中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 不同类型北京鸭简介 | 第12页 |
1.2 脂肪代谢相关基因研究 | 第12-18页 |
1.2.1 FABPs概述 | 第12-14页 |
1.2.1.1 FABPs的类型、分布、结构 | 第13页 |
1.2.1.2 FABPs的功能 | 第13-14页 |
1.2.2 A-FABP基因研究进展 | 第14-18页 |
1.2.2.1 A-FABP基因概况 | 第14-15页 |
1.2.2.2 A-FABP的多态性研究 | 第15-16页 |
1.2.2.3 A-FABP基因表达的研究 | 第16-17页 |
1.2.2.4 A-FABP基因的功能 | 第17-18页 |
1.3 与脂肪代谢相关的基因 | 第18-20页 |
1.3.1 PPARγ基因 | 第18-19页 |
1.3.2 LPL基因 | 第19-20页 |
1.3.3 FAS基因 | 第20页 |
1.4 表达系统 | 第20-21页 |
1.4.1 原核表达系统 | 第20-21页 |
1.4.2 真核表达系统 | 第21页 |
1.5 研究目的意义 | 第21-22页 |
第二章 北京鸭A-FABP基因时空表达特征 | 第22-34页 |
2.1 材料与方法 | 第22-26页 |
2.1.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1.1 试验动物 | 第22页 |
2.1.1.2 屠宰测定 | 第22页 |
2.1.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.1.4 主要试剂 | 第23页 |
2.1.2 RNA提取及电泳检测 | 第23-24页 |
2.1.3 cDNA合成 | 第24页 |
2.1.4 引物设计 | 第24-25页 |
2.1.5 荧光定量引物普通PCR电泳检测 | 第25页 |
2.1.6 荧光定量引物扩增效率检测 | 第25-26页 |
2.1.7 脂肪型、瘦肉型北京鸭A-FABP基因各组织mRNA表达量检测 | 第26页 |
2.1.8 数据处理与分析 | 第26页 |
2.2 结果 | 第26-31页 |
2.2.1 6周龄脂肪型、瘦肉型北京鸭生产性能对比 | 第26-27页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第27-28页 |
2.2.3 荧光定量引物普通PCR电泳检测 | 第28页 |
2.2.4 荧光定量PCR引物扩增效率检测以及溶解曲线 | 第28-29页 |
2.2.5 A-FABP基因在两种类型北京鸭不同组织中表达情况 | 第29-31页 |
2.2.6 A-FABP基因在两种类型北京鸭不同时期脂肪组织中表达情况 | 第31页 |
2.3 讨论 | 第31-34页 |
2.3.1 6周龄脂肪型、瘦肉型北京鸭生产性能对比 | 第31-32页 |
2.3.2 北京鸭不同组织中A-FABP基因mRNA表达量 | 第32页 |
2.3.3 两种类型北京鸭A-FABP基因脂肪组织中mRNA表达差异 | 第32-33页 |
2.3.4 脂肪型、瘦肉型北京鸭不同时期A-FABP基因mRNA表达量 | 第33-34页 |
第三章 北京鸭A-FABP基因表达效应研究 | 第34-47页 |
3.1 实验材料 | 第34-35页 |
3.1.1 试验动物组织 | 第34页 |
3.1.2 主要试剂 | 第34页 |
3.1.3 主要溶液配方 | 第34页 |
3.1.4 pIRES2-ZsGreen1载体 | 第34-35页 |
3.2 实验方法 | 第35页 |
3.2.1 引物的设计与合成 | 第35页 |
3.2.2 A-FABP基因CDS区序列克隆 | 第35页 |
3.3 PCR产物胶回收 | 第35-40页 |
3.3.1 真核表达载体构建及鉴定 | 第36-38页 |
3.3.1.1 双酶切 | 第36页 |
3.3.1.2 连接 | 第36-37页 |
3.3.1.3 感受态细胞的制备 | 第37页 |
3.3.1.4 转化 | 第37-38页 |
3.3.1.5 阳性克隆鉴定 | 第38页 |
3.3.2 阳性克隆菌液的质粒提取 | 第38-39页 |
3.3.3 pIRES2-ZsGreenl-A-FABP表达质粒注射 | 第39页 |
3.3.4 荧光显微镜检测A-FABP基因表达 | 第39页 |
3.3.5 qPCR检测皮脂中A-FABP及其相关基因表达情况 | 第39-40页 |
3.3.6 数据处理与分析 | 第40页 |
3.4 结果 | 第40-44页 |
3.4.1 A-FABP基因CDS区克隆 | 第40-41页 |
3.4.2 pIRES2-ZsGreenl-A-FABP真核表达载体构建 | 第41-42页 |
3.4.3 pIRES2-ZsGreenl-A-FABP表达载体在北京鸭皮脂中表达研究 | 第42-44页 |
3.4.3.1 荧光检测 | 第42页 |
3.4.3.2 荧光定量引物普通PCR电泳检测 | 第42-43页 |
3.4.3.3 q PCR检测皮脂中A-FABP及其相关基因表达情况 | 第43-44页 |
3.5 讨论 | 第44-47页 |
全文结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
附录 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
攻读学位期间发表学术论文 | 第56-57页 |