| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| 1.1 癌症治疗现状 | 第10-12页 |
| 1.2 痘苗病毒（Vaccinia） | 第12页 |
| 1.3 程序性坏死（Necroptosis） | 第12-13页 |
| 1.4 粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF) | 第13-14页 |
| 1.5 SMAC 基因 | 第14-15页 |
| 1.6 FMDV 2A 连接子 | 第15-16页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第16-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 主要质粒和菌株 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.4 抗体 | 第17页 |
| 2.1.5 引物 | 第17-18页 |
| 2.1.6 主要仪器与设备 | 第18-19页 |
| 2.1.7 主要溶液配制 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-27页 |
| 2.2.1 GM-CSF 和 SMAC 双基因 CDS 的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.2 克隆构建 | 第20-21页 |
| 2.2.3 重组痘病毒的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.4 重组痘病毒的筛选 | 第22-23页 |
| 2.2.5 重组痘病毒的鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.6 病毒的扩增 | 第24页 |
| 2.2.7 病毒滴度的测定 | 第24页 |
| 2.2.8 MTT 检测细胞活力 | 第24-25页 |
| 2.2.9 western blot | 第25页 |
| 2.2.10 免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP) | 第25页 |
| 2.2.11 RNA 提取 | 第25-26页 |
| 2.2.12 PI 和 Annexin V 染色 | 第26页 |
| 2.2.13 细胞的传代和培养 | 第26-27页 |
| 2.2.14 Hoechst 染色 | 第27页 |
| 2.2.15 统计学分析 | 第27页 |
| 3 实验结果 | 第27-41页 |
| 3.1 GM-CSF 和 SMAC 双基因病毒构建 | 第27页 |
| 3.2 外源基因表达和剪切 | 第27-28页 |
| 3.3 VV-SMAC 对 HCC 活力的影响 | 第28页 |
| 3.4 VV-SMAC 诱导 HCC 发生凋亡 | 第28-30页 |
| 3.5 VV-SMAC 引起 HCC 的坏死 | 第30-31页 |
| 3.6 VV-SMAC 诱导了 Ripoptosome 的形成 | 第31页 |
| 3.7 VV-SMAC 和 vinblastine 对 HCC 的协同治疗 | 第31-36页 |
| 3.8 基因毒性类药物降低肝癌细胞的细胞活力 | 第36-37页 |
| 3.9 白藜芦醇抑制肝癌细胞的细胞活力 | 第37-38页 |
| 3.10 基因毒性类药物抑制痘病毒的感染 | 第38-40页 |
| 3.11 白藜芦醇和甲硫哒嗪影响病毒感染的早期 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
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