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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--转HOXA10基因小鼠和猪的制备及基因功能研究
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转HOXA10基因小鼠和猪的制备及基因功能研究
 
     论文目录
 
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
缩略词表第13-15页
1 前言第15-34页
    1.1 研究问题的由来第15-16页
    1.2 胚胎附植第16-17页
        1.2.1 猪胚胎/胎儿死亡的原因第16-17页
        1.2.2 胚胎附植过程第17页
    1.3 HOXA10 基因在胚胎附植过程中的作用第17-23页
        1.3.1 HOXA10 基因概述第17-18页
        1.3.2 HOXA10 基因与子宫内膜容受性第18-19页
        1.3.3 调节HOXA10 基因表达的因子第19-20页
        1.3.4 HOXA10 调控的下游基因第20-23页
    1.4 HOXA10 基因的其他功能研究第23-24页
    1.5 转基因动物研究进展第24-29页
        1.5.1 转基因技术与转基因动物第24-25页
        1.5.2 转基因猪的应用前景及存在问题第25-28页
        1.5.3 转基因克隆技术在转基因猪中的应用第28-29页
    1.6 LncRNA的研究进展第29-32页
        1.6.1 LncRNA概述第29-31页
        1.6.2 LncRNA在家畜中的研究进展第31-32页
        1.6.3 LncRNA与胚胎附植第32页
    1.7 研究目的与意义第32-34页
2 材料与方法第34-62页
    2.1 材料第34-41页
        2.1.1 实验动物第34页
        2.1.2 细胞样品第34页
        2.1.3 载体及菌株第34-36页
        2.1.4 主要仪器设备第36-37页
        2.1.5 主要试剂及试剂盒第37-40页
        2.1.6 主要分子生物学软件及数据库第40-41页
    2.2 研究方法第41-62页
        2.2.1 本研究技术路线第41-44页
        2.2.2 转基因小鼠的制备与检测第44-53页
        2.2.3 转基因克隆公猪的传代与检测第53-54页
        2.2.4 转基因克隆母猪的制备第54-57页
        2.2.5 与HOXA10 表达相关的差异mRNA和LncRNA筛选第57-62页
3 结果第62-94页
    3.1 转基因小鼠的制备与检测第62-70页
        3.1.1 制备转基因小鼠外源片段的获得第62-63页
        3.1.2 G0 代转基因小鼠的检测第63-65页
        3.1.3 转基因小鼠的传代及产仔数的观察第65-67页
        3.1.4 G2 代转基因小鼠Hoxa10 基因的表达检测第67-70页
    3.2 转基因克隆公猪的传代与检测第70-77页
        3.2.1 转基因猪的扩繁第70页
        3.2.2 转基因克隆公猪HOXA10 基因的组织表达检测第70-71页
        3.2.3 G0 代克隆公猪生理生化指标测定第71-73页
        3.2.4 转基因G1 代猪生理生化指标测定第73-77页
    3.3 转基因克隆母猪的制备与初步鉴定第77-83页
        3.3.1 胎儿成纤维细胞的性别鉴定第77页
        3.3.2 pc3.1-PF3-HOXA10 载体的线性化及稳转细胞的构建第77-80页
        3.3.3 转HOXA10 基因克隆母猪的初步鉴定第80-83页
    3.4 与HOXA10 表达相关的差异mRNA和LncRNA功能预测第83-94页
        3.4.1 pcDNA3.1(+)/HOXA10 载体构建第83页
        3.4.2 Ishikawa细胞的转染及表达检测第83-84页
        3.4.3 用于LncRNA芯片杂交的RNA质量检测第84-86页
        3.4.4 差异表达的mRNA和LncRNA的聚类分析第86-90页
        3.4.5 差异表达mRNA的Gene Ontology与KEGG通路分析第90-91页
        3.4.6 LncRNA的子类与亚组分析第91-92页
        3.4.7 可能与胚胎附植相关的LncRNA第92页
        3.4.8 差异表达mRNA和LncRNA的Q-PCR验证第92-94页
4 讨论第94-102页
    4.1 选择猪HOXA10 基因作为目标基因的理由第94页
    4.2 转基因动物制备方法的评估第94-96页
        4.2.1 显微注射法与体细胞核移植法的比较第94-95页
        4.2.2 供体细胞的选择与阳性细胞系的建立第95-96页
        4.2.3 胚胎移植第96页
    4.3 关于转基因动物的检测方法第96-98页
        4.3.1 转基因动物的鉴定方法第96页
        4.3.2 外源基因拷贝数及整合位点的检测第96-97页
        4.3.3 血液生理生化指标的检测第97-98页
    4.4 关于本研究中转基因小鼠部分的讨论第98-99页
        4.4.1 关于启动子的选择第98-99页
        4.4.2 诱导小鼠Hoxa10 基因表达及产仔数比较第99页
    4.5 选择LncRNA芯片进行基因功能研究的讨论第99-102页
        4.5.1 LncRNA的研究方法第99-100页
        4.5.2 LncRNA芯片结果的讨论第100-102页
5 小结第102-104页
    5.1 本研究的主要结论第102-103页
    5.2 本研究的创新点与特色第103页
    5.3 本研究的不足与进一步工作的设想第103-104页
参考文献第104-121页
攻读学位期间发表论文题录第121-122页
致谢第122-124页

 
 
论文编号BS2835306,这篇论文共124
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