| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 常用的转基因方法 | 第11-13页 |
| 1.1.1 农杆菌介导法 | 第12-13页 |
| 1.1.2 基因枪法 | 第13页 |
| 1.1.3 花粉管通道法 | 第13页 |
| 1.2 影响转化效率的因素 | 第13-16页 |
| 1.2.1 外植体的选择 | 第13-14页 |
| 1.2.2 基因型 | 第14页 |
| 1.2.3 培养基成分 | 第14-15页 |
| 1.2.4 培养条件 | 第15-16页 |
| 1.3 抗除草剂转基因植物研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 除草剂的种类及应用 | 第16-17页 |
| 1.3.2 抗除草剂转基因植物研究现状 | 第17-18页 |
| 1.4 抗草甘膦转基因棉花研究现状 | 第18-20页 |
| 1.4.1 草甘膦作用机理 | 第18-19页 |
| 1.4.2 抗草甘膦转基因棉花研究现状 | 第19-20页 |
| 1.5 棉花抗逆研究进展 | 第20-23页 |
| 1.5.1 非生物逆境对棉花的影响 | 第20-22页 |
| 1.5.2 棉花抗逆研究进展 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的意义和目的 | 第23-24页 |
| 1.7 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 农杆菌介导棉花的批量遗传转化 | 第25-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第25页 |
| 2.1.5 培养基 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 棉花转基因方法 | 第27-28页 |
| 2.2.2 高频再生品系的筛选方法 | 第28-29页 |
| 2.2.3 基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.4 转基因棉花PCR检测 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 棉花遗传转化体系的建立 | 第30-33页 |
| 2.3.2 棉花转化体系的规模化应用 | 第33页 |
| 2.3.3 高频再生体系的获得 | 第33-34页 |
| 2.3.4 胚性愈伤为受体遗传转化的研究 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 转G10eve基因抗草甘膦棉花的获得及抗性鉴定 | 第37-65页 |
| 3.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 3.1.2 菌株和质粒 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第38页 |
| 3.1.5 培养基 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-46页 |
| 3.2.1 生物信息学初步分析 | 第38-39页 |
| 3.2.2 棉花总RNA的提取 | 第39页 |
| 3.2.3 cDNA反转录 | 第39-40页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| 3.2.5 基因组DNA的提取 | 第41页 |
| 3.2.6 转基因棉花PCR检测 | 第41-42页 |
| 3.2.7 转G10eve基因棉花的Southern杂交 | 第42-45页 |
| 3.2.8 棉花转基因方法 | 第45页 |
| 3.2.9 转基因株系草甘膦抗性初步筛选 | 第45页 |
| 3.2.10 盆栽转基因L91株系抗性鉴定 | 第45页 |
| 3.2.11 莽草酸的提取及含量测定 | 第45页 |
| 3.2.12 转基因棉花田间抗性鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-62页 |
| 3.3.1 G10eve基因初步分子生物信息学分析 | 第46-47页 |
| 3.3.2 转G10eve基因棉花的获得 | 第47-48页 |
| 3.3.3 胚性愈伤组织检测 | 第48页 |
| 3.3.4 转基因棉花植株PCR检测 | 第48-49页 |
| 3.3.5 表达量分析 | 第49-50页 |
| 3.3.6 转基因棉花拷贝数分析 | 第50-51页 |
| 3.3.7 转基因株系草甘膦抗性初筛 | 第51-52页 |
| 3.3.8 子叶期L91草甘膦抗性研究 | 第52-54页 |
| 3.3.9 内源EPSPS基因表达量分析 | 第54-55页 |
| 3.3.10 大田草甘膦抗性鉴定 | 第55-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-65页 |
| 第四章 转AmCBF1基因棉花的获得及抗逆性鉴定 | 第65-88页 |
| 4.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第65页 |
| 4.1.2 菌株和质粒 | 第65页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第65页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第65页 |
| 4.1.5 培养基 | 第65-66页 |
| 4.2 实验方法 | 第66-73页 |
| 4.2.1 棉花总RNA的提取 | 第66页 |
| 4.2.2 cDNA反转录 | 第66页 |
| 4.2.3 实时荧光定量PCR | 第66-67页 |
| 4.2.4 基因组DNA的提取 | 第67页 |
| 4.2.5 转基因棉花PCR检测 | 第67页 |
| 4.2.6 转AmCBF1基因棉花的Southern杂交 | 第67-68页 |
| 4.2.7 转AmCBF1基因棉花的侧翼序列扩增 | 第68页 |
| 4.2.8 棉花转基因方法 | 第68页 |
| 4.2.9 低温处理对棉花种子萌发率的影响 | 第68-69页 |
| 4.2.10 转基因棉花幼苗抗寒性研究 | 第69页 |
| 4.2.11 干旱处理对棉花种子萌发率的影响 | 第69页 |
| 4.2.12 转基因棉花幼苗耐旱性鉴定 | 第69页 |
| 4.2.13 逆境胁迫对转基因棉花幼苗光合作用的影响 | 第69页 |
| 4.2.14 生理生化指标的测定 | 第69-73页 |
| 4.3 结果与分析 | 第73-85页 |
| 4.3.1 转AmCBF1基因棉花的获得 | 第73-74页 |
| 4.3.2 T_0代转AmCBF1基因棉花PCR检测 | 第74-75页 |
| 4.3.3 转基因棉花纯合株系的获得 | 第75页 |
| 4.3.4 转AmCBF1纯合株系外源基因表达量分析 | 第75-76页 |
| 4.3.5 转AmCBF1棉花拷贝数分析 | 第76页 |
| 4.3.6 侧翼序列分析 | 第76-78页 |
| 4.3.7 低温处理下转基因棉花种子的萌发率 | 第78-79页 |
| 4.3.8 低温处理下转基因棉花生理指标的变化 | 第79-80页 |
| 4.3.9 低温处理对转基因棉花光合作用的影响 | 第80-81页 |
| 4.3.10 干旱处理对转基因棉花种子萌发的影响 | 第81-82页 |
| 4.3.11 干旱处理下转基因棉花生理指标的变化 | 第82-84页 |
| 4.3.12 干旱处理对转基因棉花光合作用的影响 | 第84页 |
| 4.3.13 农艺性状调查 | 第84-85页 |
| 4.4 讨论 | 第85-88页 |
| 第五章 全文总结 | 第88-90页 |
| 5.1 全文总结 | 第88-89页 |
| 5.2 创新之处 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 作者简历 | 第100页 |
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