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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--南极磷虾胰蛋白酶基因的克隆与功能研究
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南极磷虾胰蛋白酶基因的克隆与功能研究
 
     论文目录
 
摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
符号说明第8-9页
第一章 前言第9-19页
    1.1 胰蛋白酶简介第9-10页
    1.2 胰蛋白酶的结构特点第10页
    1.3 胰蛋白酶的活化机制第10-11页
    1.4 胰蛋白酶的功能机制第11页
    1.5 胰蛋白酶基因的研究第11-14页
        1.5.1 真菌胰蛋白酶基因的研究第12页
        1.5.2 脊椎动物胰蛋白酶基因的研究第12-13页
        1.5.3 无脊椎动物胰蛋白酶基因的研究第13-14页
    1.6 胰蛋白酶的酶学性质研究第14-16页
    1.7 胰蛋白酶的应用价值第16-17页
        1.7.1 胰蛋白酶在医药方面的应用第16页
        1.7.2 胰蛋白酶在轻工业方面的应用第16页
        1.7.3 胰蛋白酶基因的研究价值第16-17页
    1.8 南极磷虾研究进展第17页
        1.8.1 南极磷虾第17页
        1.8.2 南极磷虾胰蛋白酶的研究进展第17页
    1.9 本研究的目的和意义第17-18页
    1.10 本研究的内容第18-19页
第二章 材料与方法第19-38页
    2.1 实验材料及仪器设备第19-21页
        2.1.1 实验材料第19页
        2.1.2 仪器设备第19-20页
        2.1.3 溶液的配制第20-21页
    2.2 实验方法第21-38页
        2.2.1 实验用品的预处理第21页
        2.2.2 南极磷虾总RNA的提取第21页
        2.2.3 南极磷虾cDNA的制备第21-22页
        2.2.4 南极磷虾胰蛋白酶基因全长序列的克隆第22-28页
            2.2.4.1 引物合成第22-23页
            2.2.4.2 3'RACE扩增第23-27页
            2.2.4.3 基因编码序列扩增第27页
            2.2.4.4 PCR产物的回收纯化第27-28页
        2.2.5 感受态细胞的制备、连接及转化第28-30页
            2.2.5.1 感受态细胞的制备第28-29页
            2.2.5.2 连接第29页
            2.2.5.3 转化第29-30页
        2.2.6 序列比对与系统进化分析第30页
        2.2.7 EsTrypsin-1的重组表达第30-36页
            2.2.7.1 重组表达载体的构建第30-32页
            2.2.7.2 重组表达载体转化宿主菌第32-33页
            2.2.7.3 重组蛋白的诱导表达第33-34页
            2.2.7.4 含有重组质粒宿主菌的扩大培养第34-35页
            2.2.7.5 重组蛋白的分离纯化第35页
            2.2.7.6 重组蛋白的透析复性第35页
            2.2.7.7 重组蛋白含量的测定第35-36页
        2.2.8 重组蛋白的活性检测第36-38页
            2.2.8.1 温度对胰蛋白酶活性的影响第36页
            2.2.8.2 pH对胰蛋白酶活性的影响第36-38页
第三章 结果与分析第38-63页
    3.1 南极磷虾胰蛋白酶基因的克隆与分析第38-50页
        3.1.1 南极磷虾RNA的提取及反转第38页
        3.1.2 EsTrypsin-1基因3'端的RACE扩增第38-39页
        3.1.3 EsTrypsin-2基因3'端的RACE扩增第39-40页
        3.1.4 EsTrypsin-3基因3'端的RACE扩增第40页
        3.1.5 菌落PCR鉴定第40-42页
        3.1.6 EsTrypsin-1的序列分析第42-43页
        3.1.7 EsTrypsin-1的同源性分析第43-44页
        3.1.8 EsTrypsin-1的多序列比对分析第44-46页
        3.1.9 EsTrypsin-1的进化分析第46-50页
    3.2 EsTpsin-1的体外重组表达及蛋白的活性测定第50-60页
        3.2.1 EsTrypsin-1的体外重组表达第50-53页
        3.2.2 EsTrypsin-1的活性测定第53-60页
            3.2.2.1 南极磷虾胰蛋白酶的最适温度第53-56页
            3.2.2.2 南极磷虾胰蛋白酶的最适pH第56-60页
    3.3 讨论第60-63页
第四章 硕士期间的其它工作第63-73页
    4.1 过氧化物酶简介第63页
    4.2 南极磷虾EsPrx 6基因的3'端克隆第63-64页
    4.3 EsPrx 6的序列分析第64-66页
    4.4 EsPrx 6的同源性分析第66-67页
    4.5 EsPrx 6多序列比对分析第67-69页
    4.6 EsPrx 6基因的进化分析第69-72页
    4.7 讨论第72-73页
结论第73-74页
参考文献第74-81页
致谢第81-82页
攻读学位期间发表的学术论文目录第82-83页

 
 
论文编号BS3207305,这篇论文共83
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