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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--一种固有无序蛋白—大豆PM1及其N/C端蛋白与DNA相互作用的研究
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一种固有无序蛋白—大豆PM1及其N/C端蛋白与DNA相互作用的研究
 
     论文目录
 
摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第1章 前言第10-19页
    1.1 固有无序蛋白简介第10-12页
        1.1.1 固有无序蛋白的序列和结构特点第10页
        1.1.2 固有无序蛋白可参与生物体内的许多生理代谢活动第10-12页
    1.2 LEA蛋白是一类与植物逆境保护作用相关的重要蛋白质第12-16页
        1.2.1 LEA蛋白在自然界中的分布第12-13页
        1.2.2 LEA蛋白的分类第13-15页
        1.2.3 LEA蛋白的几种主要保护功能第15-16页
    1.3 LEA蛋白与DNA互作的相关性研究第16-17页
    1.4 大豆PM1蛋白的结构与功能第17-18页
    1.5 本实验的目的与意义第18-19页
第2章 材料与方法第19-31页
    2.1 材料第19-21页
        2.1.1 菌株和载体第19页
        2.1.2 主要试剂第19-20页
        2.1.3 主要设备与仪器第20-21页
    2.2 主要试剂配制第21-23页
        2.2.1 培养基的配制第21页
        2.2.2 表达纯化蛋白所用试剂第21-22页
        2.2.3 电泳所需试剂第22-23页
    2.3 方法第23-31页
        2.3.1 大豆PM1蛋白序列分析第23页
        2.3.2 重组菌PM1蛋白及其N端和C端蛋白的诱导表达第23页
        2.3.3 亲和层析分离、纯化PM1蛋白及PM1-N和PM1-C蛋白第23-24页
        2.3.4 BCA蛋白定量法检测蛋白浓度第24页
        2.3.5 PM1蛋白、PM1-N和PM1-C融合蛋白中His标签的去除第24页
        2.3.6 SDS-PAGE电泳第24-25页
        2.3.7 DNA的准备第25-28页
        2.3.8 紫外分光光度法测DNA浓度第28页
        2.3.9 凝胶阻滞实验(EMSA)第28-29页
        2.3.10 滤膜结合实验(FilterBindingAssay)第29-30页
        2.3.11 圆二色谱法(CD)第30-31页
第3章 结果第31-54页
    3.1 PM1蛋白的序列特性第31-32页
    3.2 PM1蛋白无序程度预测第32-33页
    3.3 PM1蛋白二级结构的预测第33-34页
    3.4 PM1蛋白及其PM1-N和PM1-C蛋白的表达纯化及SDS-PAGE电泳第34-35页
    3.5 凝胶阻滞实验,检测PM1蛋白与不同DNA的相互作用第35-39页
        3.5.1 检测PM1蛋白与不同长度基因的相互作用第35-37页
        3.5.2 检测PM1蛋白与环形/线形质粒的相互作用第37-39页
    3.6 凝胶阻滞实验,检测6种离子对PM1蛋白与DNA互作的影响第39-43页
        3.6.1 检测6种离子对PM1蛋白与基因互作的影响第39-40页
        3.6.2 检测6种离子对PM1蛋白与环形质粒互作的影响第40-42页
        3.6.3 检测6种离子对PM1蛋白与线形质粒DNA互作的影响第42-43页
    3.7 滤膜结合实验,检测PM1蛋白及其N/C端蛋白与离子和DNA的互作,及离子对其互作的影响第43-48页
        3.7.1 PM1蛋白+金属离子+DNA的相互作用及离子对其互作的影响第43-44页
        3.7.2 PM1-N蛋白+金属离子+DNA的互作及离子对其互作的影响第44-46页
        3.7.3 PM1-C蛋白+金属离子+DNA的互作及离子对其互作的影响第46-48页
    3.8 滤膜结合实验,检测PM1/PM1-N/PM1-C蛋白与DNA和金属离子互作及离子对其互作的影响第48-52页
        3.8.1 PM1蛋白+DNA+金属离子的相互作用及离子对其互作的影响第48-49页
        3.8.2 PM1-N蛋白+DNA+金属离子的相互作用及离子对其互作的影响第49-51页
        3.8.3 PM1-C蛋白+DNA+金属离子的相互作用及离子对其互作的影响第51-52页
    3.9 DNA对PM1/PM1-N/PM1-C蛋白二级结构的影响第52-54页
第4章 讨论第54-56页
    4.1 大豆PM1蛋白与DNA分子的结合属于非特异性结合第54页
    4.2 离子Ni~(2+)和Cu~(2+)可影响PM1蛋白与DNA的结合第54-56页
第5章 结论第56-57页
参考文献第57-64页
附录第64-77页
致谢第77页

 
 
论文编号BS4141749,这篇论文共77
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