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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--孕酮对原代培养小胶质细胞及BV-2小胶质瘤细胞增殖效应的影响
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孕酮对原代培养小胶质细胞及BV-2小胶质瘤细胞增殖效应的影响
 
     论文目录
 
中文摘要第3-4页
Abstract第4页
缩略词表第5-10页
第一章 前言第10-24页
    1.1 脑中风疾病的介绍第10-11页
        1.1.1 脑中风对人类健康的严重威胁第10-11页
        1.1.2 脑中风的分类及特点第11页
    1.2 小胶质细胞的研究情况第11-17页
        1.2.1 小胶质细胞的组织形态学特征及其重要的表面标记分子第11-13页
        1.2.2 小胶质细胞的激活第13-14页
        1.2.3 小胶质细胞在生理状态下和神经病理状态下的主要功能第14-15页
        1.2.4 小胶质细胞的研究方法第15-16页
        1.2.5 小质细胞的体外培养的介绍和体外氧糖剥夺模型的应用的介绍第16-17页
    1.3 细胞凋亡第17-19页
        1.3.1 细胞凋亡的现象及其信号通路简介第17-18页
        1.3.2 细胞凋亡的检测方法第18-19页
    1.4 细胞的增殖和细胞的周期的简介第19-21页
        1.4.1 细胞的增殖第19-20页
        1.4.2 细胞的周期第20-21页
    1.5 孕酮的研究进展第21-22页
    1.6 本实验研究的目的和意义第22-24页
第二章 材料和方法第24-39页
    2.1 实验材料第24页
        2.1.1 用于获取原代小胶质细胞的实验动物来源介绍第24页
        2.1.2 BV-2小胶质瘤细胞的来源介绍第24页
    2.2 主要试剂第24-25页
    2.3 主要仪器和耗材第25-26页
    2.4 主要溶液配制第26-29页
        2.4.1 DMEM高糖培养基的配制第26页
        2.4.2 DMEM无糖培养基的配制第26页
        2.4.3 Hanks缓冲液的配制第26-27页
        2.4.4 EDTA的配制第27页
        2.4.5 胰酶溶液的配制第27页
        2.4.6 EBSS缓冲液的配制第27页
        2.4.7 脱氧核糖核酸酶Ⅰ的工作液的配制(DNase I的溶液)第27页
        2.4.8 PBS缓冲液的配制第27-28页
        2.4.9 PBS-T的配制第28页
        2.4.10 细胞冻存液的配制第28页
        2.4.11 多聚赖氨酸溶液的配制第28页
        2.4.12 孕酮的配制第28页
        2.4.13 Hoechst 33258染色液的配制第28页
        2.4.14 PI染色液的配制第28-29页
        2.4.15 RNase-A溶液的配制第29页
        2.4.16 MTT溶液的配制第29页
        2.4.17 BrdU溶液的配制第29页
    2.5 实验方法第29-39页
        2.5.1 胶质细胞的原代混合培养第29-31页
        2.5.2 原代小胶质细胞的纯化培养第31页
        2.5.3 BV-2小胶质瘤细胞的培养第31-32页
        2.5.4 氧糖剥夺模型的建立第32-33页
        2.5.5 孕酮处理各组细胞第33页
        2.5.6 Hoechst 33258染色检测细胞的凋亡第33-34页
        2.5.7 免疫荧光染色检测BV-2细胞的Iba-1的表达情况第34页
        2.5.8 MTT法检测细胞活力第34-35页
        2.5.9 流式细胞术检测BV-2小胶质瘤细胞的细胞周期第35-36页
        2.5.10 Annexin V-FITC/PI双染法检测BV-2细胞凋亡第36-37页
        2.5.11 BrdU掺入法检测BV-2小胶质瘤细胞的增殖第37-38页
        2.5.12 实验数据统计分析第38-39页
第三章 实验结果第39-61页
    3.1 原代小胶质细胞经OGD处理后形态学变化和细胞数目变化第39-41页
        3.1.1 形态学变化第39-41页
        3.1.2 细胞数目变化第41页
    3.2 原代小胶质细胞经OGD处理或OGD联合孕酮处理后形态学变化和细胞数目变化第41-45页
        3.2.1 形态学变化第42-44页
        3.2.2 细胞数目变化第44-45页
    3.3 Hoechst 33258染色检测原代小胶质细胞的凋亡第45-48页
        3.3.1 凋亡形态学变化第45-47页
        3.3.2 原代小胶质细胞经OGD处理后凋亡率变化第47页
        3.3.3 原代小胶质细胞经OGD联合孕酮处理后凋亡率变化第47-48页
    3.4 免疫荧光技术检测BV-2小胶质瘤细胞Iba-1表达第48-49页
    3.5 MTT法绘制BV-2小胶质瘤细胞生长曲线第49-50页
    3.6 MTT法检测不同OGD处理时间对BV-2细胞活力的影响第50-51页
    3.7 不同浓度孕酮对OGD处理6小时后BV-2细胞活力的影响第51-52页
    3.8 相差显微术观察BV-2细胞经OGD和/或孕酮处理后形态学变化第52-53页
    3.9 流式细胞术分析BV-2细胞经OGD和/或孕酮处理后细胞周期变化第53-56页
    3.10 Annexin V-FITC/PI法检测BV-2细胞经OGD和/或孕酮处理后凋亡情况第56-58页
    3.11 BrdU掺入法检测BV-2细胞经OGD和/或孕酮处理后细胞增殖第58-61页
第四章 讨论第61-65页
    4.1 小胶质细胞对神经类疾病的治疗作用的初步讨论第61页
    4.2 孕酮对缺血性脑中风的相关治疗的探讨第61-62页
    4.3 原代培养的小胶质细胞和BV-2小胶质瘤细胞的增殖第62-63页
    4.4 实验技术讨论及优化第63-64页
    4.5 通过体内模型的新方法研究小胶质细胞第64-65页
第五章 结论第65-66页
    5.1 主要结论第65页
    5.2 研究展望第65-66页
参考文献第66-74页
在学期间的研究成果第74-75页
致谢第75页

 
 
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