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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--梨轮纹病与干腐病的病原关系及轮纹病菌携带真菌病毒多样性研究
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梨轮纹病与干腐病的病原关系及轮纹病菌携带真菌病毒多样性研究
 
     论文目录
 
摘要第10-13页
ABSTRACT第13-16页
缩略语表第17-19页
第一章 文献综述第19-36页
    1.1 梨轮纹病和干腐病的研究进展第19-21页
        1.1.1 梨轮纹病和干腐病病原学研究第19-20页
        1.1.2 B. dothidea诱导寄主表现轮纹和干腐症状的机理第20页
        1.1.3 梨轮纹病和干腐病的防治第20-21页
    1.2 侵染我国果树的葡萄座腔菌科真菌的种类多样性第21-22页
    1.3 真菌病毒第22-35页
        1.3.1 真菌病毒的分类第24-29页
        1.3.2 真菌病毒的传播第29-30页
        1.3.3 影响病毒传播效率的因素第30页
        1.3.4 真菌病毒和病原真菌互作研究第30-31页
        1.3.5 真菌病毒和弱毒现象第31页
        1.3.6 其它能导致弱毒现象的真菌病毒第31-32页
        1.3.7 真菌病毒在生物防治上的应用潜力第32-35页
    1.4 侵染木本真菌的真菌病毒研究进展第35页
    1.5 研究的目的和意义第35-36页
第二章 梨轮纹病菌和干腐病菌菌株的分离和致病性测定第36-61页
    2.1 引言第36-37页
    2.2 试验材料第37页
    2.3 试验方法第37-45页
        2.3.1 病菌分离和纯化第37-40页
        2.3.2 菌落形态的观察第40页
        2.3.3 分生孢子的诱导第40页
        2.3.4 菌株DNA的提取第40页
        2.3.5 引物设计与合成第40-41页
        2.3.6 PCR扩增第41-42页
        2.3.7 PCR产物的回收与纯化第42页
        2.3.8 连接第42-43页
        2.3.9 热击转化第43页
        2.3.10 阳性克隆的PCR鉴定第43页
        2.3.11 阳性克隆测序和系统进化树分析第43-44页
        2.3.12 不同菌株致病性的测定第44-45页
    2.4 结果与分析第45-58页
        2.4.1 田间症状观察第45-46页
        2.4.2 病原菌的形态学鉴定第46-49页
        2.4.3 病原菌的分子鉴定第49-52页
        2.4.4 病原菌的致病性分析第52-58页
    2.5 讨论第58-61页
第三章 葡萄座腔菌不同菌株中dsRNA病毒的检测第61-69页
    3.1 引言第61页
    3.2 试验材料第61页
    3.3 试验方法第61-65页
        3.3.1 葡萄座腔菌菌株的分离第61-62页
        3.3.2 DNA提取第62页
        3.3.3 dsRNA提取第62-64页
        3.3.4 核酸电泳分析第64页
        3.3.5 用DNase I和S1核酸酶处理dsRNA样品第64-65页
    3.4 结果和分析第65-68页
        3.4.1 菌株的表型第65-66页
        3.4.2 菌落异常菌株的致病力第66页
        3.4.3 供试菌株DNA和dsRNA的提取结果第66-68页
    3.5 讨论第68-69页
第四章 五节段dsRNA病毒BdRV1分子特性及生物学特性研究第69-131页
    4.1 引言第69-70页
    4.2 试验材料第70-71页
        4.2.1 供试菌株第70-71页
        4.2.2 供试植物第71页
    4.3 试验方法第71-90页
        4.3.1 菌落形态观察、生长速率及致病力测定第71-72页
        4.3.2 DsRNA病毒全长cDNA克隆第72-78页
        4.3.3 DsRNA片段cDNA序列的拼接及分析第78页
        4.3.4 菌株YZN115单分生孢子后代的分离第78-79页
        4.3.5 菌株YZN115的弱毒特性及dsRNA的水平传染第79页
        4.3.6 病毒粒子的提取第79-80页
        4.3.7 病毒粒体的透射电镜观察第80页
        4.3.8 病毒粒体的核酸和结构蛋白的检测第80-82页
        4.3.9 原生质体的制备第82页
        4.3.10 病毒粒体的转染第82-83页
        4.3.11 原生质体再生法对病毒的脱除第83页
        4.3.12 原核表达载体的构建和蛋白诱导表达第83-84页
        4.3.13 表达蛋白的可溶性分析第84-85页
        4.3.14 His标签蛋白的纯化第85-86页
        4.3.15 His标签蛋白换缓冲液和浓度的测定第86页
        4.3.16 多克隆抗体的制备第86页
        4.3.17 真菌总蛋白的提取第86-87页
        4.3.18 Western blot分析第87页
        4.3.19 真菌中病毒粗提液的小量制备第87-88页
        4.3.20 间接ELISA第88页
        4.3.21 免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)第88-89页
        4.3.22 免疫电镜第89-90页
        4.3.23 数据的统计方法第90页
    4.4 结果与分析第90-126页
        4.4.1 葡萄座腔菌菌株YZN115的生物学特性及dsRNA的检测第90-92页
        4.4.2 dsRNA片段的全长cDNA序列的分析第92-102页
        4.4.3 BdRV1的垂直传播第102-103页
        4.4.4 BdRV1的水平传播第103-104页
        4.4.5 水平传毒试验中亲本菌株和衍生菌株的区分第104页
        4.4.6 传毒衍生菌株表现畸形生长和弱毒特性第104-108页
        4.4.7 BdRV1在不同来源B. dothidea菌株中的分布和序列多态性第108-109页
        4.4.8 从纯化的BdRV1/YZN115样品中获得病毒的dsRNA和蛋白第109-111页
        4.4.9 BdRV1的dsRNA4蛋白全基因序列的获得和原核表达载体构建第111-112页
        4.4.10 多克隆抗体PAb-p4的效价分析第112-113页
        4.4.11 多克隆抗体PAb-p4识别BdRV1编码的蛋白第113-115页
        4.4.12 病毒的结构第115页
        4.4.13 多克隆抗体的IC-RT-PCR分析及对BdRV1/YZN115病毒的识别第115-116页
        4.4.14 BdRV1的转录组数据统计第116-119页
        4.4.15 转录组序列GO和KEGG分析第119页
        4.4.16 差异表达基因的筛选及功能分类第119-126页
    4.5 讨论第126-131页
第五章 双节段dsRNA病毒BdBRV1分子特性和生物学特性研究第131-148页
    5.1 引言第131页
    5.2 试验材料第131-132页
        5.2.1 供试菌株第131页
        5.2.2 供试植物第131-132页
    5.3 试验方法第132-133页
        5.3.1 菌株生物学特性第132页
        5.3.2 DsRNA提取和纯化第132页
        5.3.3 BdBRV1全长cDNA的克隆第132页
        5.3.4 PCR产物测序第132页
        5.3.5 DsRNA片段cDNA序列的拼接及分析第132页
        5.3.6 BdBRV1病毒粒子特征第132页
        5.3.7 BdBRV1的水平和垂直传播第132-133页
    5.4 结果和分析第133-145页
        5.4.1 菌株EW220的生物学特性及dsRNA的检测第133-135页
        5.4.2 BdBRV1的基因结构和特性分析第135-139页
        5.4.3 BdBRV1病毒粒体的负染观察及核酸、结构蛋白的检测第139-141页
        5.4.4 BdBRV1病毒的系统进化分析第141页
        5.4.5 BdBRV1病毒垂直传播能力第141页
        5.4.6 BdBRV1病毒的水平传播能力第141-143页
        5.4.7 BdBRV1病毒的生物学特征第143-145页
    5.5 讨论第145-148页
第六章 一种侵染梨轮纹病菌的全病毒基因组的分析第148-156页
    6.1 引言第148页
    6.2 试验材料第148页
        6.2.1 供试菌株第148页
        6.2.2 供试植物第148页
    6.3 试验方法第148-150页
    6.4 结果和分析第150-155页
        6.4.1 菌株GY25的生物学特性及dsRNA的检测第150页
        6.4.2 BdV1的基因结构和特性分析第150-151页
        6.4.3 BdV1的的系统进化分析第151-155页
    6.5 讨论第155-156页
第七章 全文结论和展望第156-160页
    7.1 结论和展望第156-158页
    7.2 创新点第158-160页
参考文献第160-183页
附录1 多克隆抗体效价测定第183-184页
附录2 p MD18-T克隆载体图谱第184-185页
附录3 p ET-28a(+)载体图谱和多克隆位点信息第185-186页
附录4 常用试剂和培养基的配方第186-190页
附录5 博士期间发表论文第190-192页
致谢第192-194页

 
 
论文编号BS3404606,这篇论文共194
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