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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--MicroRNA-375过表达转基因小鼠IGF2R基因的印记状态研究
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MicroRNA-375过表达转基因小鼠IGF2R基因的印记状态研究
 
     论文目录
 
中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
专业名词缩写中英对照表第11-12页
第一章 MicroRNA-375过表达转基因小鼠IGF2R基因的印记状态研究第12-45页
 前言第12-17页
 实验技术路线第17-18页
 1 IGF2R基因及其反义转录本Air的表达分析第18-22页
   ·主要实验材料与仪器第18页
   ·组织总RNA的提取第18-19页
   ·总RNA的DNaseⅠ处理第19页
   ·RNA的纯化第19-20页
   ·逆转录得到cDNA第20页
   ·实时荧光定量PCR引物设计第20-21页
   ·实时荧光定量PCR检测IGF2R及Air表达水平第21-22页
 2 IGF2R基因差异甲基化区域的DNA甲基化分析第22-31页
   ·主要实验材料与仪器第22-24页
   ·DNA的重亚硫酸盐修饰第24-25页
   ·修饰后产物的纯化第25页
   ·重亚硫酸盐测序法PCR引物设计第25-26页
   ·DMR区特异性片段PCR扩增第26页
   ·DMR区特异性片段PCR产物胶回收纯化第26-27页
   ·DMR区特异性PCR产物片段与T载体连接第27-28页
   ·大肠杆菌E.coli DH5α感受态的制备第28-29页
   ·氨苄抗性培养平板的准备第29页
   ·T载体连接产物转化感受态E.coli DH5α第29页
   ·阳性克隆质粒的小量制备第29-30页
   ·阳性克隆质粒的测序第30-31页
 3 结果第31-42页
   ·Real-time PCR检测肝、肺、肾组织中IGF2R及Air的表达第31-35页
   ·IGF2R基因DMR区甲基化状态分析第35-42页
     ·DMR区目的片段的扩增第35页
     ·IGF2R基因DMR1区甲基化检测结果第35-38页
     ·IGF2R基因DMR2区甲基化检测结果第38-42页
 4 讨论第42-44页
 5 结论第44-45页
第二章 进行性核连缀转录分析(Nuclear run-on assay)实验方法的建立第45-62页
 前言第45-47页
 1 材料和方法第47-49页
   ·材料第47页
   ·试剂第47-48页
   ·仪器第48-49页
 2 方法第49-56页
   ·细胞的制备第49-50页
     ·冻存细胞复苏第49页
     ·细胞传代与培养第49页
     ·细胞转染第49-50页
   ·细胞核的抽提第50-51页
   ·体外转录第51-52页
   ·新生mRNA的纯化第52页
   ·膜的制备第52-54页
     ·Hela细胞cDNA的制备第52-53页
     ·目的基因cDNA片段的获得第53页
     ·目的基因cDNA片段的胶回收纯化第53页
     ·硝酸纤维素膜的制备第53-54页
   ·杂交第54页
   ·洗膜第54页
   ·放射自显影第54页
   ·试剂配制第54-56页
 3 结果第56-59页
   ·目的基因片段的制备第56-57页
   ·进行性核连缀转录分析(Nuclear run-on assay)第57-59页
 4 讨论第59-61页
 5 结论第61-62页
参考文献第62-67页
综述第67-80页
致谢第80-81页
攻读硕士学位期间发表的文章第81-82页
个人简历第82页

 
 
论文编号BS439657,这篇论文共82
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