| 第一章 前言 | 第1-34页 |
| 第一节 心肌型脂肪酸结合蛋白表达进展 | 第14-18页 |
| 1 心肌型脂肪酸结合蛋白的结构特点 | 第14-16页 |
| 2 心肌型脂肪酸结合蛋白的表达进展 | 第16-18页 |
| 第二节 心肌型脂肪酸结合蛋白的临床应用 | 第18-24页 |
| 1 心肌型脂肪酸结合蛋白的性质和特征 | 第18-19页 |
| 2 心肌型脂肪酸结合蛋白的临床应用 | 第19-24页 |
| 第三节 基因克隆和表达系统 | 第24-34页 |
| 1 微生物表达系统 | 第25-32页 |
| 2 植物细胞表达系统 | 第32页 |
| 3 动物细胞表达系统 | 第32-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-48页 |
| 1 材料 | 第34-36页 |
| 2 实验方法 | 第36-48页 |
| ·TRIZOL Reagent 提取人胚胎心肌组织总 RNA(total RNA; T-RNA) | 第36页 |
| ·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳 | 第36-37页 |
| ·逆转录PCR 扩增人H-FABP | 第37-38页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第38-39页 |
| ·H-FABP与pGEM-T easy 载体连接反应 | 第39页 |
| ·感受态的制备(氯化钙法) | 第39-40页 |
| ·重组pGEM-T easy 载体的转化 | 第40页 |
| ·重组质粒pGEM-T easy 的小量提取 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
| ·构建重组原核表达质粒pBV-H-FABP | 第42页 |
| ·重组菌的表达筛选 | 第42-43页 |
| ·蛋白质的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43-44页 |
| ·pBV-H-FABP 最适表达时间的优化 | 第44页 |
| ·H-FABP的Western blotting分析 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白的可溶性检查 | 第45-46页 |
| ·pBV-H-FABP 的纯化 | 第46-47页 |
| ·二喹啉甲酸(BCA)法测定蛋白含量 | 第47-48页 |
| 第三章 结果 | 第48-54页 |
| 1 总RNA(T-RNA)提取 | 第48页 |
| 2 人H-FABP 基因RT-PCR 扩增 | 第48-49页 |
| 3 重组质粒的双酶切鉴定 | 第49页 |
| 4 重组质粒的PCR 鉴定 | 第49页 |
| 5 重组质粒序列分析 | 第49-50页 |
| 6 重组表达质粒的PCR 鉴定 | 第50页 |
| 7 重组菌的表达筛选 | 第50-51页 |
| 8 pBV-H-FABP 最适表达时间的优化 | 第51-52页 |
| 9 pBV-H-FABP 重组蛋白的可溶性检查 | 第52页 |
| 10 pBV-H-FABP 的纯化和Western blotting 分析 | 第52页 |
| 11 二喹啉甲酸(BCA)法测定蛋白含量 | 第52-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 中文摘要 | 第65-67页 |
| 英文摘要 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
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