摘要 | 第9-13页 |
ABSTRACT | 第13-17页 |
专业词汇缩写表 | 第18-20页 |
第一章 绪论 | 第20-52页 |
1.1 内源性代谢物概况 | 第20-25页 |
1.1.1 内源性代谢物特点 | 第21页 |
1.1.2 代谢物研究策略 | 第21-23页 |
1.1.3 内源性代谢物研究平台 | 第23-24页 |
1.1.4 数据处理及统计学方法 | 第24-25页 |
1.2 基于LC-MS/MS的靶向代谢组学研究进展 | 第25-34页 |
1.2.1 高效液相色谱技术 | 第25页 |
1.2.2 色谱柱技术 | 第25-27页 |
1.2.3 样品收集及制备技术 | 第27-33页 |
1.2.4 靶向代谢组学数据处理 | 第33-34页 |
1.3 内源性代谢物在疾病中的研究进展 | 第34-39页 |
1.3.1 癌症与代谢 | 第34-36页 |
1.3.2 高血压与代谢 | 第36-39页 |
1.4 课题研究意义及主要内容 | 第39-42页 |
参考文献 | 第42-52页 |
第二章 基于石墨烯色谱技术的细胞中20种内源性核苷及核苷酸的精准靶标代谢组学平台构建 | 第52-92页 |
2.1 前言 | 第52-54页 |
2.2 实验材料 | 第54-55页 |
2.2.1 标准品和试剂 | 第54-55页 |
2.2.2 实验仪器 | 第55页 |
2.3 实验方法 | 第55-61页 |
2.3.1 储备液及标准曲线配制 | 第55-56页 |
2.3.2 空白基质制备 | 第56页 |
2.3.3 LC-MS/MS定量分析条件 | 第56-58页 |
2.3.3.1 液相分离色谱条件 | 第56-57页 |
2.3.3.2 待测物及内标质谱参数 | 第57-58页 |
2.3.4细胞培养与增殖实验 | 第58页 |
2.3.5 细胞样品前处理 | 第58-59页 |
2.3.6 靶向代谢组学平台性能评价 | 第59-61页 |
2.3.6.1 标准曲线、线性范围、检出限及定量限 | 第59页 |
2.3.6.2 批内及批间准确度和精密度 | 第59-60页 |
2.3.6.3 基质效应及回收率 | 第60页 |
2.3.6.4 上清液的稳定性 | 第60-61页 |
2.4 结果与讨论 | 第61-77页 |
2.4.1 MS参数优化 | 第61-63页 |
2.4.2 液相条件的优化 | 第63-77页 |
2.4.2.1 色谱柱选择 | 第63-66页 |
2.4.2.2 流动相中缓冲盐种类、缓冲盐浓度以及p H值优化 | 第66-69页 |
2.4.2.3 色谱柱温度优化 | 第69-70页 |
2.4.2.4 核苷及核苷酸的色谱分离 | 第70-73页 |
2.4.2.5 样品前处理优化 | 第73-77页 |
2.5 靶向代谢组学性能评价结果 | 第77-86页 |
2.5.1 标准曲线参数 | 第77-79页 |
2.5.2 批内及批间精密度、准确度和保留时间稳定性 | 第79-83页 |
2.5.3 基质效应、回收率及样品稳定性 | 第83-86页 |
2.6 乳腺癌细胞HCC1806中20 种核苷酸类物质测定 | 第86-88页 |
2.7 结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-92页 |
第三章 基于精准靶向细胞代谢组学的癌细胞中核苷及核苷酸代谢研究 | 第92-110页 |
3.1 前言 | 第92-94页 |
3.2 实验材料 | 第94-95页 |
3.2.1 标准品和试剂 | 第94-95页 |
3.2.2 实验仪器 | 第95页 |
3.3 实验方法 | 第95-98页 |
3.3.1 细胞培养与增殖 | 第95-96页 |
3.3.2 细胞收集与样品前处理 | 第96页 |
3.3.3 LC-MS/MS定量分析条件 | 第96-97页 |
3.3.4 数据处理及统计学方法 | 第97-98页 |
3.4 结果与讨论 | 第98-105页 |
3.4.1 定量分析评价及色谱图 | 第98-99页 |
3.4.2 三种癌细胞中待测物浓度 | 第99-102页 |
3.4.3 单维统计分析 | 第102页 |
3.4.4 多维统计分析 | 第102-104页 |
3.4.5 代谢差异物及代谢通路研究 | 第104-105页 |
3.5 结论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-110页 |
第四章 基于HILIC技术的细胞内40 种内源性氨基酸及衍生物的靶向代谢组学平台构建. | 第110-150页 |
4.1 前言 | 第110-112页 |
4.2 实验材料 | 第112-115页 |
4.2.1 标准品和试剂 | 第112-114页 |
4.2.2 实验仪器 | 第114-115页 |
4.3 实验方法 | 第115-123页 |
4.3.1 储备液及标准曲线配制 | 第115-117页 |
4.3.2 空白基质制备 | 第117页 |
4.3.3 LC-MS/MS定量分析条件 | 第117-121页 |
4.3.4 细胞培养与增殖实验 | 第121页 |
4.3.5 细胞样品前处理 | 第121页 |
4.3.6 靶向代谢组学性能评估 | 第121-123页 |
4.4 结果与讨论 | 第123-134页 |
4.4.1 质谱参数优化 | 第123-125页 |
4.4.2 液相条件优化 | 第125-134页 |
4.5 靶向代谢组学平台性能评估 | 第134-146页 |
4.5.1 标准曲线参数 | 第134-138页 |
4.5.2 精密度、准确度以及保留时间重现性 | 第138页 |
4.5.3 基质效应、回收率及稳定性 | 第138-146页 |
4.6 结论 | 第146-147页 |
参考文献 | 第147-150页 |
第五章 基于精准靶向代谢组学的乳腺癌细胞中氨基酸及衍生物研究 | 第150-171页 |
5.1 前言 | 第150-152页 |
5.2 实验材料 | 第152-153页 |
5.2.1 标准品和试剂 | 第152-153页 |
5.2.2 实验仪器 | 第153页 |
5.3 实验方法 | 第153-155页 |
5.3.1 细胞培养与增殖实验 | 第153-154页 |
5.3.2 LC-MS/MS定量分析条件 | 第154页 |
5.3.3 细胞样品前处理 | 第154-155页 |
5.3.4 数据处理及统计学方法 | 第155页 |
5.4 结果与讨论 | 第155-168页 |
5.4.1 定量分析评价及色谱图 | 第155-158页 |
5.4.2 MCF10A及 HCC1806 细胞中代谢物浓度 | 第158-163页 |
5.4.3 多维统计分析 | 第163-164页 |
5.4.4 代谢差异物研究 | 第164-165页 |
5.4.5 代谢通路研究 | 第165-168页 |
5.5 结论 | 第168-169页 |
参考文献 | 第169-171页 |
第六章 外周循环系统中5-羟色胺能系统在高血压中的机制研究 | 第171-191页 |
6.1 前言 | 第171-173页 |
6.2 实验材料 | 第173页 |
6.2.1 标准品和试剂 | 第173页 |
6.2.2 实验仪器 | 第173页 |
6.3 实验方法 | 第173-179页 |
6.3.1 储备液及标准曲线的制备 | 第173-174页 |
6.3.2 实验动物 | 第174页 |
6.3.3 动物给药及样品收集 | 第174-176页 |
6.3.4 动物血压测定 | 第176页 |
6.3.5 样品前处理 | 第176页 |
6.3.6 LC-MS/MS条件 | 第176-177页 |
6.3.7 空白基质的制备 | 第177页 |
6.3.8 方法学验证 | 第177-179页 |
6.3.9 数据处理及统计学方法 | 第179页 |
6.4 结果与讨论 | 第179-187页 |
6.4.1 待测物及内标色谱图 | 第179-180页 |
6.4.2 方法学验证 | 第180-181页 |
6.4.3 血浆收集条件优化及血样类型选择 | 第181-184页 |
6.4.4 酮色林治疗高血压机理研究 | 第184-187页 |
6.5 结论 | 第187-188页 |
参考文献 | 第188-191页 |
第七章 研究工作总结与展望 | 第191-195页 |
7.1 研究工作总结 | 第191-192页 |
7.2 全文结论 | 第192页 |
7.3 论文创新点 | 第192-193页 |
7.4 研究展望 | 第193-195页 |
附录:博士在读期间科研成果 | 第195-196页 |
致谢 | 第196-197页 |