中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-18页 |
第一部分 大豆 ABA 受体基因的功能研究 | 第18-66页 |
第一章 综述 | 第18-30页 |
1.1 ABA 的发现史 | 第18-20页 |
1.2 ABA 受体基因 | 第20-28页 |
1.2.1 FCA 基因 | 第20页 |
1.2.2 ABAR 基因 | 第20-22页 |
1.2.3 GCR2 基因 | 第22页 |
1.2.4 PYR/PYL/RCAR 基因家族 | 第22-28页 |
1.3 本部分研究的目的意义及研究内容 | 第28-30页 |
1.3.1 本部分研究目的及意义 | 第28页 |
1.3.2 本部分主要研究内容 | 第28页 |
1.3.3 本部分技术路线图 | 第28-30页 |
第二章 大豆 ABA 受体基因的功能分析 | 第30-61页 |
2.1 材料 | 第30-32页 |
2.1.1 植物材料 | 第30页 |
2.1.2 菌株 | 第30页 |
2.1.3 质粒载体 | 第30页 |
2.1.4 试剂和培养基 | 第30-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-41页 |
2.2.1 植物种植 | 第32页 |
2.2.2 DNA 小量提取 | 第32页 |
2.2.3 RNA 小量提取 | 第32-33页 |
2.2.4 cDNA 的制备 | 第33页 |
2.2.5 基因扩增 | 第33页 |
2.2.6 胶回收 | 第33-34页 |
2.2.7 连接反应 | 第34页 |
2.2.8 大肠杆菌的转化 | 第34页 |
2.2.9 质粒提取 | 第34-35页 |
2.2.10 载体的构建 | 第35-37页 |
2.2.11 感受态农杆菌的制备 | 第37页 |
2.2.12 农杆菌的转化 | 第37页 |
2.2.13 亚细胞定位 | 第37-38页 |
2.2.14 拟南芥的转化 | 第38页 |
2.2.15 转基因植株的抗性筛选 | 第38页 |
2.2.16 ABA 处理 | 第38页 |
2.2.17 qRT-PCR | 第38-39页 |
2.2.18 酵母双杂交 | 第39-40页 |
2.2.19 蛋白纯化 | 第40页 |
2.2.20 PP2C 酶活检测 | 第40页 |
2.2.21 数据分析 | 第40-41页 |
2.3 结果与分析 | 第41-61页 |
2.3.1 大豆基因组中 ABA 受体分析 | 第41-42页 |
2.3.2 大豆 ABA 受体基因的聚类分析 | 第42-44页 |
2.3.3 大豆 ABA 受体在不同组织的表达情况 | 第44-45页 |
2.3.4 大豆 ABA 受体受 ABA 的诱导情况 | 第45页 |
2.3.5 大豆 ABA 受体基因的亚细胞定位 | 第45-47页 |
2.3.6 大豆 ABA 受体和 PP2C 的互作 | 第47-54页 |
2.3.7 大豆 ABA 受体的自我互作 | 第54-55页 |
2.3.8 ABA 受体保守位点的验证 | 第55页 |
2.3.9 ABA 受体抑制 PP2C 的活性 | 第55-57页 |
2.3.10 GmPYL1 基因的功能互补 | 第57-58页 |
2.3.11 GmPYL1 基因与 AtABI1 的体内互作 | 第58-59页 |
2.3.12 大豆 GmPYL1 保守氨基酸位点分析 | 第59-61页 |
第三章 讨论 | 第61-64页 |
第四章 结论与展望 | 第64-66页 |
4.1 结论 | 第64-65页 |
4.2 创新点 | 第65页 |
4.3 展望 | 第65-66页 |
第二部分 拟南芥 DTF1 基因在 RdDM 路径上的作用 | 第66-111页 |
第五章 综述 | 第66-84页 |
5.1 表观遗传学的历史 | 第66页 |
5.2 DNA 甲基化 | 第66-76页 |
5.2.1 DNA 甲基化合成 | 第68-76页 |
5.2.1.1 DNA 甲基化重新合成 | 第68-76页 |
5.2.1.2 组蛋白修饰对 RdDM 路径的作用 | 第76页 |
5.3 DNA 去甲基化 | 第76-81页 |
5.4 本部分研究目的意义及研究内容 | 第81-84页 |
5.4.1 本部分研究目的及意义 | 第81-82页 |
5.4.2 本部分主要研究内容 | 第82页 |
5.4.3 本部分技术路线 | 第82-84页 |
第六章 拟南芥 DTF1 基因在 RDDM 路径上的作用 | 第84-107页 |
6.1 材料 | 第84-85页 |
6.1.1 植物材料 | 第84页 |
6.1.2 菌株 | 第84页 |
6.1.3 质粒载体 | 第84页 |
6.1.4 试剂和培养基 | 第84-85页 |
6.2 实验方法 | 第85-91页 |
6.2.1 拟南芥种植 | 第85页 |
6.2.2 拟南芥突变体的筛选 | 第85页 |
6.2.3 图位克隆群体的构建 | 第85-86页 |
6.2.4 DTF1 基因的图位克隆 | 第86页 |
6.2.5 载体的构建 | 第86-87页 |
6.2.6 Small RNA 提取 | 第87页 |
6.2.7 Small RNA Northern blot | 第87-88页 |
6.2.8 Southern blot | 第88-90页 |
6.2.9 LUC 成像 | 第90页 |
6.2.10 Chop-PCR | 第90-91页 |
6.2.11 亚硫酸氢盐测序 | 第91页 |
6.2.12 数据分析 | 第91页 |
6.3 结果与分析 | 第91-107页 |
6.3.1 突变体植株的获得 | 第91-92页 |
6.3.2 突变体性状的鉴定 | 第92-94页 |
6.3.3 DTF1 基因的克隆 | 第94页 |
6.3.4 DTF1 基因的序列分析 | 第94-96页 |
6.3.5 DTF1 基因的互补检验 | 第96-98页 |
6.3.6 DTF1 基因对 RdDM 路径上内源靶基因沉默有作用 | 第98-99页 |
6.3.7 DTF1 基因参与 RdDM 路径的 siRNA 合成 | 第99-101页 |
6.3.8 DTF1 基因是一些内源位点 DNA 甲基化形成所必需的 | 第101-107页 |
第七章 讨论 | 第107-109页 |
第八章 结论与展望 | 第109-111页 |
8.1 结论 | 第109页 |
8.2 创新点 | 第109-110页 |
8.3 展望 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-123页 |
附录 | 第123-127页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第127-128页 |
致谢 | 第128-129页 |