| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号及缩略说明表 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-36页 |
| 1 灰霉病及防治研究现状 | 第12-19页 |
| 1.1 灰葡萄孢菌概况 | 第12-13页 |
| 1.2 灰葡萄孢菌生活史及病害循环 | 第13-14页 |
| 1.3 发病因素 | 第14页 |
| 1.4 灰霉病防治研究现状 | 第14-19页 |
| 1.4.1 抗病育种防治现状 | 第14页 |
| 1.4.2 生物防治现状 | 第14-16页 |
| 1.4.3 农业防治现状 | 第16页 |
| 1.4.4 化学防治现状 | 第16-19页 |
| 2 苯基吡咯类杀菌剂研究现状 | 第19-21页 |
| 2.1 拌种咯简介 | 第19页 |
| 2.2 咯菌腈及其研究进展 | 第19-21页 |
| 2.2.1 咯菌腈的理化性质 | 第19-20页 |
| 2.2.2 咯菌腈的研究进展 | 第20-21页 |
| 3 HOG途径关键元件Sln1和Sho1的研究进展 | 第21-22页 |
| 3.1 组氨酸磷酸转移激酶(Ⅵ型)Sln1研究进展 | 第21-22页 |
| 3.2 细胞膜感应蛋白Sho1研究进展 | 第22页 |
| 4 本论文研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-36页 |
| 第二章 灰葡萄孢菌细胞膜感应蛋白BcSho1生物学功能研究 | 第36-58页 |
| 1 材料与方法 | 第37-45页 |
| 1.1 供试菌株及质粒 | 第37页 |
| 1.2 供试试剂及培养基 | 第37-38页 |
| 1.3 DNA和RNA的提取 | 第38页 |
| 1.4 灰葡萄孢菌BcSho1基因序列鉴定及系统进化分析 | 第38-39页 |
| 1.5 BcSho1基因敲除及GFP回复标记 | 第39-42页 |
| 1.5.1 BcSho1基因敲除载体的构建 | 第39-40页 |
| 1.5.2 BcSho1基因GFP回复标记载体构建 | 第40-41页 |
| 1.5.3 灰葡萄孢菌原生质体转化 | 第41页 |
| 1.5.4 敲除突变体的验证 | 第41页 |
| 1.5.5 回复突变体的验证 | 第41-42页 |
| 1.6 BcSho1基因敲除突变体表型测定 | 第42-45页 |
| 1.6.1 突变体对咯菌腈的敏感性测定 | 第42-43页 |
| 1.6.2 突变体对腐霉利的敏感性测定 | 第43页 |
| 1.6.3 致病力测定 | 第43页 |
| 1.6.4 产菌核能力测定 | 第43页 |
| 1.6.5 基因敲除突变体对不同温度敏感性测定 | 第43-44页 |
| 1.6.6 突变体对不同环境胁迫因子敏感性测定 | 第44页 |
| 1.6.7 突变体菌丝生长量对碱性环境敏感性测定 | 第44页 |
| 1.6.8 突变体菌丝甘油含量测定 | 第44页 |
| 1.6.9 突变体对不同氮源敏感性测定 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-54页 |
| 2.1 灰葡萄孢菌中BcSho1基因序列鉴定与分析 | 第45-47页 |
| 2.2 灰葡萄孢菌BcSho1基因敲除突变体和BcSho1基因去掉跨膜区回复突变体的生物学特征 | 第47-54页 |
| 2.2.1 BcSho1基因敲除突变体获得 | 第47-48页 |
| 2.2.2 BcSho1基因敲除及回复突变体形态 | 第48-49页 |
| 2.2.3 BcSho1基因与灰葡萄孢菌对咯菌腈抗药性相关 | 第49页 |
| 2.2.4 BcSho1基因与灰葡萄孢菌对腐霉利敏感性相关 | 第49-50页 |
| 2.2.5 BcSho1基因与灰葡萄孢菌对草莓叶和苹果的致病性无关 | 第50页 |
| 2.2.6 BcSho1基因调控菌体对不同环境胁迫因子的敏感性 | 第50-51页 |
| 2.2.7 BcSho1基因调控灰葡萄孢菌对碱性环境忍耐力 | 第51页 |
| 2.2.8 BcSho1基因与菌丝甘油合成相关 | 第51-52页 |
| 2.2.9 BcSho1基因与菌体温度敏感性相关 | 第52-53页 |
| 2.2.10 BcSho1基因与菌体对不同氮源的利用能力相关 | 第53页 |
| 2.2.11 灰葡萄孢菌BcSho1基因GFP标记定位 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第三章 灰葡萄孢菌BcSln1生物学功能及与BcSho1协同作用研究 | 第58-78页 |
| 1 材料与方法 | 第58-64页 |
| 1.1 供试菌株及质粒 | 第58-59页 |
| 1.2 供试药剂培养基 | 第59页 |
| 1.3 DNA和RNA的提取 | 第59页 |
| 1.4 灰葡萄孢菌BcSln1基因序列分析 | 第59-60页 |
| 1.5 灰葡萄孢菌BcSln1基因敲除 | 第60-61页 |
| 1.5.1 BcSln1基因敲除载体的构建 | 第60-61页 |
| 1.5.2 BcSln1敲除突变体的验证 | 第61页 |
| 1.6 灰葡萄孢菌BcSln1和BcSho1基因双敲除 | 第61-64页 |
| 1.6.1 BcSho1双敲除载体的构建 | 第61-62页 |
| 1.6.2 BcSln1和BcSho1双敲除突变体的验证 | 第62-64页 |
| 1.7 BcSln1基因敲除突变体、BcSln1和BcSho1双敲除体表型测定 | 第64页 |
| 1.7.1 BcSln1敲除突变体对咯菌腈的敏感性测定 | 第64页 |
| 1.7.2 BcSln1敲除突变体对腐霉利的敏感性测定 | 第64页 |
| 1.7.3 致病力测定 | 第64页 |
| 1.7.4 产菌核能力测定 | 第64页 |
| 1.7.5 基因敲除突变体对不同温度敏感性测定 | 第64页 |
| 1.7.6 突变体对不同环境胁迫因子敏感性测定 | 第64页 |
| 1.7.7 突变体菌丝生长量对不同pH敏感性测定 | 第64页 |
| 1.7.8 突变体菌丝甘油含量测定 | 第64页 |
| 1.7.9 突变体对不同氮源敏感性测定 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-75页 |
| 2.1 灰葡萄孢菌中BcSln1基因序列鉴定与分析 | 第64-66页 |
| 2.2 灰葡萄孢菌BcSln1基因敲除突变体及BcSln1和BcSho1基因双敲除的生物学特征 | 第66-75页 |
| 2.2.1 BcSln1基因敲除突变体获得 | 第66-67页 |
| 2.2.2 BcSln1和BcSho1双基因敲除突变体获得 | 第67-68页 |
| 2.2.3 BcSln1基因敲除及BcSln1和BcSho1双敲除突变体形态 | 第68-69页 |
| 2.2.4 BcSln1基因与灰葡萄孢菌对咯菌腈敏感性相关 | 第69页 |
| 2.2.5 BcSln1基因与灰葡萄孢菌对腐霉利敏感性无关 | 第69-70页 |
| 2.2.6 BcSln1基因与灰葡萄孢菌菌核的形成相关 | 第70-71页 |
| 2.2.7 BcSln1基因与灰葡萄孢菌对草莓叶和苹果的致病性无关 | 第71页 |
| 2.2.8 BcSln1基因调控菌体对不同环境胁迫因子的敏感性 | 第71-72页 |
| 2.2.9 BcSln1基因影响灰葡萄孢菌对碱性环境忍耐力 | 第72-73页 |
| 2.2.10 BcSln1基因与菌丝甘油合成相关 | 第73-74页 |
| 2.2.11 BcSln1基因与菌体温度敏感性无关 | 第74页 |
| 2.2.12 BcSln1基因与菌体对不同氮源利用能力相关 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-78页 |
| 全文小结 | 第78-80页 |
| 附录 | 第80-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
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