摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
1 引言 | 第11-26页 |
·猪传染性胃肠炎病毒 | 第11-22页 |
·TGEV 的一般生物学特性 | 第11-13页 |
·TGEV 分子生物学特性 | 第13-17页 |
·TGEVS 蛋白在制备诊断制品上的研究进展 | 第17-20页 |
·TGEVS 基因工程疫苗的研究进展 | 第20-22页 |
·猪大肠杆菌 | 第22-24页 |
·产肠毒素型大肠杆菌 | 第22页 |
·肠毒素 | 第22页 |
·热敏肠毒素及分子结构 | 第22-24页 |
·LT 的佐剂活性 | 第24页 |
·本课题研究的目的及意义 | 第24-26页 |
2 S_1 基因和LTB 基因的克隆、重组及序列分析 | 第26-40页 |
·材料 | 第26-29页 |
·菌株、毒株与细胞 | 第26页 |
·载体及克隆菌株 | 第26页 |
·细胞培养所需主要试剂 | 第26页 |
·PCR(RT-PCR)反应所需试剂 | 第26-27页 |
·目的基因的克隆所需试剂 | 第27页 |
·试验所用溶液及其配制 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-35页 |
·猪传染性胃肠炎S_1 基因克隆与序列测定 | 第29-33页 |
·猪大肠杆菌LTB 基因克隆与序列测定 | 第33-34页 |
·S_1 基因与猪大肠杆菌LTB 基因的重组 | 第34-35页 |
·结果与分析 | 第35-37页 |
·猪传染性胃肠炎S_1 基因克隆与序列测定 | 第35-36页 |
·猪大肠杆菌LTB 基因克隆与序列测定 | 第36-37页 |
·S_1 基因与猪大肠杆菌LTB 基因的重组 | 第37页 |
·讨论 | 第37-40页 |
3 S_1 蛋白、LTB 蛋白和LTB_2-S_(1-2) 融合蛋白的表达及Western-blotting 鉴定 | 第40-56页 |
·材料 | 第40-44页 |
·载体及菌株 | 第40页 |
·酶 | 第40页 |
·诱导表达所需主要试剂 | 第40页 |
·SDS-PAGE 所需主要试剂 | 第40-41页 |
·蛋白纯化所需主要试剂 | 第41页 |
·Western-blotting 所需试剂、血清及抗体 | 第41页 |
·试验所用溶液及其配制 | 第41-44页 |
·S_1 基因、LTB 基因和LTB_2-S_(1-2) 基因的原核重组表达载体的构建 | 第44-46页 |
·S_1 基因的原核重组表达载体的构建 | 第44-45页 |
·LTB 基因的原核重组表达载体的构建 | 第45-46页 |
·LTB_2-S_(1-2) 基因的原核重组表达载体的构建 | 第46页 |
·51 基因、LTB 基因和LTB_2-S_(1-2) 基因的基因工程重组表达菌的诱导表达 | 第46-49页 |
·S_1 蛋白重组表达菌的诱导表达 | 第46-48页 |
·LTB 蛋白重组表达菌的诱导表达 | 第48页 |
·LTB_2-S_(1-2) 蛋白重组表达菌的诱导表达 | 第48-49页 |
·结果与分析 | 第49-54页 |
·重组质粒pET-28_a-S_1 的鉴定及重组51 蛋白表达菌的诱导表达 | 第49-51页 |
·重组质粒pET-28_a-LTB 的鉴定及重组LTB 蛋白表达菌的诱导表达 | 第51-52页 |
·重组质粒pET-28_a-LTB_2-S_(1-2) 的鉴定及重组LTB_2-S_(1-2) 融合表达菌的诱导表达 | 第52-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
4 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 | 第63-69页 |
在读期间发表的学术论文 | 第69-70页 |
作者简历 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |