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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--草酸脱羧酶的无载体固定化及化学修饰的研究
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草酸脱羧酶的无载体固定化及化学修饰的研究
 
     论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 前言第10-21页
   ·研究背景第10-14页
     ·草酸的结构与来源第10页
     ·草酸的危害第10-11页
     ·草酸引起的结石问题第11页
     ·防治体内草酸水平升高的对策第11-12页
     ·降解草酸的酶第12页
     ·草酸脱羧酶的来源第12-13页
     ·草酸脱羧酶的理化性质第13页
     ·草酸脱羧酶降解草酸的研究进展第13-14页
   ·无载体固定化第14-17页
     ·固定化技术的发展第14-15页
     ·无载体固定化技术第15页
     ·交联溶解酶(CLEs)第15页
     ·交联酶晶体(CLECs)第15页
     ·交联酶聚集体(CLEAs)第15-16页
     ·CLEAs的制备第16-17页
   ·蛋白质的化学修饰第17-21页
     ·修饰剂的选择第17页
     ·聚乙二醇对蛋白质的修饰第17-18页
     ·右旋糖酐对蛋白质的修饰第18-21页
2 草酸脱羧酶的诱导表达优化第21-30页
   ·主要材料第21-22页
     ·培养基第21页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·方法第22-24页
     ·酶的抽提第22页
     ·酶活性的检测第22页
     ·生长曲线的测定第22页
     ·诱导条件对重组草酸脱羧酶表达的影响第22-23页
     ·正交试验第23-24页
   ·结果与分析第24-29页
     ·基因工程菌的生长曲线第24页
     ·发酵液初始pH对诱导表达的影响第24-25页
     ·诱导时机的影响第25-26页
     ·诱导时间的影响第26-27页
     ·IPTG浓度的影响第27页
     ·Mn~(2+)离子对草酸脱羧酶表达的影响第27-28页
     ·乳糖协同IPTG诱导表达结果第28-29页
     ·正交试验第29页
   ·小结第29-30页
3 交联草酸脱羧酶聚集体的制备及其性质研究第30-42页
   ·主要材料第30-31页
     ·培养基第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·主要仪器第31页
   ·方法第31-34页
     ·草酸脱羧酶的制备第31页
     ·草酸脱羧酶的纯化第31-32页
     ·蛋白质SDS-PAGE电泳第32-33页
     ·草酸脱羧酶聚集体的制备与交联第33页
     ·游离草酸脱羧酶和交联草酸脱羧酶聚集体的活性测定第33-34页
     ·游离草酸脱羧酶与交联草酸脱羧酶聚集体的性质第34页
   ·结果与分析第34-41页
     ·草酸脱羧酶的表达第34页
     ·草酸脱羧酶的分离纯化第34-36页
     ·交联草酸脱羧酶聚集体的制备与条件优化第36-38页
     ·游离酶与交联酶聚集体的性质比较第38-41页
   ·结论第41-42页
4 右旋糖酐对草酸脱羧酶的修饰第42-52页
   ·主要材料第42-43页
     ·培养基第42页
     ·主要试剂第42-43页
     ·主要仪器34第43页
   ·方法第43-46页
     ·草酸脱羧酶的制备第43-44页
     ·快速蛋白层析系统(FPLC)对草酸脱羧酶的纯化第44页
     ·右旋糖酐对草酸脱羧酶修饰条件的优化第44-45页
     ·草酸脱羧酶修饰率和酶活保留的测定第45页
     ·SDS-PAGE分析第45页
     ·IR分析第45页
     ·草酸脱羧酶的酶活测定第45-46页
     ·修饰前后稳定性比较第46页
   ·结果与分析第46-51页
     ·草酸脱羧酶的制备第46页
     ·草酸脱羧酶的纯化第46-47页
     ·草酸脱羧酶的修饰率及酶活回收率第47-48页
     ·修饰前后SDS-PAGE结果第48-49页
     ·红外光谱分析结果第49页
     ·修饰前后pH稳定性对比第49-50页
     ·草酸脱羧酶修饰前后的热稳定性比较第50页
     ·修饰前后草酸脱羧酶对胰蛋白酶消化道耐受性第50-51页
   ·小结第51-52页
5 结论与展望第52-54页
   ·结论第52页
   ·展望第52-54页
参考文献第54-57页
致谢第57-58页

 
 
论文编号BS95207,这篇论文共58
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