摘要 | 第2-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
引言 | 第10-13页 |
实验材料 | 第13-16页 |
1.1 实验细胞 | 第13页 |
1.2 材料与试剂 | 第13-14页 |
1.3 实验仪器 | 第14页 |
1.4 主要实验试剂的配制 | 第14-16页 |
实验方法 | 第16-25页 |
2.1 神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的培养 | 第16-18页 |
2.1.1 细胞复苏 | 第16页 |
2.1.2 细胞培养 | 第16页 |
2.1.3 细胞传代 | 第16-17页 |
2.1.4 细胞冻存 | 第17页 |
2.1.5 细胞计数 | 第17-18页 |
2.1.6 SH-SY5Y细胞培养过程中的注意事项 | 第18页 |
2.2 氧糖剥夺再灌注(OGD/RP)损伤模型的建立 | 第18页 |
2.3 实验分组 | 第18-19页 |
2.4 细胞活性检测(CCK-8 试剂盒法) | 第19页 |
2.4.1 实验原理 | 第19页 |
2.4.2 实验步骤 | 第19页 |
2.5 线粒体膜电位(MMP)检测(JC-1 试剂盒法) | 第19-20页 |
2.5.1 实验原理 | 第19-20页 |
2.5.2 实验步骤 | 第20页 |
2.6 透射电镜(TEM)检测细胞超显微结构 | 第20-21页 |
2.7 线粒体自噬相关蛋白P62、TOM20、BECLIN-1 的表达水平的检测 | 第21-24页 |
2.7.1 蛋白质提取 | 第21-22页 |
2.7.2 蛋白质浓度测定 | 第22页 |
2.7.3 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第22-24页 |
2.8 统计学处理 | 第24-25页 |
实验结果 | 第25-32页 |
3.1 光镜下SH-SY5Y细胞形态学观察 | 第25-26页 |
3.2 细胞活性检测 | 第26-27页 |
3.3 电镜下各组细胞线粒体超微结构改变 | 第27-28页 |
3.4 线粒体膜电位(MMP)的检测 | 第28-29页 |
3.5 线粒体自噬相关蛋白的表达 | 第29-32页 |
讨论 | 第32-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-42页 |
综述 | 第42-69页 |
综述参考文献 | 第61-69页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第69-70页 |
附录 | 第70-83页 |
致谢 | 第83-84页 |