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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--成纤维细胞生长因子14表达及神经保护作用研究
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成纤维细胞生长因子14表达及神经保护作用研究
 
     论文目录
 
摘要第4-6页
abstract第6-8页
第一章 绪论第11-18页
    1.1 成纤维细胞生长因子概述第11-12页
    1.2 FGF14 研究进展第12-14页
    1.3 蛋白表达的研究进展第14-16页
    1.4 论文选题的目的及意义第16页
    1.5 本论文研究内容第16-17页
    技术路线第17-18页
第二章 材料与方法第18-36页
    2.1 实验仪器与材料第18-24页
        2.1.1 实验仪器第18-19页
        2.1.2 实验材料第19页
            2.1.2.1 菌种及载体第19页
        2.1.3 实验试剂第19-24页
            2.1.3.1 常用试剂配制第21-23页
            2.1.3.2 培养基配制第23页
            2.1.3.3 菌体处理缓冲液配方第23-24页
            2.1.3.4 细胞培养相关溶液第24页
    2.2 实验方法第24-36页
        2.2.1 重组蛋白表达载体的构建第24-27页
            2.2.1.1 目的基因合成第24页
            2.2.1.2 质粒抽提第24-25页
            2.2.1.3 pUC57-hFGF14 质粒及载体p ET15b质粒的双酶切第25页
            2.2.1.4 双酶切产物鉴定第25-26页
            2.2.1.5 酶切目的片段FGF14、载体p ET15bp片段胶回收第26页
            2.2.1.6 连接第26-27页
            2.2.1.7 转化第27页
            2.2.1.8 连接产物的鉴定第27页
        2.2.2 重组蛋白的诱导表达和纯化第27-29页
            2.2.2.1 重组载体的表达菌转化第27-28页
            2.2.2.2 重组蛋白扩大培养第28页
            2.2.2.3 重组蛋白的可溶性鉴定第28页
            2.2.2.4 包涵体的洗涤第28-29页
            2.2.2.5 包涵体的变复性第29页
            2.2.2.6 重组蛋白的纯化第29页
        2.2.3 FGF14 在细胞中促增殖作用第29-31页
            2.2.3.1 NIH3T3 细胞,PC12 细胞的复苏、培养与保存第29-30页
            2.2.3.2 CCK8 法检测FGF14在NIH3T3 细胞中的促增殖活性第30页
            2.2.3.3 CCK8 检测FGF14在PC12 细胞中的促增殖活性第30页
            2.2.3.4 CCK8 法检测FGF14 结合肝素在PC12 细胞中的促增殖活性第30-31页
        2.2.4 FGF14对PC12 细胞的神经保护作用第31-33页
            2.2.4.1 Aβ25-35诱导PC12 细胞损伤阿尔兹海默症模型的构建第31页
            2.2.4.2 FGF14对Aβ25-35诱导PC12 细胞损伤模型的促增殖作用第31页
            2.2.4.3 FGF14对Aβ25-35细胞损伤阿尔兹海默症模型中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)活性检测第31-32页
            2.2.4.4 FGF14对Aβ25-35细胞损伤阿尔兹海默症模型中丙二醛(MDA)活性检测第32页
            2.2.4.5 Calcein-AM/PI双染色检测细胞凋亡第32-33页
            2.2.4.6 流式细胞仪检测细胞的凋亡率第33页
        2.2.5 FGF14对Aβ25-35细胞损伤阿尔兹海默症模型的保护作用机制研究第33-34页
        2.2.6 统计学分析第34-36页
第三章 结果和分析第36-52页
    3.1 重组质粒的鉴定及序列分析第36-37页
    3.2 FGF14 蛋白的表达和纯化第37-42页
        3.2.1 FGF14 蛋白表达及条件优化第37-39页
        3.2.2 FGF14 蛋白的可溶性鉴定第39-40页
        3.2.3 FGF14 包涵体的洗涤第40-41页
        3.2.4 FGF14 包涵体的变性及复性第41页
        3.2.5 FGF14 蛋白的纯化第41-42页
    3.3 FGF14 在细胞中的促增殖作用第42-45页
        3.3.1 CCK8 法检测FGF14在NIH3T3 细胞中的促增殖作用第42-43页
        3.3.2 CCK8 法检测FGF14对PC12 细胞中的促增殖作用第43-44页
        3.3.3 CCK8 法检测FGF14 结合肝素在PC12 细胞中的促增殖活性第44-45页
    3.4 FGF14对PC12 细胞的神经保护作用第45-50页
        3.4.1 不同浓度Aβ25-35不同时间对PC12 细胞的损伤作用第45-46页
        3.4.3 不同浓度FGF14 蛋白对Aβ25-35诱导PC12 细胞建立损伤模型的保护作用第46-47页
        3.4.4 LDH和 MDA含量测定第47-49页
        3.4.5 Calcein-AM/PI双染色检测FGF14对Aβ25-35损伤PC12 阿尔兹海默症模型的保护作用第49页
        3.4.6 FGF14对Aβ25-35诱导的PC12 细胞凋亡的影响第49-50页
    3.5 FGF14对Aβ25-35诱导的MAPK信号通路的影响第50-52页
第四章 全文讨论第52-55页
结论第55-56页
参考文献第56-61页
附录第61-67页
致谢第67-68页
在校期间成果及论文发表情况第68页

 
 
论文编号BS4267755,这篇论文共68
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