应第24页
         ·大肠杆菌感受态细胞制备第24-25页
         ·转化第25页
         ·质粒提取第25-26页
         ·重组质粒鉴定第26-27页
       ·甘油脱水酶及其激活因子功能鉴定第27-29页
         ·蛋白表达及样品制备第27页
         ·蛋白的SDS-PAGE电泳检测第27-28页
         ·蛋白浓度测定第28页
         ·酶活测定第28-29页
       ·工程菌的的摇瓶发酵第29页
       ·发酵产物的萃取第29-30页
     ·结果与讨论第30-38页
     ·聚3-羟基丙酸合成相关基因的克隆第30页
     ·重组质粒pYP01的鉴定第30-31页
     ·重组质粒pYP02的鉴定第31-33页
     ·P3HP合成基因相关基因酶活检测第33-34页
     ·重组大肠杆菌利用甘油途径合成P3HP第34-38页
       ·P3HP在三种宿主菌中的生产第35-36页
       ·不同培养基对P3HP产量的影响第36-37页
       ·不同诱导剂浓度对P3HP产量的影响第37页
       ·不同氮源对P3HP产量的影响第37-38页
   ·本章小结第38-39页
第三章 以甘油为底物发酵生产P3HP和1,3-丙二醇第39-54页
   ·实验材料和方法第40-45页
     ·菌株和质粒第40页
     ·试剂和仪器第40-41页
     ·试验方法第41-44页
       ·P3HP合成相关基因的克隆第41-42页
         ·基因PCR扩增第41-42页
       ·pYP04,pYP06载体构建第42-43页
         ·酶切第42页
         ·酶切片段纯化第42页
         ·连接反应第42页
         ·重组质粒鉴定第42-43页
       ·同源重组突变株的构建第43-44页
         ·第一次重组第43页
         ·第二次重组第43-44页
       ·P3HP生产第44页
       ·发酵条件优化第44页
     ·分析方法第44-45页
       ·菌体生物量的测定第44页
       ·P3HP含量的测定第44页
       ·1,3-PDO含量的测定第44-45页
   ·结果和分析第45-52页
     ·1,3-PDO合成相关基因的克隆第45页
     ·重组质粒pYP04的鉴定第45-46页
     ·同源重组相关基因的克隆第46-48页
       ·重组质粒pYP06相关的基因克隆第46-47页
       ·重组质粒pYP06的鉴定第47页
       ·重组质粒pYP07的鉴定第47-48页
     ·同源重组突变株的筛选第48-50页
     ·同源重组突变株提高P3HP产量第50页
     ·质粒稳定性检测第50页
     ·发酵条件的优化第50-52页
       ·碳源第50-51页
       ·氮源第51-52页
       ·IPTG浓度第52页
   ·结论第52-54页
第四章 结论与展望第54-56页
   ·主要结论第54页
   ·P3HP的研究展望第54-56页
参考文献第56-61页
致谢第61页

 
 
论文编号BS2265049,这篇论文共61
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