摘要 | 第1-6页 |
abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-15页 |
第一章 草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白靶向灭活转基因P0代的构建 | 第15-23页 |
·材料和方法 | 第15-17页 |
·实验材料 | 第15页 |
·转基因质粒p Tgf2- EF1α-VP3-SN的构建 | 第15-16页 |
·转基因质粒p Tgf2-Hsp70P-VP3-SN的构建 | 第16页 |
·Tgf2转座酶m RNA的体外转录 | 第16-17页 |
·显微注射 | 第17页 |
·转基因阳性个体的检测与筛选 | 第17页 |
·实验结果与分析 | 第17-21页 |
·转基因质粒p Tgf2-EF1α-VP3-SN和p Tgf2-Hsp70-VP3-SN的构建 | 第17-18页 |
·转基因草鱼阳性个体的观察与检测 | 第18-19页 |
·转基因p Tgf2- EF1α-VP3-SN质粒草鱼阳性个体检测 | 第19-20页 |
·转基因p Tgf2-Hsp70-VP3-SN质粒草鱼阳性个体检测 | 第20-21页 |
·讨论 | 第21-23页 |
·选用EF1α 和Hsp70启动子构建转基因载体的原因 | 第21-22页 |
·Tgf2转座系统可提高草鱼CTVI转基因的效率 | 第22页 |
·抗草鱼出血病转基因P0代构建的潜在价值 | 第22-23页 |
第二章 团头鲂Chordin基因c DNA全序列的克隆及功能研究 | 第23-43页 |
·实验材料、仪器和试剂 | 第23-24页 |
·实验用鱼和胚胎 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·主要生物化学试剂 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-34页 |
·团头鲂胚胎及成鱼组织总RNA的提取 | 第24-25页 |
·团头鲂Chordin基因c DNA全长克隆 | 第25-29页 |
·逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR分析 | 第29-30页 |
·整胚原位杂交 | 第30-32页 |
·饥饿与生长激素处理 | 第32-33页 |
·序列比对及进化树构建 | 第33-34页 |
·实验结果与分析 | 第34-41页 |
·团头鲂Chordin基因c DNA全长克隆与分析 | 第34-35页 |
·团头鲂Chordin基因氨基酸序列同源性及分子进化分析 | 第35-37页 |
·团头鲂Chordin基因的m RNA表达分析 | 第37-40页 |
·饥饿和生长激素处理结果分析 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第三章 Chordin A基因对金鱼及其杂交鱼尾型的影响研究 | 第43-62页 |
·实验材料与仪器 | 第44-45页 |
·实验用鱼、胚胎及质粒 | 第44页 |
·实验仪器 | 第44页 |
·实验试剂 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-50页 |
·分子检测及测序 | 第45-47页 |
·整胚原位杂交 | 第47-48页 |
·Chordin A基因的敲除 | 第48-50页 |
·实验结果与分析 | 第50-60页 |
·金鱼及其杂交鱼PCR扩增结果分析 | 第50-51页 |
·金鱼及其杂交鱼品系尾型及Chordin A基因型分析 | 第51-55页 |
·双尾型金鱼P_0代杂交后代表型的分析 | 第55-56页 |
·整胚原位杂交结果比较 | 第56-57页 |
·单尾型Chordin A基因的敲除及检测 | 第57-60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
结论与展望 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
附录:英文缩略语表 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
在校期间发表论文 | 第74页 |