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通过培养基优化和相关基因敲除提高枯草芽胞杆菌的产量
 
     论文目录
 
本研究的主要创新点第5-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 前言第14-57页
    1 枯草芽胞杆菌及其应用第14-19页
    2 枯草芽胞杆菌制剂的相关研究进展第19-32页
        2.1 枯草芽胞杆菌固体发酵第19-20页
        2.2 以收获菌体细胞为目的枯草芽胞杆菌液体发酵第20-27页
        2.3 以提高活芽胞数为目的枯草芽胞杆菌液体发酵第27-30页
        2.4 统计试验设计在优化枯草芽胞杆菌发酵培养基和培养条件中的应用第30-31页
        2.5 枯草芽胞杆菌制剂生产方面尚待改进的方面第31-32页
    3 枯草芽胞杆菌细胞自溶的研究进展第32-54页
        3.1 枯草芽胞杆菌的细胞自溶现象第32-38页
        3.3 枯草芽胞杆菌自溶现象的遗传分析第38-44页
        3.4 枯草芽胞几个重要自溶酶与其调控因子的研究进展第44-51页
        3.5 高温培养对枯草芽胞杆菌的危害及控制该菌细胞自溶的策略第51-54页
    4 研究目的和意义第54-57页
        4.1 提高枯草芽胞杆菌工业菌株WHK-Z12的芽胞产量第54-55页
        4.2 抑制枯草芽胞杆菌168的细胞白溶第55-57页
第二章 响应面方法优化培养基以提高枯草芽胞杆菌WHK-Z12的芽胞产量第57-82页
    1 试验材料第57-59页
        1.1 菌株第57页
        1.2 培养基成分和试剂第57-59页
        1.3 培养基第59页
        1.4 主要试验仪器设备第59页
    2 实验方法第59-67页
        2.1 接种物的制备第59-60页
        2.2 摇瓶培养第60页
        2.3 生物反应器发酵第60页
        2.4 测定芽胞产量第60页
        2.5 分析培养基的氨基酸组成第60-61页
        2.6 试验设计第61-67页
    3 试验结果与分析第67-79页
        3.1 不同碳源和氮源对芽胞产量的影响第67-69页
        3.2 使用Plackett-Burman筛选关键的培养基成分第69-71页
        3.3 采用最陡坡试验寻找可操作的优化区域第71-72页
        3.4 响应面模拟和优化枯草芽胞杆菌WHK-Z12的芽胞产量第72-76页
        3.5 小规模分批发酵验证预测模型第76-78页
        3.6 小结第78-79页
    4 讨论第79-82页
第三章 敲除自溶酶相关基因来抑制枯草芽胞杆菌168的细胞自溶第82-136页
    1 实验材料第82-87页
        1.1 菌株与质粒第82-84页
        1.2 药品与试剂第84-85页
        1.3 培养基与溶液第85-86页
        1.4 主要仪器设备第86-87页
    2 实验方法第87-98页
        2.1 枯草芽胞杆菌基因组与质粒DNA、大肠杆菌质粒DNA的提取第87页
        2.2 引物设计第87-89页
        2.3 聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因第89-90页
        2.4 限制性内切酶反应第90页
        2.5 DNA琼脂糖电泳与电泳产物的回收纯化第90页
        2.6 连接反应第90页
        2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备、质粒DNA的转化及转化子鉴定第90-91页
        2.8 枯草芽胞杆菌感受态细胞的制备、质粒DNA的转化及转化子的鉴定第91-92页
        2.9 DNA序列测定与序列比对第92页
        2.10 敲除载体的构建第92-95页
        2.11 同源重组法敲除目的基因第95-96页
        2.12 基因敲除流程第96-97页
        2.13 观察枯草芽胞杆菌菌体生长速度第97页
        2.14 测定枯草芽胞杆菌的生长曲线第97-98页
        2.15 枯草芽胞杆菌活菌数和芽胞数的测定第98页
    3 结果与分析第98-131页
        3.1 基因敲除载体的构建第98-105页
        3.2 枯草芽胞杆菌自溶酶相关基因缺失突变株的构建和鉴定第105-115页
        3.3 培养温度对枯草芽胞杆菌细胞自溶的影响第115-116页
        3.4 自溶酶基因的单突变对枯草芽胞杆菌细胞自溶的影响第116-121页
        3.5 自溶酶基因的双重缺失对枯草芽胞杆菌细胞自溶的影响第121-124页
        3.6 自溶酶基因的多重缺失对细胞自溶的影响第124-130页
        3.7 小结第130-131页
    4 讨论第131-136页
        4.1 枯草芽胞杆菌的原噬菌体有功能吗?第131-133页
        4.2 抑制枯草芽胞杆菌细胞自溶的最佳策略第133-134页
        4.3 枯草芽胞杆菌中各个与自溶有关的基因在功能上是如何互补的?第134-136页
本研究总结第136-139页
参考文献第139-161页
博士研究生期间所发表论文第161-162页
致谢第162-164页
作者简历第164页

 
 
论文编号BS2941657,这篇论文共164
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